一种生产5’-胞苷酸的方法

    公开(公告)号:CN114107143A

    公开(公告)日:2022-03-01

    申请号:CN202111280840.4

    申请日:2021-11-01

    摘要: 本发明公开了一种生产5’‑胞苷酸的方法,属于基因工程和微生物工程领域。本发明通过基因敲除技术对大肠杆菌的胞苷单磷酸焦磷酸化酶基因ushA和核苷酸5'‑单磷酸核苷酶基因ppnN进行敲除,获得可高效积累5’‑胞苷酸(5’‑CMP)的大肠杆菌突变体。进一步通过过量表达尿苷激酶基因udk,获得高效生产5’‑CMP的重组大肠杆菌,5’‑CMP的发酵水平可达31.8 g/L以上。这种高效的大肠杆菌菌株可用于实现5’‑CMP的工业化生产,利于降低其生产成本及环境污染,实现绿色生物制造。

    一种虎奶菇细胞壁糖蛋白的提取方法

    公开(公告)号:CN113185572A

    公开(公告)日:2021-07-30

    申请号:CN202110562376.1

    申请日:2021-05-24

    申请人: 江南大学

    摘要: 本发明公开了一种虎奶菇细胞壁糖蛋白的提取方法,属于生物技术领域。本发明通过将干燥的或新鲜的虎奶菇菌核粉碎、PBS清洗、去垢剂‑还原剂混合溶液浸提、三氯乙酸沉淀、丙酮清洗、透析得到虎奶菇菌核细胞壁糖蛋白,所得糖蛋白占菌核细胞壁干重的4.93~5.36%,糖蛋白中总糖含量约为32%,总蛋白含量约为67%,无游离多糖和大分子蛋白质的残留。再经过柱分离可以得到不同分子量大小的糖蛋白纯品。本发明所采用的方法工艺简单,操作性强,易于实现,纯度较高,具有广阔的工业应用前景。

    生产西柏三烯一醇的重组菌及其应用

    公开(公告)号:CN112852699A

    公开(公告)日:2021-05-28

    申请号:CN202110170739.7

    申请日:2021-02-08

    申请人: 江南大学

    摘要: 本发明涉及一种生产西柏三烯一醇的重组菌及其应用,本发明通过异源表达GGPP合酶基因ggpps和西柏三烯醇合酶基因cbts,构建了可生产植物来源的西柏三烯一醇的重组菌株。通过过表达DXP途径中碳代谢通量的关键基因1‑脱氧‑D‑木酮糖5‑磷酸合成酶基因dxs和异戊二烯焦磷酸异构酶基因idi提高西柏三烯一醇产量。进一步优化表达质粒过量表达dxs和idi,西柏三烯一醇产量提高至对照的2.60倍。采用本发明获得的西柏三烯一醇高产量菌株及方法可高效生产西柏三烯一醇,可促进其在农业及烟草等领域中的应用。

    类大牻牛儿烯合成酶C突变体及构建方法与应用

    公开(公告)号:CN112410236A

    公开(公告)日:2021-02-26

    申请号:CN202011322518.9

    申请日:2020-11-23

    申请人: 江南大学

    摘要: 本发明公开了一种类大牻牛儿烯合成酶C突变体及构建方法与应用,属于生物催化技术领域。本发明采用重组DNA技术将类大牻牛儿烯合成酶C编码基因,将其克隆至表达载体,并转化宿主,获得一株高产类大牻牛儿烯合成酶C的重组菌株。针对类大牻牛儿烯合成酶C活性位点E474周围loop结构上的氨基酸残基进行定向进化,筛选获得高活性类大牻牛儿烯合成酶C突变体。本发明还提供了上述方法在制备含西柏三烯醇的产品中的应用。采用本发明获得的高活性类大牻牛儿烯合成酶C突变体及方法可高效催化生产西柏三烯醇,可促进其在农业及烟草等领域中的应用。

    一种利用发酵液分割法提高发酵罐使用效率的糖化酶发酵工艺

    公开(公告)号:CN105063131B

    公开(公告)日:2020-02-14

    申请号:CN201510533363.6

    申请日:2015-08-27

    申请人: 江南大学

    IPC分类号: C12P19/14 C12R1/685

    摘要: 一种利用发酵液分割法提高发酵罐使用效率的糖化酶发酵工艺,属于酶工程和发酵工程技术领域。本发明是在黑曲霉GB0506糖化酶发酵酶活线性增长末期,将发酵液分配到几个未使用的发酵罐中,加新鲜发酵培养基继续发酵,确定发酵液分割的最佳时机为发酵118‑120小时,最佳分割方式为1罐分割为3罐。与原有工艺相比,采用该法获得的发酵液最终发酵酶活没有明显变化,但平均每一发酵罐在罐发酵时间大幅下降,极大节约发酵过程电能消耗。本发明还提供一种针对将发酵液平均分配到3个发酵罐的发酵罐组合使用方法,在相应工艺条件下,单位发酵体积的发酵强度提高54%以上。利用发酵液分割法的糖化酶发酵新工艺为酶制剂生产企业在原有设备基础上大幅提高发酵罐使用效率。

    一种以淀粉支链水解酶替代明矾的酶法粉丝制作方法

    公开(公告)号:CN105104927B

    公开(公告)日:2019-10-22

    申请号:CN201510439893.4

    申请日:2015-07-24

    申请人: 江南大学

    IPC分类号: A23L29/30 A23L29/00

    摘要: 一种以淀粉支链水解酶替代明矾的酶法粉丝制作方法,属于食品工程和酶工程技术领域。本发明以各种植物淀粉为原料,在粉丝制作传统方法的基础上,在粉丝制作的淀粉糊化阶段后,增加一个淀粉支链水解酶作用阶段,即在淀粉糊化阶段后将淀粉糊化液温度降至适合淀粉支链水解酶作用的温度再加入普鲁兰酶、异淀粉酶等水解淀粉支链即α‑1,6糖苷键的水解酶,适当保温。也可以在糊化前加入淀粉支链水解酶,在淀粉糊化后将糊化液在适合淀粉支链水解酶作用的温度适当保温。其它步骤与粉丝制作的传统方法一样。本发明提供一种不使用明矾的粉丝制作方法,所使用的添加剂淀粉支链水解酶相对明矾有较好的食品安全性并且用量较小,与现有的方法相比可以减少食品添加剂的使用并且具有易于放大的优点。

    一株表达果胶酯酶的酿酒酵母工程菌及其应用

    公开(公告)号:CN105018364B

    公开(公告)日:2019-01-29

    申请号:CN201510413914.5

    申请日:2015-07-14

    申请人: 江南大学

    发明人: 陈献忠 肖艳 沈微

    IPC分类号: C12N1/19 C12P7/06 C12R1/865

    摘要: 本发明公开了一株表达果胶酯酶的酿酒酵母工程菌及应用,属于发酵工程领域。本发明所提供的酿酒酵母工程菌,是将果胶酯酶的编码基因与α‑凝集素的编码基因融合后转化酿酒酵母,重组质粒整合到宿主的染色体NDA上,得到在细胞表面锚定表达果胶酯酶的菌株,果胶酯酶酶活达到2.6U/g。所述菌株用于甘薯和木薯等原料的酒精发酵生产,不仅能够提高酒精发酵效率,而且能显著降低发酵过程中发酵液的粘度,有利于酶的作用和酿酒酵母代谢,还可以降低设备负担,节约能耗。