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公开(公告)号：CN106676081A
公开(公告)日：2017-05-17
申请号：CN201611206571.6
申请日：2016-12-23
申请人： 天津科技大学
摘要： 本发明属于酶的基因工程技术领域，具体涉及通过易错PCR技术体外定向进化获得酶活提高的磷脂酶B突变体，及利用其制备甘油磷脂酰胆碱以及油脂脱胶的方法。得到磷脂酶B突变体PLBM，酶活较野生型磷脂酶B的酶活提高了25％。
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公开(公告)号：CN106434579A
公开(公告)日：2017-02-22
申请号：CN201610899958.8
申请日：2016-10-17
申请人： 天津科技大学
IPC分类号： C12N9/02 , C12N15/53 , C12N15/75 , C12N15/81 , C12N1/21 , C12N1/19 , C02F3/34 , C12R1/125 , C12R1/84
CPC分类号： C12N9/0061 , C02F3/342 , C12N15/75 , C12N15/815 , C12N2800/101 , C12N2800/102 , C12Y110/03002
摘要： 本发明属于酶的基因工程技术领域，涉及一种来源于肺炎克雷伯氏菌的新型漆酶及其制备的方法，其技术方案是利用分子生物学手段和基因工程技术，通过菌种筛选获得一株能够产生漆酶的肺炎克雷伯氏菌，通过PCR技术扩增出该新型漆酶的基因，然后将该新型漆酶基因，分别在枯草芽胞杆菌表达系统和毕赤酵母表达系统中进行表达，分别得到枯草芽胞杆菌高稳定性漆酶重组菌株和毕赤酵母高稳定性漆酶游离表达重组菌株，实现新型漆酶的制备。同时该新型细菌漆酶对偶氮类和蒽醌类染料具有较好的脱色效果。
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公开(公告)号：CN106085984A
公开(公告)日：2016-11-09
申请号：CN201610402557.7
申请日：2016-06-02
申请人： 天津科技大学
摘要： 本发明属于酶的基因工程技术领域，具体涉及一种磷脂酶D突变体及其制备与应用。其技术方案是利用重组DNA技术对野生型磷脂酶D基因进行定点突变，得到活力较高的磷脂酶D基因，然后将高活力磷脂酶D基因在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统(包括毕赤酵母游离表达系统和毕赤酵母细胞表面展示系统)中表达，得到产高活力磷脂酶D的重组菌株，表达后，检测高活力磷脂酶D的比酶活较野生型磷脂酶D提高38‑140％，高活力磷脂酶D在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统、毕赤酵母表面展示系统内发酵酶活最高值分别为36.8U/ml、48.1U/ml、140.2U/(g·细胞干重)。
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公开(公告)号：CN105063111A
公开(公告)日：2015-11-18
申请号：CN201510531257.4
申请日：2015-08-26
申请人： 天津科技大学
IPC分类号： C12P7/58
摘要： 本发明涉及一种微生物转化制备L-鼠李糖酸的方法，步骤如下⑴添加L-鼠李糖到静息细胞溶液体系中，体系中静息细胞浓度为OD600＝25～50，L-鼠李糖质量百分比浓度为10％～40％，在转化过程中加入Na2CO3或CaCO3使pH保持恒定在5.0-7.0；⑵L-鼠李糖酸的提取：转化结束后，离心取上清，经蒸发浓缩、乙醇沉淀、烘干等步骤得到L-鼠李糖酸钙盐，最后用硫酸置换反应获得L-鼠李糖酸。本发明提供的假单胞菌是一种可以转化L-鼠李糖为L-鼠李糖酸的菌，菌体发酵后得到的静息细胞转化制备L-鼠李糖酸提高了转化率。
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公开(公告)号：CN104017786A
公开(公告)日：2014-09-03
申请号：CN201410279966.3
申请日：2014-06-20
申请人： 天津科技大学
CPC分类号： C12N9/18 , C12Y301/01004
