山羊副流感病毒3型感染性cDNA克隆构建方法及其应用

    公开(公告)号:CN113736799B

    公开(公告)日:2024-02-06

    申请号:CN202111092942.3

    申请日:2021-09-17

    IPC分类号: C12N15/45 C12N15/85 C12N7/00

    摘要: 本发明提供山羊副流感病毒3型感染性cDNA克隆构建方法及其应用,属于生物技术领域。该构建方法包括:以山羊副流感病毒3型的总RNA反转录产物为模板,扩增A、B、C和D片段;将片段A和B、片段C和D分别插入pCI‑neo‑1载体中,得到重组载体pCI‑A‑B、pCI‑C‑D;以pCI‑A‑B为模板,扩增片段A‑B;以pCI‑C‑D为模板,扩增C‑D片段;将线性化pYES1L载体、A‑B和C‑D片段混和,导入酵母内进行同源重组,得到山羊副流感病毒3型感染性cDNA克隆质粒。本发明构建方法效率高,得到的感染性cDNA克隆拯救的病毒感染细胞后能够快速产生细胞病变,病毒滴度高,且保持稳定。

    一种分泌抗CpHV-1单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其应用

    公开(公告)号:CN108913665B

    公开(公告)日:2021-06-22

    申请号:CN201810831978.0

    申请日:2018-07-26

    摘要: 本发明涉及一种分泌抗CpHV‑1单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其应用,属于免疫技术领域。本发明从建立的分泌抗CpHV‑1单克隆抗体的杂交瘤细胞库中筛选出一株杂交瘤细胞4A4株。用其制备的小鼠腹水单克隆抗体对CpHV‑1的中和效价达28。本发明的杂交瘤细胞4A4株分泌的单克隆抗体可用于CpHV‑1发病羊的临床治疗,疗效显著,安全无不良副反应。本发明的杂交瘤细胞4A4株制备的单克隆抗体治疗剂,保存两年后中和效价不降低,稳定性好。此外,利用本发明的杂交瘤细胞4A4株分泌的单克隆抗体作为检测抗体建立的间接免疫荧光(IFA)检测方法,具有较好的灵敏性和特异性,可以用于CpHV‑1感染的鉴别诊断。

    山羊疱疹病毒Ⅰ型疫苗株及其应用

    公开(公告)号:CN107893056A

    公开(公告)日:2018-04-10

    申请号:CN201711326466.0

    申请日:2017-12-13

    摘要: 本发明提供山羊疱疹病毒Ⅰ型疫苗株及其应用,涉及兽医生物制品领域。山羊疱疹病毒Ⅰ型疫苗株,是山羊疱疹病毒Ⅰ型JSHA1405株,保藏编号为CCTCC NO:V201745。采用牛肾传代细胞增殖上述病毒得到病毒液。本发明还提供所述疫苗株在制备山羊疱疹病毒Ⅰ型疫苗中的应用。本发明山羊疱疹病毒Ⅰ型JSHA1405株对山羊有较强的致病性,且具有良好的免疫原性。应用山羊疱疹病毒Ⅰ型JSHA1405株制备的油佐剂灭活疫苗安全可靠,山羊免疫后能够产生较高水平的抗体,抗体持续期达到6个月,并且对同源毒种攻毒具有非常好的保护效果,免疫后羊群的发病率明显减少,能够有效预防山羊疱疹病毒Ⅰ型的流行。

    山羊副流感病毒3型感染性cDNA克隆构建方法及其应用

    公开(公告)号:CN113736799A

    公开(公告)日:2021-12-03

    申请号:CN202111092942.3

    申请日:2021-09-17

    IPC分类号: C12N15/45 C12N15/85 C12N7/00

    摘要: 本发明提供山羊副流感病毒3型感染性cDNA克隆构建方法及其应用,属于生物技术领域。该构建方法包括:以山羊副流感病毒3型的总RNA反转录产物为模板,扩增A、B、C和D片段;将片段A和B、片段C和D分别插入pCI‑neo‑1载体中,得到重组载体pCI‑A‑B、pCI‑C‑D;以pCI‑A‑B为模板,扩增片段A‑B;以pCI‑C‑D为模板,扩增C‑D片段;将线性化pYES1L载体、A‑B和C‑D片段混和,导入酵母内进行同源重组,得到山羊副流感病毒3型感染性cDNA克隆质粒。本发明构建方法效率高,得到的感染性cDNA克隆拯救的病毒感染细胞后能够快速产生细胞病变,病毒滴度高,且保持稳定。