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公开(公告)号：CN101659953B
公开(公告)日：2012-06-06
申请号：CN200910152603.2
申请日：2009-09-10
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种设计合成抗猪圆环病毒shRNA的方法，包括以下步骤：1)、根据PCV-2型病毒的基因组序列，以Rep基因或Cap基因为目的基因，选取一段19bp长的核酸序列；2)、选取同时满足以下3个条件的核酸序列为候选核酸序列：该核酸序列的GC含量为40％-60％，在15-19的位点中至少有3个A或T核酸残基，检查该19bp核酸序列，保证其不会形成二级结构；3)、将所得的候选核酸序列与猪圆环病毒基因组进行比对；以确定该候选核酸序列是特异性的只针对目的基因。本发明的抗猪圆环病毒shRNA，通过抑制猪圆环病病毒在细胞内的复制，从而发挥抗病毒作用。
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公开(公告)号：CN101121748B
公开(公告)日：2010-07-21
申请号：CN200710070131.7
申请日：2007-07-20
Applicant: 浙江大学
IPC: C07K16/08
Abstract: 本发明抗传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP4蛋白单克隆抗体属于生物技术领域，涉及基因工程。将IBDV VP4基因克隆于原核表达载体pET-28a，在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达；分离包涵体，用8M尿素溶解，经镍螯合亲和层析纯化获得VP4重组蛋白。用VP4重组蛋白免疫BALB/c小鼠，取其脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0进行细胞融合，以HAT培养基选择性培养后，以VP4重组蛋白和IBDV感染细胞进行双重ELISA筛选和有限稀释法克隆化，获得分泌抗IBDV VP4蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株，其中4C3、6A4和6H8腹水的ELISA效价分别为：6.4×105、2.6×106和5.2×106，均能特异识别IBDV感染细胞的病毒蛋白，其Ig亚型重链为IgG1，轻链为κ。
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公开(公告)号：CN100451653C
公开(公告)日：2009-01-14
申请号：CN200510049764.0
申请日：2005-05-09
Applicant: 浙江大学
IPC: G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/531 , G01N21/31
Abstract: 本发明公开了一种H7亚型水禽流感病毒血凝素抗体间接ELISA检测试剂盒。试剂盒内设有抗体检测板，酶结合物工作液，阳性对照，阴性对照，样品稀释液，10×浓缩洗涤液，显色液A，显色液B和终止液，该试剂盒的检测板为包被水禽流感H7亚型血凝素蛋白(HA)的可拆96孔酶标板，酶结合物工作液为HRP标记兔抗水禽IgG多克隆抗体，阳性对照为H7亚型水禽流感标准阳性血清，阴性对照为水禽标准阴性血清。本发明有益的积极效果是：检测试剂盒、特异性强、敏感性高、操作简单，易于大范围推广应用，具有广阔的市场前景。
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公开(公告)号：CN1763085A
公开(公告)日：2006-04-26
申请号：CN200510061375.X
申请日：2005-11-02
Applicant: 浙江大学
IPC: C07K14/165 , C12N15/09 , G01N33/535
Abstract: 本发明公开了一种鸡传染性支气管炎病毒S1重组蛋白抗原、制备方法及其用途。这些核苷酸序列分别由SEQ ID NO.1～3所示。本发明提供了含有编码3种截短S1蛋白的原核表达方法，分别能够表达三株IBV(ZJ971株，M41株，J株)S1蛋白氨基端288bp或309bp部分片段，提供了三株IBV S1蛋白表达产物的纯化方法。用IBV阳性血清检测，表达的部分S1蛋白具有很好的抗原反应性，可作为诊断抗原应用于琼脂扩散诊断技术，酶联免疫吸附试验，免疫荧光检测，免疫组织化学检测等检测IBV感染或免疫产生的抗体。此外，表达的部分S1蛋白还可进一步制备单克隆抗体、多克隆抗体利用ELISA等实验方法来检测IBV抗原的存在或配以适当疫苗佐剂制备亚单位疫苗。
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公开(公告)号：CN1544629A
公开(公告)日：2004-11-10
申请号：CN200310108622.8
申请日：2003-11-11
