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公开(公告)号：CN101157727A
公开(公告)日：2008-04-09
申请号：CN200710071321.0
申请日：2007-09-14
Applicant: 浙江大学
IPC: C07K16/18 , G01N33/577
Abstract: 本发明的识别水禽共同IgY抗原的单克隆抗体及制备方法属于生物技术领域，涉及抗体工程技术。用辛酸－硫酸铵盐析法和Superdex 200凝胶层析法从斑头雁、鸬鹚、鸭和鹅的血清中提取IgY蛋白；用纯化的IgY蛋白联合免疫BALB/c小鼠，用小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合，以HAT培养基选择性培养，用15种水禽IgY蛋白进行间接ELISA筛选和有限稀释法克隆化，获得分泌抗15种水禽共同IgY抗原单克隆抗体的杂交瘤细胞株，其中2A12、5D4、3A8和5H9识别水鸟和水禽IgY轻链，7D3、6A2和6D11识别水鸟和水禽IgY重链，其腹水的ELISA效价为0.5－1.0×106，Ig亚型重链为IgG1，轻链为κ。本发明为水鸟和水禽流行病尤其是禽流感抗体检测提供诊断试剂。
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公开(公告)号：CN101139589A
公开(公告)日：2008-03-12
申请号：CN200710084568.6
申请日：2005-03-08
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种表达传染性法氏囊病毒VP2基因编码蛋白永生化细胞制备方法。反转录获得传染性法氏囊病毒基因组cDNA，PCR扩增VP2基因片段与哺乳动物细胞真核表达pCI－neo构建成重组表达质粒。在Lipofectamine 2000介导下转染Vero细胞，在G418的抗性下，通过极限稀释法克隆单细胞，经PCR、RT－PCR、Southern blot、Northern blot、IFA/IPMA检测，获得含目的基因的克隆化细胞系，经反复传代培养后不丢失。这些细胞系可作为研究传染性法氏囊病毒基因编码蛋白对宿主细胞基因表达调控的载体，以及将表达传染性法氏囊病毒VP2基因编码蛋白应用于传染性法氏囊病的免疫接种。本发明应用基因工程技术、细胞重组技术制备表达传染性法氏囊病毒VP2基因编码蛋白的永生细胞，具有重复性强、稳定性好，再生能力强等特点。
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公开(公告)号：CN101100693A
公开(公告)日：2008-01-09
申请号：CN200710070130.2
申请日：2007-07-20
Applicant: 浙江大学
CPC classification number: Y02A50/451
Abstract: 本发明牛奶样品布氏杆菌套式PCR检测方法涉及基因工程技术。根据布氏杆菌16S rRNA基因序列，设计合成套式PCR的外向引物和内向引物；用优化CTAB-NaCl法提取牛奶样品细菌染色体DNA，以外向引物和内向引物进行二次PCR扩增，凝胶电泳检查PCR产物，建立牛奶样品布氏杆菌套式PCR检测方法。该方法可直接从牛奶样品中检出污染布氏杆菌，对牛奶样品中布氏杆菌的检测下限达3.3CFU/mL，与大肠杆菌、溶血性链球菌、沙门氏菌、克雷伯氏杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌和螺旋杆菌等细菌不存在非特异扩增，具有特异性强、敏感性高和实用性强等优点，可为奶牛布氏杆菌病普查和监测，以及牛奶制品食品安全监控提供新的技术手段。
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公开(公告)号：CN1696292A
公开(公告)日：2005-11-16
申请号：CN200510049306.7
申请日：2005-03-08
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种表达传染性法氏囊病毒基因编码蛋白永生化细胞制备方法。反转录获得传染性法氏囊病毒基因组cDNA，PCR扩增不同编码蛋白的基因片段与哺乳动物细胞真核表达pCI－neo构建成重组表达质粒。在Lipofectamine 2000介导下转染Vero细胞，在G418的抗性下，通过极限稀释法克隆单细胞，经PCR、RT－PCR、Southern blot、Northern blot、IFA/IPMA检测，获得含目的基因的克隆化细胞系，经反复传代培养后不丢失。这些细胞系可作为研究传染性法氏囊病毒基因编码蛋白对宿主细胞基因表达调控的载体，以及将表达传染性法氏囊病毒基因编码蛋白应用于传染性法氏囊病的免疫接种。本发明应用基因工程技术、细胞重组技术制备表达传染性法氏囊病毒基因编码蛋白的永生细胞，具有重复性强、稳定性好，再生能力强等特点。
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公开(公告)号：CN1584599A
公开(公告)日：2005-02-23
申请号：CN200410025288.4
