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公开(公告)号：CN113151270A
公开(公告)日：2021-07-23
申请号：CN202110363144.3
申请日：2021-04-02
申请人： 天津科技大学
摘要： 本发明为提高碱性蛋白酶的活性提供了一种新的启动子P64，该启动子来源于解淀粉芽孢杆菌，通过对基因组转录组数据分析和酶活检测方法获得。在新型启动子P64的调控下，碱性蛋白酶基因在重组工程菌株解淀粉芽孢杆菌P64‑pLF/11018中得到了高效表达，酶活达到12751U/mL，是野生型解淀粉芽孢杆菌(938U/mL)的13.6倍，极具工业应用潜力。本发明除了应用于工业生产外，还为解淀粉芽孢杆菌中外源基因高效表达研究奠定了基础，对促进其基因技术和微生物代谢工程的进一步发展具有重要意义。
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公开(公告)号：CN112522173A
公开(公告)日：2021-03-19
申请号：CN202011539757.X
申请日：2020-12-23
申请人： 天津科技大学 , 山东隆科特酶制剂有限公司
摘要： 本发明目的是通过对基因工程宿主的定向改造，提供一株能够高效稳定生产异源蛋白酶的基因工程菌，以解淀粉芽孢杆菌为宿主，首先将宿主的8种胞外蛋白酶aprE、epr、mpr、vpr、nprE、bpr、wprA、aprX缺失，得到胞外蛋白酶缺陷型菌株；还将宿主的α‑淀粉酶和胞外多糖基因簇eps缺失；还将表达异源碱性蛋白酶的高拷贝质粒导入宿主，得到一株高效生产异源碱性蛋白酶的基因工程菌。并且该工程菌在发酵过程中粘性大大降低，利于产物蛋白酶的分离纯化。
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公开(公告)号：CN112239743A
公开(公告)日：2021-01-19
申请号：CN202010858709.0
申请日：2020-08-24
申请人： 天津科技大学
摘要： 本发明属于基因工程领域，具体涉及通过对地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)2709进行遗传改造获得的新型宿主细胞及其改造方法与应用。所述菌株是在地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)2709的基础上，通过敲除eps、pgs、sigF、chiAB、pulA、amyA、lchAC、upp基因，并删除9个基因组岛以实现宿主细胞的基因组精简来构建的。经过基因改造获得的宿主细胞有效改进了发酵生产性能及发酵过程控制。以AprE的生产为例，eps、pgs、sigF、chiAB、pulA、amyA、lchAC基因，和9个基因组岛敲除菌GR15对AprE的发酵液酶活力可高达32494±1013U/mL，高产酶时期长达16h，较对照菌提高了36％。
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公开(公告)号：CN108048421B
公开(公告)日：2020-06-09
申请号：CN201711337279.2
申请日：2017-12-14
申请人： 天津科技大学
摘要： 本发明涉及一种利用胆碱类低共熔溶剂提高果糖基转移酶催化效率和稳定性的方法，包括：以氯化胆碱低共熔溶剂和缓冲液的混合溶液作为催化体系，以果糖基转移酶为催化剂转化底物蔗糖为低聚果糖。结果发现，相较于原缓冲液体系，低共熔溶剂体系会使果糖基转移酶酶活及转化率提高10％以上。而且，相较于原缓冲液体系，低共熔溶剂体系会使果糖基转移酶储存稳定性提高40％以上。
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公开(公告)号：CN107746432B
公开(公告)日：2020-05-12
申请号：CN201711018671.0
申请日：2017-10-27
申请人： 天津科技大学
摘要： 本发明属于生物技术和基因工程技术领域，具体涉及一种Aβ42修饰蛋白及其在大肠杆菌中的表达及纯化方法。本发明构建的Aβ42表达体系提供了原核生物表达人淀粉样蛋白Aβ42表达载体的构建方法，并将表达载体导入至大肠杆菌表达宿主中，经诱导表达、两步纯化及鉴定后获得具有高纯度生物活性的目标Aβ42‑His蛋白。本方法所采用的大肠表达系统，具有表达效率高、表达量大、成本低、易操作等特点，所获得的Aβ42多肽含有His标签方便纯化，且纯度高、产率高，比化学合成Aβ42具有更好的聚集特性和细胞毒性等优点。
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公开(公告)号：CN106995789B
公开(公告)日：2020-04-24
申请号：CN201611156766.4
申请日：2016-12-15
申请人： 天津科技大学
摘要： 本发明涉及一株白藜芦醇发酵菌及其应用，菌株的分类命名为沙福芽孢杆菌(Bacillus safensis)，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.13129，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期：2016年10月21日，还提供一种白藜芦醇发酵菌在发酵白藜芦醇中的应用。本方法利用微生物转化法直接将虎杖粗药材中的白藜芦醇苷转化为白藜芦醇，方法简单，转化过程容易控制，转化反应专一性和特异性较强，便于产品的分离和纯化，可有效提高白藜芦醇产品的收率和质量，提高产品的附加值。
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公开(公告)号：CN109022476A
公开(公告)日：2018-12-18
申请号：CN201810774798.3
申请日：2018-07-16
申请人： 天津科技大学
CPC分类号： C12N15/75 , C07K14/32 , C12N2800/80 , C12N2810/10
摘要： 本发明涉及基因工程领域，尤其是涉及一种应用于地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)2709的CRISPR‑Cas9基因编辑系统及其应用。所述基因编辑系统是以穿梭质粒pWH1520为载体，将所有调控元件构建于该载体上并经甲基化修饰后所得，所述调控元件包括由pS启动子控制的cas9蛋白、由pLY‑2启动子控制的sgRNA转录盒子，以及上、下游同源臂修复序列HA。所述基因编辑系统应用于地衣芽孢杆菌2709工业菌株存在效率高、设计简单、成本低等优点，基因敲除效率达到90.6％。
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公开(公告)号：CN105441602B
公开(公告)日：2017-12-12
申请号：CN201510990547.5
申请日：2015-12-23
申请人： 天津科技大学
摘要： 本发明涉及一种碱性蛋白酶联合钛盐和锌盐鞣制皮革的方法，在利用该种碱性蛋白酶作为浸水助剂的过程中，通过对浸水过程中NaCl的调节，与简单浸水法相比，可以有效将时间缩短8‑10小时，钛锌鞣后的白湿皮可以满足片皮温度要求。本发明中的工艺符合环保要求，碱性蛋白酶粉在浸水工序中使皮胶原充水充分并缩短了浸水时间，钛锌结合工艺的开发有利于降低鞣制过程中废水中的铬排放量。此外，无铬鞣制过程也降低了生产过程中产生的废铬屑的处理难度。
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公开(公告)号：CN107058408A
公开(公告)日：2017-08-18
申请号：CN201710455267.3
申请日：2017-06-16
申请人： 天津科技大学
摘要： 本发明提供一种利用细菌转化和提取白藜芦醇的方法，添加有底物虎杖粗药材的发酵培养基中接种沙福芽孢杆菌种子液，28‑37℃发酵6‑15h，菌体浓度OD600nm＝0.8‑1.6时，开始有产物析出，菌体与底物、产物相互作用，在微生物的作用下产物以菌体为晶核结晶析出，发酵液离心、蒸馏水洗涤沉淀，向沉淀中加入有机溶剂单次提取、干燥即可得到产品白藜芦醇，纯度≥99％。该方法操作简单，条件温和，转化时间短，产物收率高。
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