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公开(公告)号：CN106434733B
公开(公告)日：2019-09-27
申请号：CN201610626318.X
申请日：2016-08-01
Applicant: 江南大学
IPC: C12N15/77
Abstract: 本发明提供了一种适用于谷氨酸棒杆菌的表达载体，其能实现谷氨酸棒杆菌对外源蛋白的稳定表达。其包括启动子和外源蛋白编码序列，其特征在于：启动子为aph启动子，其还包括第一编码序列、与第一编码序列连接的RBS序列，aph启动子和第一编码序列连接构成第一顺反子，RBS序列和外源蛋白编码序列连接构成第二顺反子；第一顺反子的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，RBS序列如SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6或SEQ ID NO:7所示。
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公开(公告)号：CN108333352A
公开(公告)日：2018-07-27
申请号：CN201810084644.1
申请日：2018-01-29
Applicant: 江苏拜明生物技术有限公司 , 江南大学
IPC: G01N33/569 , G01N33/558
Abstract: 本发明提供了一种O型口蹄疫抗体的高通量检测方法，其能解决解决液相阻断ELISA方法检测速度慢，检测通量低，无法满足大量样本下的快速高通量检测需求的技术问题。该检测方法，其采用化学发光免疫吸附法测定待测样本的待测血清相对光强度RLU和抗原对照相对光强度RLU，并根据待测血清相对光强度RLU和抗原对照相对光强度RLU计算抑制率PI，其特征在于：化学发光免疫吸附法的样品处理过程中待测样本血清、阴性质控血清和阳性质控血清进行单次稀释，单次稀释倍数下各效价血清对应的抑制率PI统计区间无重叠现象；抑制率PI通过与各效价血清对应的临界抑制率进行对比确定待测血清的效价。
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公开(公告)号：CN106434733A
公开(公告)日：2017-02-22
申请号：CN201610626318.X
申请日：2016-08-01
Applicant: 江南大学
IPC: C12N15/77
Abstract: 本发明提供了一种适用于谷氨酸棒杆菌的表达载体，其能实现谷氨酸棒杆菌对外源蛋白的稳定表达。其包括启动子和外源蛋白编码序列，其特征在于：启动子为aph启动子，其还包括第一编码序列、与第一编码序列连接的RBS序列，aph启动子和第一编码序列连接构成第一顺反子，RBS序列和外源蛋白编码序列连接构成第二顺反子；第一顺反子的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，RBS序列如SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6或SEQ ID NO:7所示。
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公开(公告)号：CN116732108B
公开(公告)日：2024-12-10
申请号：CN202310197297.4
申请日：2023-03-03
Applicant: 江南大学
IPC: C12N15/90 , C12N9/22 , C12N15/113 , C12N15/81
Abstract: 本发明公开了一种提高基因敲除效率的方法及其应用。本发明提供的敲除技术是基于CRISPR‑Cas9质粒，进一步采用“回补策略”来进行目标基因的敲除。本发明所述的“回补策略”即是将目标敲除基因突变后表达于外源质粒，将基因组上的目标基因敲除后再将回补质粒消除，从而达到目标基因的缺失。“回补策略”的使用使得目标基因的敲除效率从0提高到了8％。
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公开(公告)号：CN116240229B
公开(公告)日：2024-06-18
申请号：CN202310178204.3
申请日：2023-02-28
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高产β‑榄香烯和germacreneA的重组菌的构建方法。首先，通过germacreneA合成酶的筛选和甲羟戊酸代谢途径的过表达实现β‑榄香烯和germacreneA的从头合成；然后，通过删除中心碳途径中的竞争途径确保了类异戊二烯途径中乙酰辅酶A、丙酮酸和甘油醛‑3‑磷酸的可用性；接着采用番茄红素颜色作为高通量筛选方法，通过易于出错的PCR诱变获得了优化的NSY305N。最后，在摇瓶中，通过关键途径酶、外排工程和翻译工程的最终构建的菌株β‑EL‑4产生了1161.09mg/L的β‑榄香烯和852.36mg/L的germacreneA，是目前报道的摇瓶水平的最高产量，在4‑L补料分批发酵中，β‑榄香烯和germacreneA的产量分别达到3.52g/L和2.13g/L。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN116355940B
公开(公告)日：2024-03-22
申请号：CN202310299393.X
申请日：2023-03-24
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种猪O型口蹄疫病毒结构蛋白VP1的表达载体及其构建方法，构建得到的猪O型口蹄疫病毒结构蛋白VP1的表达载体在以谷氨酸棒状杆菌作为底盘菌株时能够分泌表达，与现有技术相比，实现了在除大肠杆菌以外的底盘菌株中表达VP1，提高其表达量以及活性；同时本发明还通过更换合成型启动子来构建表达载体，实现VP1表达量的进一步提升，为开发猪O型口蹄疫亚单位疫苗提供了一种新的更安全的方案。
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公开(公告)号：CN117165618A
公开(公告)日：2023-12-05
申请号：CN202310472681.0
申请日：2023-04-27
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种恶臭假单胞菌中4‑异丙基苯甲酸诱导的高强度表达体系的构建方法，以恶臭假单胞菌F1(PseudomonasPutidaF1)代谢途径中存在的4‑异丙基苯甲酸(cumate)诱导的cym操纵子为基础，替换其原有表达用启动子以及表达目的基因，通过组合多阻遏位点，得到改造后的cym操纵子，从而使得荧光蛋白表达强度提高；本发明确定了所述诱导系统的诱导剂在恶臭假单胞菌中的有效响应范围，同时筛选得到响应最好的多阻遏位点诱导系统。
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公开(公告)号：CN115786340B
公开(公告)日：2023-12-05
申请号：CN202211376459.2
申请日：2022-11-04
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种提高leaderless启动子活性的方法及其应用，包括，在leaderless启动子和目的基因之间插入一段SEQ ID NO.2所示的62bp的核酸序列、SEQ ID NO.3所示的13bp的SD序列和SEQ ID NO.4所示的5bp的翻译偶联结构，制得高活性启动子。本发明提出的方法对于提高leadless启动子的活性具有很好的普适性；在所测试的另外两个leaderless启动子H36和Cg0124中，也观察到显著的启动子活性提高效果。
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公开(公告)号：CN116574749A
公开(公告)日：2023-08-11
申请号：CN202211288504.9
申请日：2022-10-20
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种基于蛋白N端改造来提高外源蛋白表达水平的方法，其包括如下步骤：构建负载目的基因的质粒、负载目的基因的质粒转入受体菌中、荧光定量分析。本发明提供了一种对于蛋白N端改造从而实现对于外源蛋白的表达水平进行提高的方法。
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公开(公告)号：CN111909879B
公开(公告)日：2023-04-28
申请号：CN202010859729.X
申请日：2020-08-24
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提供了一种高效表达外源蛋白的谷氨酸棒杆菌诱变菌株，其能解决现有谷氨酸棒杆菌作为外源蛋白表达宿主时，蛋白表达量低的技术问题。一种高效表达外源蛋白的谷氨酸棒杆菌诱变菌株，其特征在于：该谷氨酸棒杆菌诱变菌株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No.20138。本发明的谷氨酸棒杆菌诱变菌株，经外源蛋白表达验证，与出发菌株进行对比，胞内蛋白的表达量、分泌蛋白的表达量均得到显著增强。
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