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公开(公告)号：CN109097362B
公开(公告)日：2022-05-20
申请号：CN201810990251.7
申请日：2018-08-28
Applicant: 江南大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/77
Abstract: 本发明公开了操纵子、其载体及其应用，其中，所述操纵子序列至少包括，3’端位于谷氨酸棒杆菌SEQ ID NO：6基因编码序列ATG上游201～257bp中任一碱基、5’端位于谷氨酸棒杆菌SEQ ID NO：6基因编码序列ATG上游308bp～345bp中任一碱基。本发明操纵子被诱导剂诱导后，蛋白表达活性显著高于传统Ptac的诱导表达活性，是一种超高效操纵子。本发明操纵子能够用于原核生物内源或外源蛋白的高效表达。
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公开(公告)号：CN114457104A
公开(公告)日：2022-05-10
申请号：CN202210068136.0
申请日：2022-01-20
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种猪伪狂犬病病毒糖蛋白gD的表达载体及其制备方法和应用，在启动子下游含有PRV‑gD基因的表达质粒；其中，所述启动子为组成型启动子H36,所述组成型启动子H36的基因序列如SEQ ID NO.4所示，所述PRV‑gD基因序列如SEQ ID NO.2所示。本发明表达的PRV‑gD具有免疫活性，为猪伪狂犬病亚单位疫苗的研究和建立高效免疫学检测技术提供技术指导和材料。
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公开(公告)号：CN111909879A
公开(公告)日：2020-11-10
申请号：CN202010859729.X
申请日：2020-08-24
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提供了一种高效表达外源蛋白的谷氨酸棒杆菌诱变菌株，其能解决现有谷氨酸棒杆菌作为外源蛋白表达宿主时，蛋白表达量低的技术问题。一种高效表达外源蛋白的谷氨酸棒杆菌诱变菌株，其特征在于：该谷氨酸棒杆菌诱变菌株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No.20138。本发明的谷氨酸棒杆菌诱变菌株，经外源蛋白表达验证，与出发菌株进行对比，胞内蛋白的表达量、分泌蛋白的表达量均得到显著增强。
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公开(公告)号：CN110591917A
公开(公告)日：2019-12-20
申请号：CN201910893204.5
申请日：2019-09-20
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提供了一种质粒丢失菌株的高通量筛选方法，其不仅操作简便，而且筛选效率高。一种质粒丢失菌株的高通量筛选方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）将含有质粒的菌株进行传代培养；（2）将传代后的菌悬液在固体平板培养基上划线，培养至长出单菌落；（3）将含筛选压力培养基和不含筛选压力培养基分别分装至多孔板中；（4）挑取单菌落并接种至含有含筛选压力培养基的多孔板的培养孔中，同时挑取同一单菌落并接种至含有不含筛选压力培养基的多孔板的相对应位置的培养孔；（5）培养结束后，在含筛选压力培养基中无法生长而在不含筛选压力培养基中可以生长的菌株即为质粒丢失菌株；筛选压力为抗生素压力、营养缺陷型压力或温度压力。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN106566820A
公开(公告)日：2017-04-19
申请号：CN201610836135.0
申请日：2016-09-20
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N9/2417 , C12N15/77 , C12N2800/101 , C12Y302/01001
Abstract: 本发明提供了α‑淀粉酶的制备方法，其能解决现有技术中通过枯草芽孢杆菌制备α‑淀粉酶后期纯化步骤繁琐、得到纯品不易的技术问题。其包括以下步骤：（2）在α‑淀粉酶基因上游添加e3 SD序列、下游添加组氨酸标签，获得改造后的α‑淀粉酶基因；（3）将改造后的α‑淀粉酶基因连接到载体pxmj19‑aph213上，获得重组表达载体pxmj19‑aph213‑amy；（4）将重组表达载体pxmj19‑aph213‑amy转入谷氨酸棒杆菌，获得重组菌；（5）培养重组菌，分泌表达α‑淀粉酶；（6）α‑淀粉酶的纯化，包括：将含有α‑淀粉酶的上清进行亲和层析，介质为镍柱。
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公开(公告)号：CN120041361A
公开(公告)日：2025-05-27
申请号：CN202510033545.0
申请日：2025-01-09
Applicant: 江南大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/53 , C12N15/54 , C12N15/57 , C12N15/60 , C12N15/61 , C12N9/88 , C12N15/70 , C12P17/04 , C12R1/19
Abstract: 本发明提供了一种木香烃内酯生物合成途径的构建方法及其应用，包括，通过在大肠杆菌中共表达4个基因和7个将乙酰辅酶A转化为FPP的基因形成甲羟戊酸途径，构建木香烃内酯生物合成途径；所述共表达4个基因包括，编码吉马烯A合成酶的NS基因、编码吉马烯A氧化酶的CiGAO基因、编码木香烃内酯合成酶的CiCOS基因以及CPR基因；所述7个将乙酰辅酶A转化为FPP的基因包括，mvaE，mvaS，mvk，pmk，mvaD，IDI，ispA；本发明在摇瓶中实现了20.82mg/L的木香烃内酯产量，与起始菌株相比增加了274倍。
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公开(公告)号：CN118147190A
公开(公告)日：2024-06-07
申请号：CN202410248472.2
申请日：2024-03-05
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种双组分系统MprAB调控细胞膜壁合成的功能鉴定方法及应用，所述双组分系统MprAB由基因cg0996和cg0997组成，其中，所述基因cg0996如SEQ ID No.31所示；所述基因cg0997如SEQ ID No.32所示；所述双组分系统MprAB调控谷氨酸棒杆菌C.glutamicum细胞膜壁结构促进异源蛋白的分泌表达。本发明首次鉴定了谷氨酸棒杆菌中的双组分系统MprAB通过调控细胞膜壁相关基因的合成，影响了细胞膜壁的结构。在此基础上通过轻微过表达MprA大大提高α‑淀粉酶在谷氨酸棒杆菌中的酶活。
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公开(公告)号：CN118006656A
公开(公告)日：2024-05-10
申请号：CN202410161428.8
申请日：2024-02-05
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种能够表达牛源κ‑酪蛋白基因的质粒及其构建方法和应用，首次实现牛乳蛋白κ‑酪蛋白在谷氨酸棒状杆菌ATCC13032中的可溶分泌表达，软件预测发现κ‑酪蛋白的固有无需区域，对谷氨酸棒状杆菌作为宿主表达牛乳蛋白具有重要的指导意义。
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公开(公告)号：CN117535334A
公开(公告)日：2024-02-09
申请号：CN202311250176.8
申请日：2023-09-26
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种基于EsaR/I群体感应的双功能动态调控系统及其优化方法，该系统能够在C.glutamicum成功表达并实现代谢调控，不需要额外添加诱导剂，通过胞内表达生产信号分子的酶实现，是革兰氏阴性QS系统第一次在C.glutamicum中的应用，为C.glutamicum作为合成生物学底盘生物提供了途径非依赖型调控路线，丰富了C.glutamicum基因操作的工具箱，加速了C.glutamicum微生物细胞工厂的创制。
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