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种重组鹅白细胞介素－2(gsIL－2)蛋白的制备方法及其用途。RT－PCR扩增的浙东白鹅白细胞介素－2的DNA片段与原核表达载体pBAD/HisB、真核表达载体pMETαB和pMETB构建表达质粒pBAD/HisB/gsIL－2、pMETαB/gsIL－2和pMETA/gsIL－2，分别转化大肠杆菌LMG194、酵母菌PMAD11和PMAD16后诱导表达。表达量分别占菌体总蛋白的9～10％、20～25％和10～12％。大肠杆菌和酵母菌PMAD16诱导后经超声波裂解、离心去沉淀即为gsIL－2蛋白粗制品，PMAD11表达的gsIL－2主要分泌于培养基中，离心取上清即为gsIL－2蛋白粗制品。用Ni－NTAArgarose蛋白纯化系统可以较快的得到gsIL－2纯品，粗制品或纯品可以作为免疫佐剂和疾病治疗药物。本发明应用基因工程技术制备的重组gsIL－2蛋白，具有工艺流程简单，生产成本低，稳定性好，生物学活性高等特点。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN119491019A
公开(公告)日：2025-02-21
申请号：CN202411730892.0
申请日：2024-11-28
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明提供了一种高增殖能力PCV2株及构建方法和应用，属于疫苗株技术领域。通过将PCV2的Cap段的492bp位点的A进行点突变，经所述点突变后，即可显著增强毒株的增殖能力。本发明还提供了引发所述点突变的引物对以及引发点突变的方法，同时提供了所述突变株在制备抗猪圆环病毒疫苗中的应用。本发明实施例证实，经所述点突变后可显著提高猪圆环病毒的增殖能力。
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公开(公告)号：CN118957149A
公开(公告)日：2024-11-15
申请号：CN202411044675.6
申请日：2024-07-31
Applicant: 浙江大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明提供了猪伪狂犬病毒基因分型探针引物组及分型试剂盒和分型方法，属于基因检测技术领域。本发明提供了一套猪伪狂犬病毒基因分型探针引物组，包括一对通用引物和基因分型TaqMan探针。本发明所述基因分型探针引物组在稀释度(101copies/μL～106copies/μL)范围内线性关系良好，最低检测限度均为101copies/μL，具有良好的灵敏性；与其他病毒不存在交叉反应，特异性良好；组内和组间各稀释度的变异系数均小于3％，重复性良好，因此，本发明所述基因分型探针引物组能够稳定地鉴定PRV基因型。
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公开(公告)号：CN118581115A
公开(公告)日：2024-09-03
申请号：CN202410830921.4
申请日：2024-06-25
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明提供了一种猪丁型冠状病毒感染性cDNA克隆及构建方法和应用，属于生物技术领域。本发明提供了一种猪丁型冠状病毒感染性cDNA克隆的构建方法，将猪丁型冠状病毒的基因组划分为若干个片段，基于酵母同源重组的一步法完成克隆构建，具有高效、快速、稳定等特点。本发明所述感染性cDNA克隆具有良好的稳定性，可直接利用CRISPR/Cas9基因编辑在基因水平上改造猪丁型冠状病毒基因组。本发明提供的感染性cDNA克隆可直接通过转染哺乳动物细胞拯救重组病毒，简化了病毒拯救操作流程。本发明还提供了可表达HiBiT标签蛋白的猪丁型冠状病毒感染性克隆的构建方法，为深入研究猪丁型冠状病毒感染机制提供了良好的技术手段。
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公开(公告)号：CN116024182B
公开(公告)日：2024-04-05
申请号：CN202310096073.4
申请日：2023-01-18
Applicant: 浙江大学
IPC: C12N7/01 , A61K39/245 , A61P31/22 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种无毒II型伪狂犬病毒毒株及其应用。本发明无毒II型伪狂犬病毒毒株由II型伪狂犬病毒野毒株的基因组中带有使RR1蛋白发生K759R突变的突变基因序列。本发明无毒II型伪狂犬病毒由新分离的II型伪狂犬病毒毒株PRV‑DX经过基因组突变，使UL39基因编码的蛋白RR1带有K759R点突变而获得，本发明无毒II型伪狂犬病毒致病力减弱，免疫原性强，用该无毒II型伪狂犬病毒制备活疫苗可对小鼠和猪等伪狂犬病毒易感动物提供有效免疫。
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公开(公告)号：CN116024182A
公开(公告)日：2023-04-28
申请号：CN202310096073.4
申请日：2023-01-18
Applicant: 浙江大学
IPC: C12N7/01 , A61K39/245 , A61P31/22 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种无毒II型伪狂犬病毒毒株及其应用。本发明无毒II型伪狂犬病毒毒株由II型伪狂犬病毒野毒株的基因组中带有使RR1蛋白发生K759R突变的突变基因序列。本发明无毒II型伪狂犬病毒由新分离的II型伪狂犬病毒毒株PRV‑DX经过基因组突变，使UL39基因编码的蛋白RR1带有K759R点突变而获得，本发明无毒II型伪狂犬病毒致病力减弱，免疫原性强，用该无毒II型伪狂犬病毒制备活疫苗可对小鼠和猪等伪狂犬病毒易感动物提供有效免疫。
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