公开(公告)号：CN105734136B

公开(公告)日：2019-07-30

申请号：CN201610178463.6

申请日：2016-03-25

申请人： 北京泛生子基因科技有限公司 ,  上海今创医学检验所有限公司 ,  杭州泛生子医学检验所有限公司

发明人： 阎海 ,  焦宇辰 ,  王晓月 ,  王思振

IPC分类号： C12Q1/6886 ,  C12Q1/6858

摘要： 本发明公开了一种检测人BRAF基因突变的探针法及检测试剂盒。该方法包括以下步骤：(1)在BRAF V600E PCR反应混合液中加入人类基因组DNA，形成BRAF V600E反应体系并进行荧光定量PCR扩增，其中BRAF V600E PCR反应混合液中包括溶解在PCR预混液中的：BRAF V600E上游引物、BRAF V600E下游引物、BRAF V600E探针、内参上游引物、内参下游引物和内参探针；(2)结果判断：根据PCR扩增的突变Ct值进行分析。该试剂盒包括：BRAF V600E PCR反应混合液。该探针法和试剂盒为临床上提供了一种速度快、灵敏度高、特异性强的BRAF基因突变检测体系。

公开(公告)号：CN105200134A

公开(公告)日：2015-12-30

申请号：CN201510616584.X

申请日：2015-09-24

申请人： 杭州泛生子医学检验所有限公司

发明人： 阎海 ,  焦雨辰 ,  王晓月 ,  王思振 ,  熊梓锴

IPC分类号： C12Q1/68

CPC分类号： C12Q1/6858 ,  C12Q2545/113 ,  C12Q2563/107

摘要： 本发明公开了一种检测人类TERT基因启动子突变的方法及其试剂盒。该试剂盒包括TERT C228T反应混合液和/或TERT C250T反应混合液，还包括TERT内标反应混合液。该方法包括以下步骤：1)在TERT C228T反应混合液和/或TERT C250T反应混合液中加入从样品中提取的、作为模板的人类基因组DNA，还在内标反应体系中加入与上述体系中相同的人类基因组DNA，进行荧光定量PCR扩增；2)对Ct值进行分析。本发明中的检测方法和试剂盒可以克服TERT基因启动子序列GC含量高、难以扩增等不利条件影响，对C228T和C250T位点突变实现有效的鉴别，检测灵敏度达到1％。

公开(公告)号：CN105734137A

公开(公告)日：2016-07-06

申请号：CN201610178701.3

申请日：2016-03-25

申请人： 上海今创医学检验所有限公司

发明人： 阎海 ,  焦宇辰 ,  王晓月 ,  王思振

IPC分类号： C12Q1/68

CPC分类号： C12Q1/6886 ,  C12Q1/6858 ,  C12Q2600/156 ,  C12Q2545/113 ,  C12Q2561/101 ,  C12Q2545/101 ,  C12Q2521/531

摘要： 本发明公开了一种检测人类H3F3A基因突变的探针法及其试剂盒。该方法包括以下步骤：(1)在H3F3A K27M PCR反应混合液中加入人类基因组DNA，形成K27M反应体系并进行荧光定量PCR扩增，其中H3F3A K27M PCR反应混合液中包括溶解在PCR预混液中的：H3F3A K27M上游引物、H3F3A K27M下游引物、H3F3A K27M探针、内参上游引物、内参下游引物和内参探针；(2)结果判断：根据PCR扩增的突变Ct值进行分析。该试剂盒包括：H3F3A K27M PCR反应混合液。该探针法和试剂盒为临床上提供了一种速度快、灵敏度高、特异性强的H3F3A基因突变检测体系。

公开(公告)号：CN105734136A

公开(公告)日：2016-07-06

申请号：CN201610178463.6

申请日：2016-03-25

申请人： 上海今创医学检验所有限公司

发明人： 阎海 ,  焦宇辰 ,  王晓月 ,  王思振

IPC分类号： C12Q1/68

摘要： 本发明公开了一种检测人BRAF基因突变的探针法及检测试剂盒。该方法包括以下步骤：(1)在BRAF V600E PCR反应混合液中加入人类基因组DNA，形成BRAF V600E反应体系并进行荧光定量PCR扩增，其中BRAF V600E PCR反应混合液中包括溶解在PCR预混液中的：BRAF V600E上游引物、BRAF V600E下游引物、BRAF V600E探针、内参上游引物、内参下游引物和内参探针；(2)结果判断：根据PCR扩增的突变Ct值进行分析。该试剂盒包括：BRAF V600E PCR反应混合液。该探针法和试剂盒为临床上提供了一种速度快、灵敏度高、特异性强的BRAF基因突变检测体系。

公开(公告)号：CN106801091A

公开(公告)日：2017-06-06

申请号：CN201710040498.8

申请日：2017-01-20

申请人： 北京泛生子基因科技有限公司

发明人： 阎海 ,  王思振 ,  焦宇辰 ,  郑延军 ,  徐大勇 ,  郑乔松

IPC分类号： C12Q1/68

摘要： 本发明公开了一种检测人类EGFR基因外显子19缺失突变的试剂盒及反应体系，该试剂盒包括：上游引物、下游引物、检测外显子19缺失突变的荧光探针和检测扩增后总DNA的荧光探针。该试剂盒针对EGFR基因外显子19缺失突变设计了特定序列的引物对和特定序列的探针，在优化的反应体系中通过digital PCR平台的方法，实现对EGFR基因外显子19缺失突变的高灵敏度检测，另外该检测可以同时检测18种不同类型的EGFR基因外显子19缺失形式，大大提高了通用性，从而为EGFR靶向治疗提供参考；进一步的本申请中可检测的样本来源多样，既可以是肿瘤组织，也可以是ctDNA，扩大了该试剂盒、反应体系和方法的使用范围。

