公开(公告)号：CN109439669B

公开(公告)日：2022-03-29

申请号：CN201811369666.9

申请日：2018-11-17

申请人： 云南省烟草农业科学研究院

发明人： 白戈 ,  杨大海 ,  逄涛 ,  谢贺 ,  李勇 ,  姚恒 ,  李永平 ,  陈学军 ,  肖炳光 ,  方敦煌 ,  王亚辉 ,  杨春江 ,  张晨东 ,  吴兴富 ,  曾建敏

IPC分类号： C12N15/29 ,  C07K14/415 ,  C12N15/10 ,  C12N15/82 ,  A01H5/00 ,  A01H6/82

摘要： 本发明公开了一种烟草砷转运基因NtNIP7‑1及其克隆方法与应用，烟草砷转运基因NtNIP7‑1核苷酸序列如SEQ ID：No.1所示，编码的氨基酸序列如SEQ ID：No.2所示。本发明还公开了烟草砷转运基因NtNIP7‑1的克隆方法，具体步骤包括：提取烟草RNA，反转录得到第一链cDNA；以反转录得到的第一链cDNA作为模板，根据NtNIP7‑1基因序列设计合成特异性引物，进行PCR扩增，回收和纯化PCR扩增产物，并测序。本发明中，在烟草植株内抑制烟草内源基因NtNIP7‑1的表达，会使烟草烟叶的砷含量明显降低，在植物低砷含量育种领域具有广阔的应用前景，其经济效益潜力巨大。

公开(公告)号：CN109439789B

公开(公告)日：2021-05-18

申请号：CN201811385811.2

申请日：2018-11-20

申请人： 云南省烟草农业科学研究院

发明人： 肖炳光 ,  童治军 ,  李永平 ,  方敦煌 ,  陈学军 ,  谢贺 ,  黄昌军 ,  刘勇

IPC分类号： C12Q1/6895 ,  C12N15/11

摘要： 本发明公开了一组打破烟草TMV抗性基因N上游（5’端）连锁累赘的分子标记及其应用。所述的打破烟草TMV抗性基因N上游（5’端）连锁累赘的分子标记编号为TMn007、TMn025、TMn027、TMn085、TMn113、TMn131、TMn163、TMn183、TMn203、TMn223、TMn226、TMn233、TMn245、TMn249、TMn288、TMn302、TMn306和TMn323_N。本发明所述的一组分子标记具有稳定、可靠、简捷和高灵敏度的特点，可用于检测和判断烟草N基因上游（5’端）不同位置的连锁累赘片段打破信息，培育出既含有N基因又能完全打破或在不同位置部分打破不利连锁累赘影响的烟草抗TMV新品种。

公开(公告)号：CN109355419B

公开(公告)日：2021-05-18

申请号：CN201811386808.2

申请日：2018-11-20

申请人： 云南省烟草农业科学研究院

发明人： 童治军 ,  肖炳光 ,  李永平 ,  陈学军 ,  方敦煌 ,  谢贺 ,  张谊寒 ,  白戈

IPC分类号： C12Q1/6895 ,  C12N15/11

摘要： 本发明公开了一组打破烟草TMV抗性基因N下游（3’端）连锁累赘的分子标记及其应用。所述的打破烟草TMV抗性基因N下游（3’端）连锁累赘的分子标记编号为TMn324、TMn330、TMn332、TMn349、TMn359、TMn360和TMn383，其PCR扩增产物核苷酸序列分别为SEQ ID No.1、SEQ ID No.2、SEQ ID No.3、SEQ ID No.4、SEQ ID No.5和SEQ ID No.6、SEQ ID No.7和SEQ ID No.8、SEQ ID No.9和SEQ ID No.10所示。本发明所述的一组分子标记具有简捷、高效和高通量的特点，可用于精准打破烟草N基因下游（3’端）不同位置上的连锁累赘，培育出既含有N基因又能完全或部分打破不利连锁累赘影响的烟草抗TMV新品种。