申请日：2004-06-15
Applicant: 浙江大学
IPC: G01N33/558 , G01N33/543 , G01N33/547 , G01N33/52 , G01N21/25
Abstract: 本发明公开了一种猪圆环病毒2型(PCV2)抗原或抗体检测试纸条。试纸条具有支撑层，反应试剂载体吸附层，支撑层为不吸水薄片层，吸附层固定在支撑层上，吸附层从样品端依次为纤维层(2)，金标纤维层(3)，纤维素膜层(4)，手柄端为吸水材料层，在纤维素膜层上印制有对照印迹“|”和检测印迹“|”，其排列组合为“| |”。以抗PCV2 dCap单克隆抗体mAb1溶液在纤维素膜上印制对照印迹“|”，山羊抗猪IgG多克隆抗体溶液印制检测印迹“|”，其组合排列为“| |”。本发明有益的积极效果是：检测试剂条操作简单，易于大范围推广应用，具有广阔的市场前景和较大的经济、社会效益。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN1544630A
公开(公告)日：2004-11-10
申请号：CN200310108658.6
申请日：2003-11-12
Applicant: 浙江大学
IPC: C12N15/26 , A61K39/39 , A61K39/395 , A61P37/06 , C07K14/55
Abstract: 本发明公开了一种重组鸭白介素2蛋白制备方法及其用途。RT－PCR扩增的不同品种鸭的鸭白介素－2cDNA片段与原核表达载体pBAD/hisB载体和真核表达载体pMETαA构建高效表达质粒，重组表达载体分别转化大肠杆菌LMG194和酵母菌株PMAD11和PMAD16后诱导表达。大肠杆菌诱导后经超声波裂解、离心去沉淀即可得到鸭白介素－2粗制品，用蛋白纯化系统得到鸭白介素2纯品。鸭白介素－2粗制品或纯品加保护剂后可以作为免疫佐剂、抗病添加剂和疾病治疗药物。鸭白介素－2单克隆抗体和多克隆抗体的制备过程简单经济，可以作为良好的免疫抑制剂。本发明应用基因工程技术制备的重组鸭白介素－2蛋白，具有工艺流程简单，生产成本低，稳定性好，生物学活性高等特点。
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公开(公告)号：CN118581115B
公开(公告)日：2025-02-18
申请号：CN202410830921.4
申请日：2024-06-25
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明提供了一种猪丁型冠状病毒感染性cDNA克隆及构建方法和应用，属于生物技术领域。本发明提供了一种猪丁型冠状病毒感染性cDNA克隆的构建方法，将猪丁型冠状病毒的基因组划分为若干个片段，基于酵母同源重组的一步法完成克隆构建，具有高效、快速、稳定等特点。本发明所述感染性cDNA克隆具有良好的稳定性，可直接利用CRISPR/Cas9基因编辑在基因水平上改造猪丁型冠状病毒基因组。本发明提供的感染性cDNA克隆可直接通过转染哺乳动物细胞拯救重组病毒，简化了病毒拯救操作流程。本发明还提供了可表达HiBiT标签蛋白的猪丁型冠状病毒感染性克隆的构建方法，为深入研究猪丁型冠状病毒感染机制提供了良好的技术手段。
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公开(公告)号：CN118593489A
公开(公告)日：2024-09-06
申请号：CN202410773549.8
申请日：2024-06-17
Applicant: 浙江大学
IPC: A61K31/4418 , A61P31/22
Abstract: 本发明公开了一种JH‑RE‑06在制备抑制伪狂犬病病毒DNA合成药物中的应用，跨损伤DNA合成通路抑制剂JH‑RE‑06具有REV1抑制剂的特性，可诱导REV1发生二聚化。REV1介导的TLS通路是猪伪狂犬病病毒DNA合成所必须的，因此JH‑RE‑06可以抑制猪伪狂犬病病毒的增殖。本发明首次发现JH‑RE‑06抑制伪狂犬病病毒增殖的作用机制，首次将该药物用于抗病毒。
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公开(公告)号：CN102286529B
公开(公告)日：2012-11-14
申请号：CN201110123583.3
申请日：2011-05-13
Applicant: 浙江大学
IPC: C12N15/85
Abstract: 本发明公开了一种家蚕丝腺细胞合成分泌狂犬病病毒糖蛋白的方法。是先构建家蚕合成分泌狂犬病病毒糖蛋白RVGP的载体pBSer1RVGP-A3EGFP质粒和pBFibLRVGP-A3EGFP质粒，再利用显微注射转基因家蚕技术将这2种质粒分别与能够提供转座酶的辅助质粒一起导入到家蚕受精卵内，依靠piggyBac转座子的转座特性，使绿色荧光蛋白基因和狂犬病病毒糖蛋白基因导入到家蚕的基因组内，并得到稳定遗传和表达，从而创制家蚕中部丝腺生物反应器、后部丝腺生物反应器、以及丝腺生物反应器三种生物反应器，育成家蚕中部丝腺细胞、后部丝腺细胞或两部分丝腺细胞能够特异性合成分泌狂犬病病毒糖蛋白的转基因家蚕新品种。
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