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公开(公告)号:CN118307650A
公开(公告)日:2024-07-09
申请号:CN202410237180.9
申请日:2024-03-01
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种多突变位点的YeeJ反向自转运蛋白突变体及其应用,属于基因工程及酶工程技术领域,从大肠杆菌(Escherichiacoli)K‑12菌株MG1655的基因组中通过易错PCR和高通量筛选得到了多突变位点的YeeJ反向自转运蛋白突变体,提供了通用型的YeeJ反向自转运体系,成功表面展示了PETase对PET较高的降解效率,达到了目前报道最高的620mg/L/d,对污水中微塑料的降解提供了技术保障。
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公开(公告)号:CN111518674B
公开(公告)日:2024-06-04
申请号:CN202010505026.7
申请日:2020-06-05
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提供了适用于微生物定向进化的培养系统,其能解决目前微生物定向进化中存在的菌种保藏操作繁琐,易染菌的问题。适用于微生物定向进化的培养系统,包括培养装置,培养装置包括发酵罐,其特征在于:培养系统还包括菌种保藏装置,菌种保藏装置包括管架、制冷机构、管盖打开机构和管体注液机构,管架开设有2个以上的用于盛放保藏管的管孔;制冷机构用于对盛放于管架上的保藏管进行制冷;管盖打开机构用于打开、闭合保藏管的管盖;管体注液机构用于将将发酵罐中的菌液输送至保藏管中。本发明的培养系统,能够实现菌液定期、自动化保藏,避免了人工操作,降低了染菌风险。
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公开(公告)号:CN117230123A
公开(公告)日:2023-12-15
申请号:CN202311201032.3
申请日:2023-09-15
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种利用酿酒酵母生物合成2‑(萘‑2‑基)乙醇的方法,首次应用Ehrlich途径以非天然氨基酸3‑(2‑萘基)‑丙氨酸作为底物生产新物质2‑(萘‑2‑基)乙醇,与传统的有机合成相比优势在于:绿色环保、对环境的污染小、不使用有毒的有机试剂;简单易行,对生产仪器的要求和对操作人员的技术要求更低;生产成本更低,仅使用廉价易得的底物以及一些常见的天然培养基和人工合成培养基即可得到产物,对相关生产过程进行基因工程等常规优化后,能得到更高浓度和纯度的产物。
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公开(公告)号:CN116875595A
公开(公告)日:2023-10-13
申请号:CN202310617466.5
申请日:2023-05-29
Applicant: 江南大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/77 , C12N15/65 , C12N1/21 , C12R1/15
Abstract: 本发明公开了一种谷氨酸棒杆菌中的BDPs活性表征新型生物传感器BDP‑SWITCH及其制备方法,其包括,所述生物传感器包括一个设有BDPcat和BDPicl启动子的质粒。本发明提供了一种能够用于高通量筛选的表征BDPs强度的荧光生物传感器,为谷氨酸棒杆菌高通量挖掘天然BDPs提供了有效工具,同时为原核生物中BDPs筛选提供了新的思路。
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公开(公告)号:CN113652442B
公开(公告)日:2023-04-07
申请号:CN202110998111.6
申请日:2021-08-27
Applicant: 江南大学
IPC: C12N15/77
Abstract: 本发明基于pEC‑XK99E中的pGA1棒杆菌复制子这一在谷氨酸棒杆菌中拷贝数约为30的低拷贝质粒复制子,将复制蛋白Rep的325位异亮氨酸突变为苏氨酸、398位编码丝氨酸的氨基酸变为同义密码子,成功获得了一种可以提高棒杆菌质粒拷贝数的复制子pGA1‑Rep‑I325T/S398。将该复制子用于高拷贝质粒的构建,携带有pGA1‑Rep‑I325T/S398复制子的质粒pEC‑XK99E‑Rep‑T/S在谷氨酸棒杆菌中复制后,通过质粒体外抽提证实增加了菌体中质粒的数量。构建pEC‑XK99E‑EGFP‑Rep‑T/S质粒,通过测定不同菌体量下的荧光值,与为突变质粒相比荧光量增加三倍即改造后的质粒提高了蛋白的表达量。同时通过荧光定量PCR手段,测定突变后拷贝数为野生型复制子的质粒的8倍约为245。
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公开(公告)号:CN115786340A
公开(公告)日:2023-03-14
申请号:CN202211376459.2
申请日:2022-11-04
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种提高leaderless启动子活性的方法及其应用,包括,在leaderless启动子和目的基因之间插入一段SEQ ID NO.2所示的62bp的核酸序列、SEQ ID NO.3所示的13bp的SD序列和SEQ ID NO.4所示的5bp的翻译偶联结构,制得高活性启动子。本发明提出的方法对于提高leadless启动子的活性具有很好的普适性;在所测试的另外两个leaderless启动子H36和Cg0124中,也观察到显著的启动子活性提高效果。
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公开(公告)号:CN115247182A
公开(公告)日:2022-10-28
申请号:CN202210190941.0
申请日:2022-02-25
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种异戊烯基焦磷酸异构酶突变体制备方法,其包括如下步骤:修饰Idi基因、构建质粒。本发明提供的突变体是肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)来源的经过定点突变得到的突变体。在大肠杆菌中异源表达本发明改造过后有着异戊二烯含量大幅度提升的效果。
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公开(公告)号:CN114574618A
公开(公告)日:2022-06-03
申请号:CN202210219429.4
申请日:2022-03-08
Applicant: 江南大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6851 , C12Q1/6806 , C12N15/11 , C12R1/84
Abstract: 本发明公开了一种巴斯德毕赤酵母不同生长阶段的内参基因及其引物和应用,所述内参基因为TIF1基因和/或RPL19A基因。本发明获得了适用于巴斯德毕赤酵母不同生长阶段的实时荧光定量内参基因,并设计了候选内参基因的实时荧光定量引物,该引物特异性强,扩增效率高,填补了巴斯德毕赤酵母不同生长阶段没有针对性的内参基因的现状。
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公开(公告)号:CN114574617A
公开(公告)日:2022-06-03
申请号:CN202210219172.2
申请日:2022-03-08
Applicant: 江南大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6851 , C12Q1/04 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种巴斯德毕赤酵母不同碳源下的内参基因及其引物和应用,所述内参基因为Eif5a基因和/或RPL14B基因。本发明提供的内参基因在巴斯德毕赤酵母不同碳源培养基中稳定表达,为蛋白生产过程中相关功能基因的表达定量提供可靠的分析依据;弥补了巴斯德毕赤酵母实时荧光定量内参基因的缺失,有利于菌株构建工程和重组蛋白生产,为今后开展基因表达研究提供了可靠依据。
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