公开(公告)号：CN107815454B

公开(公告)日：2021-02-19

申请号：CN201711217958.6

申请日：2017-11-28

申请人： 云南省烟草农业科学研究院

发明人： 谢贺 ,  白戈 ,  邹保红 ,  杨大海 ,  姚恒 ,  李永平 ,  肖炳光 ,  李军营 ,  张谊寒

IPC分类号： C12N15/29 ,  C12N15/10 ,  C12N15/82 ,  C07K14/415 ,  A01H5/02 ,  A01H6/82

摘要： 本发明公开了一种烟草开花期调控基因NtMADS1及其克隆方法与应用。所述烟草开花期调控基因NtMADS1包含的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示；其编码的多肽包含的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。在烟草中敲低NtMADS1基因的表达可提前烟草的开花期，另外，通过比对NtMADS1多肽序列，寻找相同功能的同源基因，并利用VIGS技术验证同源基因的功能。因此，NtMADS1基因具有广阔的应用前景。本发明的烟草开花期调控基因为烟草优化开花时期育种提供基因与技术的支持。

公开(公告)号：CN112094864A

公开(公告)日：2020-12-18

申请号：CN202011032661.4

申请日：2020-09-27

申请人： 云南省烟草农业科学研究院

发明人： 杨大海 ,  王蕾 ,  杨飞 ,  汤金香 ,  白戈 ,  李勇 ,  逄涛 ,  姚恒 ,  谢贺 ,  陈学军 ,  肖炳光 ,  费明亮 ,  张谊寒

IPC分类号： C12N15/82 ,  A01H5/12 ,  A01H6/82

摘要： 利用烟草细胞色素C基因NtCYP94B3s提高烟草叶片数与生物量的方法，所述烟草细胞色素C基因NtCYP94B3s的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO：1所示，方法是先构建植物RNAi载体。然后鉴定农杆菌介导的烟草转化及转基因植株，之后提取野生型植株和25株转pHellsgate12的RNA基因T0代植株的总RNA，进行Real time‑PCR分析，内参基因为26s，分析不同株系的表达情况，选取表达量最低的2株植株。本发明中，在烟草植株内抑制烟草内源基因NtCYP94B3s的表达会使烟草叶片数及生物量明显提高。该方法具有广阔的应用前景，经济效益潜力巨大。

公开(公告)号：CN111172294A

公开(公告)日：2020-05-19

申请号：CN202010116491.1

申请日：2020-02-25

申请人： 云南省烟草农业科学研究院

发明人： 童治军 ,  隋学艺 ,  肖炳光 ,  王丙武 ,  方敦煌 ,  宋中邦 ,  高玉龙 ,  李文正 ,  赵璐 ,  谢贺 ,  白戈 ,  李梅云 ,  李永平 ,  焦芳婵 ,  吴兴富 ,  袁诚 ,  黄昌军 ,  孔光辉 ,  师君丽

IPC分类号： C12Q1/6888 ,  C12N15/11

摘要： 本发明公开了一种与烟草尼古丁合成主效调控基因nic1紧密连锁的共显性SSR标记及其应用，所述的与烟草尼古丁合成主效调控基因nic1紧密连锁的共显性SSR标记的编号为TM22038、TM23004和TM22041，其PCR扩增产物核苷酸序列分别为SEQ ID No.1和SEQ ID No.2、SEQ ID No.3和SEQ ID No.4、SEQ ID No.5和SEQ ID No.6所示。所述的应用为所述的与烟草尼古丁合成主效调控基因nic1紧密连锁的共显性SSR标记在检测烟草基因组DNA中是否存在纯合基因型nic1而具有低尼古丁含量烟草品种中的应用。本发明所述的共显性SSR标记具有稳定、可靠、简便、快捷和低成本的特点，因此该分子标记可以作为烟草品质育种中低尼古丁含量基因nic1分子标记辅助选择的应用。

公开(公告)号：CN110393147A

公开(公告)日：2019-11-01

申请号：CN201910723876.1

申请日：2019-08-07

申请人： 云南省烟草农业科学研究院

发明人： 逄涛 ,  李勇 ,  谢贺 ,  白戈 ,  杨大海 ,  姚恒 ,  张谊寒 ,  童治军 ,  肖炳光

IPC分类号： A01H1/06 ,  A01H1/04

摘要： 通过筛选烟草根系快速获得高烟碱烟草突变体的方法，将烟草云烟87突变二代种子和云烟87对照种子分别点播，待云烟87对照种子长出两片真叶时，将云烟87突变二代材料与云烟87对照材料幼苗拔出洗净比对根系，筛选出具有更加发达根系的突变体材料KH65并培养移栽，待烟株成熟后按照上、中、下部烟叶取样测定单株KH65的烟碱含量，待KH65烟株开花，自交收种，于第二年再次播种，再次鉴定突变体材料的根系情况，待烟株成熟后再次取样测定单株成熟突变体材料的烟碱含量，待成熟突变体烟株生长至开花，自交收种，获得高烟碱烟草突变体。本发明通过筛选烟草EMS突变材料的根系表现，快速的鉴定获得高烟碱含量的烟草突变材料。

