基于探针导向的重组酶介导的等温扩增法检测SNP位点用探针和试剂盒

    公开(公告)号:CN108060213B

    公开(公告)日:2020-07-17

    申请号:CN201810054152.8

    申请日:2018-01-19

    IPC分类号: C12Q1/6858 C12N15/11

    摘要: 本发明提供了一种基于探针导向的重组酶介导的等温扩增法检测SNP位点用探针和试剂盒,属于SNP位点检测技术领域。所述基于探针导向的重组酶介导的等温扩增法检测SNP位点用探针,所述探针在重组酶介导的等温扩增法用探针的基础上,将四氢呋喃替换SNP位点的后一位碱基或SNP位点互补位点的后一位碱基,外切酶III酶解到四氢呋喃位点切割结束,切掉的荧光基团修饰的碱基在体系中产生荧光信号,余下的探针部分充当下游引物的作用。所述探针简化检测过程中必须下游引物组分,降低了探针与引物发生非特异性扩增。本发明提供了检测SNP位点的试剂盒,包括上游引物和所述的探针。所述试剂盒能够用于检测多种SNP位点。

    一种高效制备长效干扰素的方法

    公开(公告)号:CN111139263A

    公开(公告)日:2020-05-12

    申请号:CN201811311243.1

    申请日:2018-11-06

    发明人: 郑丽舒 侯云德

    摘要: 本发明属于治疗性生物制剂领域,公开了一种高效制备长效干扰素的方法,所述的方法包括:(1)构建表达长效干扰素的重组载体;(2)将构建的重组载体转染CHO细胞,经过多次筛选获得高表达克隆池;(3)从获得的高表达克隆池中筛选高表达单克隆CHO细胞株;(4)高表达单克隆CHO细胞株发酵培养,并进行目标蛋白的纯化和检测。本发明通过多轮筛选高表达克隆池、进一步筛选高表达单克隆细胞株的方式,结合改进的纯化方法,大大提高了半衰期延长的长效干扰素的产量,且步骤简单,有利于长效干扰素的扩大生产及应用。

    病毒生物磁珠富集浓缩试剂盒及应用

    公开(公告)号:CN110734898A

    公开(公告)日:2020-01-31

    申请号:CN201911191041.2

    申请日:2019-11-28

    IPC分类号: C12N7/02

    摘要: 本发明提供一种病毒生物磁珠富集浓缩试剂盒及应用。所述试剂盒包含平衡液和Fe3O4纳米磁珠。所述平衡液的组成如下:葡萄糖100-200g/L、甘露糖50-100g/L、半乳糖20-50g/L和麦芽糖20-50g/L,用生理盐水配制。利用本发明试剂盒进行病毒的富集浓缩,可广泛高效地吸附临床样本中的病毒,如肠道病毒,呼吸道合胞病毒等,且该试剂盒对于细菌有富集效果,成本低廉,操作简单,无需离心,保证生物安全。本发明提供的试剂盒具有操作简单、快速、特异性好、灵敏度高、对硬件要求低等优势,可广泛应用于各级疾病预防控制及医疗机构等。

    复制型重组人41型腺病毒载体系统及其应用

    公开(公告)号:CN109762842A

    公开(公告)日:2019-05-17

    申请号:CN201811430086.6

    申请日:2018-11-28

    摘要: 提供一种复制型人41型腺病毒(HAdV-41)载体系统及重组病毒构建方法。载体系统包括腺病毒质粒pKAd41P5A-CG。该质粒含有人工改造的HAdV-41基因组:E1区和E4区启动子由HAdV-5对应序列替换;E3区由HAdV-5的ADP基因替换;在E1B55K和pIX基因之间添加人巨细胞病毒启动子和绿色荧光蛋白编码区(pGFP),pGFP两端各含有一个MluI酶切位点。设计引物,PCR扩增外源基因序列(pTransgene),该片段两端含有MluI位点并且与pKAd41P5A-CG MluI位点两侧存在约30bp重叠区。使用MluI酶切/连接,或通过Gibson组装方法,可将pKAd41P5A-CG中pGFP替换为pTransgene,制备携带外源基因的腺病毒质粒;将PmeI线性化的质粒转染包装细胞,能够拯救复制型HAdV-41重组病毒。预计本载体系统可以用于制备人或哺乳动物的口服载体疫苗。