公开(公告)号：CN106835292B

公开(公告)日：2019-04-09

申请号：CN201710218529.4

申请日：2017-04-05

申请人： 北京泛生子基因科技有限公司

发明人： 阎海 ,  王思振 ,  焦宇辰 ,  徐大勇 ,  郑乔松 ,  师晓

IPC分类号： C40B50/06 ,  C12N15/11

摘要： 本发明公开了一步法快速构建扩增子文库的方法，包括以下步骤：1、合成用于构建DNA样品的扩增子文库的引物组合，所述用于构建DNA样品的扩增子文库的引物组合包括：根据目标扩增子设计的上游融合引物，根据目标扩增子设计的下游融合引物，上游通用引物和下游通用引物；2、构建DNA样品的PCR反应体系；3、进行PCR。运用该方法可以简便、快速的经1步构建扩增子文库，且由于在PCR起始前就引入barcode，使得样本及文库间交叉污染的可能性大大降低。

公开(公告)号：CN106434941A

公开(公告)日：2017-02-22

申请号：CN201610913004.8

申请日：2016-10-19

申请人： 北京泛生子基因科技有限公司

发明人： 阎海 ,  王思振 ,  焦宇辰 ,  郑延军 ,  徐大勇 ,  郑乔松

IPC分类号： C12Q1/68

CPC分类号： C12Q1/6886 ,  C12Q1/686 ,  C12Q2600/118 ,  C12Q2600/156 ,  C12Q2600/158 ,  C12Q2563/107

摘要： 本发明公开了一种检测人类EGFR基因突变的试剂盒、反应体系及方法，该试剂盒包括：上游引物、下游引物、检测L858R突变的荧光探针和检测野生型的荧光探针。该试剂盒针对EGFR基因L858R突变设计了特定序列的引物对和特定序列的探针，在优化的反应体系中通过digital PCR平台的方法，实现对EGFR基因L858R突变的高灵敏度检测，并且在检测L858R突变的阴阳性的同时还可以获得样本中该突变的比例，进一步的本申请中可检测的样本来源多样，既可以是肿瘤组织，也可以是ctDNA，扩大了该试剂盒、反应体系和方法的使用范围。

公开(公告)号：CN112176419A

公开(公告)日：2021-01-05

申请号：CN201910983038.8

申请日：2019-10-16

申请人： 中国医学科学院肿瘤医院 ,  北京泛生子基因科技有限公司

发明人： 焦宇辰 ,  曲春枫 ,  王宇婷 ,  王沛 ,  陈坤 ,  宋欠欠 ,  刘慧 ,  王京京 ,  王思振 ,  阎海

IPC分类号： C40B50/06 ,  C40B40/06 ,  C12Q1/6886 ,  C12Q1/6806 ,  C12Q1/6869 ,  C12N15/11

摘要： 本发明公开了一种检测ctDNA中肿瘤特异基因的变异和甲基化的方法，该方法可以在一份样本中同时检测ctDNA中的肿瘤特异基因的变异(包括点突变、插入缺失突变、HBV整合等多种突变形式)和/或甲基化的方法，不仅样本量需求低，而且该方法制备的MC文库可以支持10‑20次的后续检测，每次检测的结果都可以代表全部原始ctDNA标本的突变状况及酶切位点覆盖区域的甲基化修饰情况，且不会造成灵敏度和特异性的降低。本发明对肿瘤早期筛查、病情追踪、疗效评估、预后预测等具有重要的临床意义，有重大的应用价值。

公开(公告)号：CN111690740A

公开(公告)日：2020-09-22

申请号：CN201910179499.X

申请日：2019-03-11

申请人： 中国医学科学院肿瘤医院 ,  北京泛生子基因科技有限公司

发明人： 焦宇辰 ,  曲春枫 ,  王宇婷 ,  王沛 ,  陈坤 ,  宋欠欠 ,  刘慧 ,  王思振 ,  阎海

IPC分类号： C12Q1/6886 ,  G01N33/574

摘要： 本发明提供了用于肝细胞癌早筛的试剂盒，其包括基因标志物检测剂和蛋白标志物检测剂。本发明还提供了所述试剂盒的制备方法和用途。本发明包含特定基因标志物与蛋白标志物的试剂盒已证实在社区群体中有效实现HCC早筛，特别是在前瞻性研究中得到了验证。

公开(公告)号：CN106834286B

公开(公告)日：2020-02-21

申请号：CN201710218530.7

申请日：2017-04-05

申请人： 北京泛生子基因科技有限公司

发明人： 阎海 ,  王思振 ,  焦宇辰 ,  徐大勇 ,  郑乔松 ,  师晓

IPC分类号： C12N15/11 ,  C40B50/06

摘要： 本发明公开了一步法快速构建扩增子文库的引物组合，其包括：根据目标扩增子设计的上游融合引物，所述上游融合引物包括第一接头序列和根据目标扩增子设计的特异性上游引物序列；根据目标扩增子设计的下游融合引物，所述下游融合引物包括第二接头序列和根据目标扩增子设计的特异性下游引物序列；上游通用引物，所述上游通用引物包括第三接头序列、barcode序列和第一接头序列；和下游通用引物，所述下游通用引物包括通用序列和第二接头序列。运用该融合引物组合可以简便、快速的经1步构建扩增子文库，且由于在PCR起始前就引入barcode，使得样本及文库间交叉污染的可能性大大降低。