公开(公告)号：CN110305884A

公开(公告)日：2019-10-08

申请号：CN201910716797.8

申请日：2019-08-05

申请人： 云南省烟草农业科学研究院

发明人： 姚恒 ,  谢贺 ,  白戈 ,  杨大海 ,  童治军 ,  方敦煌 ,  曾建敏 ,  陈学军 ,  张谊寒 ,  肖炳光 ,  李永平

IPC分类号： C12N15/61 ,  C12N9/90 ,  C12N15/10 ,  A01H5/12 ,  A01H6/82

摘要： 本发明公开了一种提高烟草叶片茉莉酸含量的基因NtAOS1及其克隆方法与应用。所述的能提高烟草茉莉酸含量的NtAOS1的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。编码蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示；采用核酸干扰（RNAi）技术，设计了1段干扰片段，采用gateway技术构建了植物表达载体并转化烟草，采用qPCR技术挑选NtAOS1基因转录水平显著降低转基因植株。茉莉酸含量检测表明：NtAOS1基因表达水平降低反而造成其茉莉酸含量显著高于野生型对照。本发明为NtAOS1基因及其编码蛋白应用于烟草抗逆育种与后续烟草中茉莉酸合成代谢途径的研究提供了材料基础。

公开(公告)号：CN109439789A

公开(公告)日：2019-03-08

申请号：CN201811385811.2

申请日：2018-11-20

申请人： 云南省烟草农业科学研究院

发明人： 肖炳光 ,  童治军 ,  李永平 ,  方敦煌 ,  陈学军 ,  谢贺 ,  黄昌军 ,  刘勇

IPC分类号： C12Q1/6895 ,  C12N15/11

摘要： 本发明公开了一组打破烟草TMV抗性基因N上游（5’端）连锁累赘的分子标记及其应用。所述的打破烟草TMV抗性基因N上游（5’端）连锁累赘的分子标记编号为TMn007、TMn025、TMn027、TMn085、TMn113、TMn131、TMn163、TMn183、TMn203、TMn223、TMn226、TMn233、TMn245、TMn249、TMn288、TMn302、TMn306和TMn323_N。本发明所述的一组分子标记具有稳定、可靠、简捷和高灵敏度的特点，可用于检测和判断烟草N基因上游（5’端）不同位置的连锁累赘片段打破信息，培育出既含有N基因又能完全打破或在不同位置部分打破不利连锁累赘影响的烟草抗TMV新品种。

公开(公告)号：CN109097373A

公开(公告)日：2018-12-28

申请号：CN201811090560.5

申请日：2018-09-19

申请人： 云南省烟草农业科学研究院

发明人： 逄涛 ,  白戈 ,  谢贺 ,  李勇 ,  杨大海 ,  姚恒 ,  张谊寒 ,  肖炳光 ,  李永平

IPC分类号： C12N15/29 ,  C07K14/415 ,  C12N15/10 ,  C12N15/82 ,  A01H5/00 ,  A01H6/82

摘要： 本发明公开了一种烟草尼古丁含量调控基因TIFY6B及其克隆方法与应用；所述的烟草尼古丁含量调控基因TIFY6B核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示；编码蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示；克隆方法包括烟草叶片cDNA合成：提取烟草叶片总RNA，反转录得到第一链cDNA；TIF6B基因的PCR扩增：以烟草叶片cDNA为模板，根据TIFY6B基因序列设计引物，进行PCR扩增，回收和纯化PCR扩增产物，并测序。应用为所述的烟草尼古丁含量调控基因TIFY6B在获得高尼古丁含量的转基因烟草植株中的应用。本发明在烟草植株内抑制TIFY6B基因的表达，可以明显提高烟叶中尼古丁的含量，在实际生产中拥有广阔的应用前景。