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公开(公告)号：CN112111506A
公开(公告)日：2020-12-22
申请号：CN202011006379.9
申请日：2020-09-23
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种RBS优化提高γ‑谷氨酰胺转肽酶表达量的方法，属于基因工程领域。起始的翻译速率对于外源蛋白的表达影响很大，通过对RBS序列进行改造，优化RBS，可以进一步提高翻译速率从而很大程度上提高目的蛋白表达量，本发明对表达载体pMA5的RBS序列进行改造，提高了酶的翻译效率，从而提高了酶活，采用本发明提供的载体pMA5‑RBS361和pMA5‑RBS362构建的重组枯草芽孢杆菌中，使目的基因γ‑谷氨酰胺转肽酶的酶活得到了提高；其表达量较原始pMA5‑ggt/B.subtilis 168分别提高了1.51倍和1.62倍。
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公开(公告)号：CN112080503A
公开(公告)日：2020-12-15
申请号：CN202011006160.9
申请日：2020-09-23
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种优化启动子提高γ‑谷氨酰胺转肽酶表达量的方法，属于基因工程领域。本发明实现了B.pumilus ML413来源的γ‑谷氨酰转肽酶基因在枯草芽孢杆菌168中的高效表达，采用本发明所提供的优化后的核苷酸序列如SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.2所示的启动子，构建的基因工程菌对γ‑谷氨酰转肽酶的表达量，较采用未优化的启动子构建的基因工程菌对γ‑谷氨酰转肽酶的表达量，分别提高了30％、63％。
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公开(公告)号：CN111849848A
公开(公告)日：2020-10-30
申请号：CN202010715301.8
申请日：2020-07-23
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种抗噬菌体的大肠杆菌底盘细胞的构建及应用，属于基因工程以及微生物工程技术领域。本发明通过在大肠杆菌BL21中过表达LysR家族转录调控因子YafC编码基因yafC，显著提高了大肠杆菌抗噬菌体能力；进一步利用本发明选育得到的抗噬菌体大肠杆菌BL21构建γ-氨基丁酸(GABA)生产菌株BL21-pET28a(+)-YafC-Gad，并用于生物转化生产γ-氨基丁酸发现，整个发酵进程中不再存在噬菌体感染的风险，且重组菌株GABA的产量高达278.3±16.8g/L，摩尔转化率达98.4±0.3％。
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公开(公告)号：CN111718883A
公开(公告)日：2020-09-29
申请号：CN202010595081.X
申请日：2020-06-28
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一株可生产胍基丁胺的重组钝齿棒杆菌及其应用，属于生物技术领域。本发明提供了一株重组钝齿棒杆菌C.crenatum SYPA5-5/pXMJ19-speA，将此重组钝齿棒杆菌接种至含有葡萄糖的发酵培养基中摇瓶发酵72h，即可使发酵液中胍基丁胺的产量高达9.7g/L，同时，副产物L-精氨酸的含量仅为0.23g/L，将此重组钝齿棒杆菌接种至含有葡萄糖的发酵培养基中发酵罐发酵72h，即可使发酵液中胍基丁胺的产量高达37.44g/L，同时，副产物L-精氨酸的含量仅为0.76g/L，并且，整个发酵过程均无需添加L-精氨酸。
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公开(公告)号：CN111607578A
公开(公告)日：2020-09-01
申请号：CN202010460312.6
申请日：2020-05-27
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种氧甲基转移酶突变体及其在生产灵菌红素中的应用，属于生物技术领域。本发明提供了可高产灵菌红素的粘质沙雷氏菌工程菌JNB5-1/S53CPigF和JNB5-1/G176C/M245C/S53CPigF，粘质沙雷氏菌工程菌S53CPigF和JNB5-1/G176C/M245C/S53CPigF分别表达S53CPigF和G176C/M245C/S53CPigF，将粘质沙雷氏菌工程菌JNB5-1/S53CPigF和JNB5-1/G176C/M245C/S53CPigF分别接种至发酵培养基中发酵96h，即可使发酵液中灵菌红素的产量分别高达7.24g/L和7.02g/L。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN111575221A
公开(公告)日：2020-08-25
申请号：CN202010457248.6
申请日：2020-05-26
