一种哺乳动物细胞核转染液及其制备方法和在细胞核内递送的应用

    公开(公告)号:CN117305360A

    公开(公告)日:2023-12-29

    申请号:CN202311193188.1

    申请日:2023-09-15

    申请人: 江南大学

    IPC分类号: C12N15/85 C12N15/87

    摘要: 本发明公开了一种哺乳动物细胞核转染液及其制备方法,以及利用该细胞核转染液进行外源DNA和RNA的哺乳动物细胞核内递送的应用方法,该核转染液包括MgCl2、NaH2PO4、HEPEs、KCl以及DEPC处理水,利用该核转染液能够将DNA、RNA递送到多种哺乳动物细胞中,包括多种人以及小鼠的贴壁细胞和悬浮细胞等,而且能够获得非常高效的转染效率,同时核转后的细胞存活率高,更重要的是在常规方法难转染的悬浮细胞也获得了非常高的转染效率和细胞存活率。本发明采用常规、廉价的化学试剂配制得到该核转染液,成本低于其它常规转染试剂数百倍,操作简便,易于推广到包括基因编辑在内的遗传操作领域中的外源遗传物质细胞内的高效递送相关的基础研究以及临床应用中。

    一种基于定向进化改造的角蛋白酶突变体及其应用

    公开(公告)号:CN114574469B

    公开(公告)日:2023-06-02

    申请号:CN202210298614.7

    申请日:2022-03-21

    申请人: 江南大学

    IPC分类号: C12N9/52 C12N15/57 C12P21/06

    摘要: 本发明公开了一种基于定向进化改造的角蛋白酶突变体及其应用,本发明提供了一种基于易错PCR技术,定向进化获得高酶活突变体的方法。本发明共获得了9个酶活提高的突变体,其中突变体T8(R72S/F107Y/N291S/N295D)的酶活水平最高,为2382U/mL,是对照菌酶活的2.1倍。采用培养基组分优化及7L发酵罐扩大培养的发酵研究策略,实现了突变菌产酶量的提升,角蛋白酶活力可达8448U/mL,本发明为角蛋白酶的高效表达及产酶研究提供了一种有效的策略。采用角蛋白酶与胰蛋白酶复配降解角蛋白废弃物,探究酶解法的最佳条件,为实际生产中高效利用羽毛、提高蛋白利用率提供了理论基础。

    一种抗皮肤光老化的铁皮石斛提取物的制备方法及其应用

    公开(公告)号:CN114848566B

    公开(公告)日:2023-03-28

    申请号:CN202210530886.5

    申请日:2022-05-16

    申请人: 江南大学

    IPC分类号: A61K8/9794 A61Q19/08

    摘要: 本发明公开了一种抗皮肤光老化的铁皮石斛提取物的制备方法及其应用。所述制备方法采用以下步骤:S1.将铁皮石斛进行前处理得到铁皮石斛粉末;S2.将步骤S1.中的铁皮石斛粉末采用乙醇溶液进行提取、分离,得到残渣和乙醇提取液;所述乙醇溶液的质量分数为70%~80%,乙醇溶液中含有pH调节剂使其pH为2~3;S3.将步骤S2.中的残渣加水搅拌提取,得到水提取液;S4.将步骤S3.中的水提取液经超滤膜处理,收集分子量大于10KDa的成分;S5.将步骤S2.中的乙醇提取液和步骤S4.中分子量大于10KDa的成分混合再进行浓缩、干燥得到铁皮石斛组合物。所述制备方法简单,成本低,制得的铁皮石斛提取物中活性物质种类更多,各活性物质之间相互协同,对抗皮肤光老化具有更显著作用,降低皮肤炎症产生和胶原蛋白的降解。

    一种抗皮肤光老化的铁皮石斛提取物的制备方法及其应用

    公开(公告)号:CN114848566A

    公开(公告)日:2022-08-05

    申请号:CN202210530886.5

    申请日:2022-05-16

    申请人: 江南大学

    IPC分类号: A61K8/9794 A61Q19/08

    摘要: 本发明公开了一种抗皮肤光老化的铁皮石斛提取物的制备方法及其应用。所述制备方法采用以下步骤:S1.将铁皮石斛进行前处理得到铁皮石斛粉末;S2.将步骤S1.中的铁皮石斛粉末采用乙醇溶液进行提取、分离,得到残渣和乙醇提取液;所述乙醇溶液的质量分数为70%~80%,乙醇溶液中含有pH调节剂使其pH为2~3;S3.将步骤S2.中的残渣加水搅拌提取,得到水提取液;S4.将步骤S3.中的水提取液经超滤膜处理,收集分子量大于10KDa的成分;S5.将步骤S2.中的乙醇提取液和步骤S4.中分子量大于10KDa的成分混合再进行浓缩、干燥得到铁皮石斛组合物。所述制备方法简单,成本低,制得的铁皮石斛提取物中活性物质种类更多,各活性物质之间相互协同,对抗皮肤光老化具有更显著作用,降低皮肤炎症产生和胶原蛋白的降解。

    一种天然奶味香精及其制备方法

    公开(公告)号:CN114287602A

    公开(公告)日:2022-04-08

    申请号:CN202210033418.7

    申请日:2022-01-12

    IPC分类号: A23L27/20

    摘要: 本发明属于食品科技领域,涉及一种天然奶味香精及其制备方法,该制备方法,包括以下步骤:将大豆粉碎,得到大豆粉;将所述大豆粉加入水中,混匀提取后分离,得到大豆提取液;向所述大豆提取液中加入乳脂,混匀,40‑50℃加热反应,得到混合液;调节所述混合液的pH至5.5‑6,加热反应,分离或直接得到所述天然奶味香精。本发明得到的黄油基奶味香精和淡奶油基奶味香精完全使用食品原料、全天然无添加化学试剂,食品安全性更高,且香味醇厚浓郁,持续时间长,风味协调柔和;没有异常的酸腐味、臭味或刺激性气味,且不用购买价格昂贵的脂肪酶,只需用到价格低廉的大豆;可用于需要增香的乳制品,增加浓郁的奶香味。

    一株恶臭假单胞菌突变菌株及其在6-羟基烟酸生物制备中的应用

    公开(公告)号:CN112877264A

    公开(公告)日:2021-06-01

    申请号:CN202110398624.3

    申请日:2021-04-12

    申请人: 江南大学

    IPC分类号: C12N1/20 C12P17/12 C12R1/40

    摘要: 本发明公开了一株恶臭假单胞菌突变菌株及其在6‑羟基烟酸生物制备中的应用。本发明的恶臭假单胞菌突变菌株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏日期:2021年3月8日,保藏地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号,保藏号为CGMCC No.21876。本发明的突变株Pseudomonas putida S14 mut‑5,活性为2.68U·mL‑1,是野生型的2.4倍。该菌株底物耐受性明显提高,与腈水解酶联合应用,可以转化3‑氰基吡啶累积获得6‑羟基烟酸54.5g·L‑1,其最适pH为6.0,相较于大多数偏好中性及碱性的烟酸脱氢酶,更适应工业生产条件,在工业应用上具有广阔的开发前景。