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公开(公告)号：CN109593750A
公开(公告)日：2019-04-09
申请号：CN201910039981.3
申请日：2019-01-16
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种腈水合酶突变体、含该突变体的基因工程菌及其应用，属于酶工程技术领域。本发明是将腈水合酶突变体αL6T/A19V/F126Y-βM46K/E108R/S212Y(公开于发明专利CN102216455A)的第47位甘氨酸突变为天冬酰胺，获得的新突变酶具有更好的温度耐受性和产物耐受性，有利于以后的工业生产。将含该腈水合酶突变体的重组菌株高密度发酵，以烟腈为底物，进行全细胞催化反应制备烟酰胺。此法与化学生产法相比，生产工艺安全清洁，无环境污染，与酶法相比，底物价格便宜，催化效率高，终产物烟酰胺产率95％以上，浓度达到680g/L，简化了产物的分离纯化步骤。
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公开(公告)号：CN109337891A
公开(公告)日：2019-02-15
申请号：CN201811493273.9
申请日：2018-12-07
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种热稳定性提高的苯丙氨酸氨基变位酶突变体，属于酶工程技术领域。本发明的苯丙氨酸氨基变位酶的突变体序列如SEQ ID NO.2所示，该突变酶的比酶活相对于野生型略有提高，在50℃处理1h仍有83％残留酶活性，温度稳定性相比野生酶有了大幅度的提高，更适合应用于工业生产。
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公开(公告)号：CN105505931B
公开(公告)日：2018-11-09
申请号：CN201610004239.5
申请日：2016-01-05
Applicant: 江南大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/75 , C12N1/21 , C12N9/54 , C12N9/48
Abstract: 本发明公开了一种强启动子及其在提高纳豆激酶表达的应用，属于微生物基因工程领域。本发明涉及的一系列启动子基因是在启动子PP43和/或PHpaII的基础上对其进行n次(n≥1)串联形成的。在强启动子PHpaII‑PHpaII‑PP43控制转录下，重组纳豆激酶的纤溶活力高达264.2FU/ml。该方法高效安全，能够有效提高纳豆激酶的表达量，且为进一步研究启动子对异源基因表达的影响提供了理论基础。
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公开(公告)号：CN104962571B
公开(公告)日：2018-08-21
申请号：CN201510364026.9
申请日：2015-06-26
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种固定化马来酸顺反异构酶及其制备方法与应用，属于酶学与酶工程技术领域与生物化工领域。本发明将R5肽段连接在马来酸顺反异构酶的N端，再将R5‑MaiA用戊二醛交联，最后用硅反应液将交联后的R5‑MaiA进行包埋，完成马来酸顺反异构酶的固定化。用成本低、易操作的方法获得了稳定性高的固定化马来酸顺反异构酶(R5‑MI‑CLEA‑Si)，固定化酶最适反应温度为55℃，最适反应pH为7.7；在55℃条件下固定化酶的半衰期为4h，游离酶的半衰期为0.5h，固定化酶的稳定性是游离酶的8倍，重复催化反应8次后固定化酶的酶活仍能保留75％。
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公开(公告)号：CN108004225A
公开(公告)日：2018-05-08
申请号：CN201711375805.4
申请日：2017-12-19
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种成团泛菌来源的苯丙氨酸氨基变位酶的突变体，属于酶工程技术领域。本发明的苯丙氨酸氨基变位酶的突变体序列如SEQ ID NO.2所示，该突变酶在50℃处理1小时仍有60％残留酶活性，相比野生酶有了较大的温度稳定性提高。同时该突变体也具备了更好的pH稳定性，有利于以后的工业生产。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN118207146A
公开(公告)日：2024-06-18
申请号：CN202410375657.X
申请日：2024-03-29
Applicant: 江南大学
IPC: C12N1/21 , C12N9/88 , C12N9/48 , C12N15/55 , C12N15/60 , C12N15/31 , C12N15/70 , C07K14/245 , C12P13/00 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种生产γ‑氨基丁酸的工程菌株及其应用，属于酶工程技术领域。本发明的工程菌株可在3h内完成2moL·L‑1L‑Glu的转化，产量为197.0g·L‑1，与出发菌株相比产量提升了5.2倍。改造后工程菌株的生物量并未受到明显影响，且以1.5moL·L‑1L‑Glu为底物催化时，可以在4h内完成两批次的转化，具有工业应用的潜力。
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公开(公告)号：CN114350660B
公开(公告)日：2023-08-15
申请号：CN202111458760.3
申请日：2021-12-02
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种基于Lux群体感应元件的枯草芽孢杆菌自诱导基因表达系统，属于基因工程技术领域。本发明将来源于V.fischeri的lux群体感应系统重新设计，并在野生型PluxI启动子的基础之上对其‑10区上游4bp进行随机建库获得了活性提升的突变体启动子P22，P47，P56和P58，并以sfGFP作为报告基因来检测所述系统表达外源蛋白的水平，将sfGFP置于PluxI，P22，P47，P56和P58启动子下游，结果显示突变后的启动子较野生型PluxI有了明显的提升。本发明提供的这种系统可高效表达外源蛋白，从而在外源蛋白高效表达和合成生物学研究中具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN114250215B
公开(公告)日：2023-07-18
申请号：CN202111483679.0
申请日：2021-12-07
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种超嗜热II型普鲁兰酶及应用，属于基因工程技术领域。本发明通过对超嗜热II型普鲁兰酶进行氨基酸突变，获得了超嗜热II型普鲁兰酶突变体Q13H、I25E和Q13H/I25E。本发明获得的突变体催化性能有了很大的提高，且突变体在反应过程中不需要其他金属离子辅助(例如Ca2+)，有助于降低产物提取成本。本发明构建的突变体具有极强的热稳定性，在100℃保温10h还剩余50％的酶活，并具有较为广泛的pH活性范围和pH耐受性，在pH 5.8‑7.0范围保有70％活性，于不同的pH下，4℃放置剩余酶活均在75％以上，能很好的应用于淀粉工业中的糖化过程中。
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公开(公告)号：CN115322981A
公开(公告)日：2022-11-11
申请号：CN202210399507.3
申请日：2020-11-20
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种腈水合酶突变体及其在制备酰胺类化合物中的应用，属于基因工程和酶工程领域。本发明提供的腈水合酶突变体Str.t NHase‑βL48D在65℃的半衰期大约是43分钟，相比其他NHase酶热稳定性有显著提高。采用本发明的技术方案，对于以烟腈、丙烯腈、苯甲腈、2‑氰基吡嗪腈、异丁腈、正戊腈、肉桂腈等腈类化合物为底物的反应，其底物耐受性得到了明显的提高。
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公开(公告)号：CN114317510A
公开(公告)日：2022-04-12
申请号：CN202210006581.4
申请日：2022-01-05
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种马来酸顺反异构酶突变体，属于酶工程技术领域。本发明的马来酸顺反异构酶的突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，该突变酶的温度稳定性相比野生酶有了较大的提高，同时该突变体具有更好的pH稳定性。将构建得到的马来酸顺反异构酶突变体与天冬氨酸酶AspA在大肠杆菌中偶联表达，并以马来酸为底物生产L‑天冬氨酸，转化率可达94％以上，具有广阔的工业生产应用前景。
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