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种基于PNTs的生产灵菌红素的方法，属于生物技术领域。本发明提供了可高产灵菌红素的粘质沙雷氏菌工程菌JNB5-1/pigFPNT和JNB5-1/pigNPNT，粘质沙雷氏菌工程菌JNB5-1/pigFPNT和JNB5-1/pigNPNT是通过分别在粘质沙雷氏菌的灵菌红素合成基因簇pigF和pigN的3'端连接序列如SEQ ID No.11所示的核苷酸片段获得的，将粘质沙雷氏菌工程菌JNB5-1/pigFPNT和JNB5-1/pigNPNT分别接种至发酵培养基中发酵96h，即可使发酵液中灵菌红素的产量分别高达7.55g/L、8.37g/L。
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公开(公告)号：CN111534474A
公开(公告)日：2020-08-14
申请号：CN202010237129.X
申请日：2020-03-30
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了重组枯草芽孢杆菌及其在生产ε-聚赖氨酸中的应用，属于生物技术领域。本发明提供了一种可高效转化L-赖氨酸生产ε-聚赖氨酸的重组枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis 168/PMA5-pls，将此重组枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis 168/PMA5-pls添加至含有L-赖氨酸的反应体系中反应4h，即可使反应液中ε-聚赖氨酸的产量以及转化率分别高达195.1mg/L和17.4％，因此，利用此重组枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis 168/PMA5-pls生产ε-聚赖氨酸具有生产周期短、产量高的优势。
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公开(公告)号：CN107988194B
公开(公告)日：2020-08-04
申请号：CN201711350235.3
申请日：2017-12-15
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种酶活提高的L‑天冬氨酸α‑脱羧酶突变体及其构建方法，属于基因工程技术领域。本发明的突变体是在SEQ ID NO.2所示的氨基酸的基础上，将第56位谷氨酸突变成丝氨酸。本发明得到的突变体在大肠杆菌中表达，经过对纯酶的酶活测定，突变酶E56S的酶活相对原始酶BsADC提高了55％，并且用水作为溶剂进行的产β丙氨酸实验，可以实现8h产215gβ丙氨酸，且其转化率为94％。本发明表明56位氨基酸残基对酶的催化作用有较大影响，对该酶的催化机理的研究提供了一定的基础，并提高了该酶的工业应用潜力。
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公开(公告)号：CN108611333B
公开(公告)日：2020-06-09
申请号：CN201810442796.4
申请日：2018-05-10
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种转肽活力提高的γ‑谷氨酰转肽酶突变体及其构建方法，属于基因工程领域。本发明的突变体是在SEQ ID N0.3所示的氨基酸的基础上，将第463位氨基酸由苏氨酸突变成天冬氨酸。本发明得到的突变体在枯草芽孢杆菌中表达，γ‑谷氨酰转肽酶突变体酶的转肽反应活力较突变前提高22.6％，水解反应活力降低了90％。本发明表明463位氨基酸残基对γ‑谷氨酰转肽酶的转肽反应活力有较大影响，对该酶的催化机理的研究提供了一定的基础，并提高了该酶的工业应用潜力。本发明所得的γ‑谷氨酰转肽酶突变体可用于制备L‑茶氨酸。
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公开(公告)号：CN110982773A
公开(公告)日：2020-04-10
申请号：CN201911392421.2
申请日：2019-12-30
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了重组枯草芽孢杆菌及其在生产2,3-丁二醇中的应用，属于生物技术领域。本发明提供了一种可高产2,3-丁二醇的重组枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis/PMA5-Pspac-gdh-tdh，将此重组枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis/PMA5-Pspac-gdh-tdh接种至发酵培养基中发酵60h，即可使发酵液中2,3-丁二醇的产量、2,3-丁二醇的生产强度以及糖酸转化率分别高达43.15g/L、0.719g/L·h和0.43g/g，分别较野生型枯草芽孢杆菌168提高了22.5％、29.08％和30.3％。
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