摘要： 本发明涉及一种磷脂酶A2突变体及其制备的方法，其技术方案是利用重组DNA技术定点突变来源于天蓝色链霉菌的野生型磷脂酶A2的Glu37、Asp78的氨基酸残基，得到活力较高的磷脂酶A2基因，然后将高活力磷脂酶A2基因在枯草芽孢杆菌表达系统、毕赤酵母表达系统(包括毕赤酵母游离表达系统和毕赤酵母细胞表面展示系统)中表达，得到产高活力磷脂酶A2的重组菌株，表达后，检测高活力磷脂酶A2的比酶活较野生型磷脂酶A2提高13.7％，其中枯草芽孢杆菌高活力磷脂酶A2重组菌发酵后磷脂酶A2的酶活可达到53.5U/ml，毕赤酵母游离表达高活力磷脂酶A2重组菌的酶活可达106.4U/ml，毕赤酵母细胞表面展示高活力磷脂酶A2全细胞催化剂的酶活可达260U/(g·干细胞)。
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公开(公告)号：CN103045624B
公开(公告)日：2014-07-30
申请号：CN201210470064.9
申请日：2012-11-20
申请人： 天津科技大学
摘要： 本发明涉及一种耐高温高碱木聚糖酶及其基因、工程菌和制备方法，其技术方案是利用易错PCR和定点突变技术对来源于坎皮纳斯类芽孢杆菌的木聚糖酶基因XynG1-1进行耐高温和高碱的定向分子改造，得到耐高温高碱的木聚糖酶突变基因XynG1-1B43CC16，并利用巨大芽孢杆菌表达系统，分泌表达耐高温高碱木聚糖酶的方法。本发明解决了现有木聚糖酶耐高温与耐碱性无法同时兼顾，造成其在造纸工业中应用受限的问题，满足了木聚糖酶在高温和高碱性环境下进行生物制浆和生物漂白的要求，可提高纸浆白度和得率，减少造纸工业中化学试剂的用量，降低环境污染，促进造纸工业的清洁生产。
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公开(公告)号：CN102321558B
公开(公告)日：2014-03-05
申请号：CN201110282029.X
申请日：2011-09-22
申请人： 天津科技大学
摘要： 本发明公开了一种耐高温木聚糖酶的高产菌株及利用该菌株发酵产耐高温木聚糖酶的方法，并阐述了该酶的部分酶学性质。经菌种鉴定，将该菌命名为坎皮纳斯类芽孢杆菌G1-1(Paenibacillus campinasensis G1-1)，保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，菌种保藏号为CGMCC No.5023。该菌种发酵得到的耐高温木聚糖酶，经分离纯化得到单一组分，其相对分子量为41.3KDa，最适作用温度及pH分别为60℃和7.0；在40℃～70℃和pH 5.0～9.0范围内酶活保持相对稳定。本坎皮纳斯类芽孢杆菌木聚糖酶适合造纸、食品和饲料等多个工业领域的应用，具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN102787130B
公开(公告)日：2013-09-25
申请号：CN201210246909.6
申请日：2012-07-17
申请人： 天津科技大学
摘要： 本发明涉及一种耐酸性高温α-淀粉酶及其基因、工程菌和制备方法，其技术方案是利用重组DNA技术定点突变地衣芽孢杆菌耐高温α-淀粉酶基因，得到耐高温α-淀粉酶耐酸性突变基因，即耐酸性高温α-淀粉酶基因，并利用枯草芽孢杆菌表达系统，分泌表达耐酸性高温α-淀粉酶的方法。本发明解决了现有耐高温α-淀粉酶耐酸性较差，耐高温与耐酸性无法同时兼顾，造成应用受限的问题，满足了一些在酸性和高温环境下进行淀粉原料液化工艺的要求，可提高产品收得率及质量，简化工艺。
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公开(公告)号：CN102433312A
公开(公告)日：2012-05-02
申请号：CN201110389135.8
申请日：2011-11-30
申请人： 天津科技大学
摘要： 本发明涉及一种D-3-磷酸甘油酸脱氢酶，其氨基酸序列见序列1，其L-丝氨酸的抑制常数Ki＞250mM，以及一种D-3-磷酸甘油酸脱氢酶的编码基因，基因序列见序列2。本发明提供的PGDH的氨基酸序列与大肠杆菌野生型PGDH的氨基酸序列(序列3)的不同之处在于第344位氨基酸不是组氨酸而是丙氨酸且第346位氨基酸不是天冬酰胺而是丙氨酸，突变产生的PGDH不受L-丝氨酸的抑制，且本发明的PGDH变体的酶活性与野生型相比未发生改变。
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