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公开(公告)号：CN105886494B
公开(公告)日：2018-12-11
申请号：CN201610309618.5
申请日：2016-05-11
申请人： 江苏省疾病预防控制中心
摘要： 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种扩增甲型流感病毒全基因组试剂盒及使用方法。本发明试剂盒包含反转录引物混合物、反转录缓冲液、反转录酶、PCR扩增缓冲液及DNA聚合酶。本发明根据甲型流感病毒设计一条反转录引物和一对通用型扩增引物，采用反转录、PCR扩增2个步骤完成。该试剂盒可对所有亚型的甲型流感病毒的8个基因节段同时进行扩增，具有较强的广谱性，可在6小时内完成反应，扩增产物可用于分子克隆、测序反应等，为甲型流感病毒全基因组的扩增提供了简单快速的手段。
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公开(公告)号：CN105886494A
公开(公告)日：2016-08-24
申请号：CN201610309618.5
申请日：2016-05-11
申请人： 江苏省疾病预防控制中心
CPC分类号： C12Q1/6806 , C12Q1/70
摘要： 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种扩增甲型流感病毒全基因组试剂盒及使用方法。本发明试剂盒包含反转录引物混合物、反转录缓冲液、反转录酶、PCR扩增缓冲液及DNA聚合酶。本发明根据甲型流感病毒设计一条反转录引物和一对通用型扩增引物，采用反转录、PCR扩增2个步骤完成。该试剂盒可对所有亚型的甲型流感病毒的8个基因节段同时进行扩增，具有较强的广谱性，可在6小时内完成反应，扩增产物可用于分子克隆、测序反应等，为甲型流感病毒全基因组的扩增提供了简单快速的手段。
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公开(公告)号：CN105154585A
公开(公告)日：2015-12-16
申请号：CN201510414190.6
申请日：2015-07-14
申请人： 江苏省疾病预防控制中心 , 杭州优思达生物技术有限公司
CPC分类号： C12Q1/701 , C12Q1/6844 , C12Q2531/119 , C12Q2565/625
摘要： 本发明涉及一种试剂盒及其应用，尤其是一种检测发热伴血小板减少综合征病毒的恒温扩增试剂盒及应用，属于生物技术领域。本发明进一步提供含有寡核苷酸的检测发热伴血小板减少综合征病毒的恒温扩增试剂盒，包括以下组分：(1)RNA提取试剂；(2)恒温扩增反应液，包括1×Bst Buffer、甜菜碱、MgSO4、dNTPs、RNase抑制剂、Bst DNA聚合酶、AMV逆转录酶、灭菌去离子水、所述上下游链置换引物、上下游探针和一条交叉扩增引物；(3)阳性对照模板，为发热伴血小板减少综合征病毒M基因片段的体外转录产物；(4)阴性对照，灭菌去离子水。本发明具有检测灵敏度高、特异性强、操作步骤简单、可重复性高、反应时间短等特性，且整个反应过程均在同一温度下进行，仅需一个恒温仪器即可完成检测，具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN116200537B
公开(公告)日：2023-09-19
申请号：CN202211259258.4
申请日：2022-10-14
IPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/6869 , C12N15/11 , C12R1/93
摘要： 本发明公开了一种呼吸道合胞病毒A型全基因组测序方法，该方法针对呼吸合胞病毒A型进行设计覆盖基因全长的引物，引物共有25对，其中在第1对引物中添加了一条正向引物序列，引物选自于由SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.51表示的寡核苷酸序列。上述引物组合对呼吸道合胞病毒A型具有特异性，且对于呼吸合胞病毒A型的亚型具有通用性，上述引物组合可实现在一个PCR反应体系中进行多重PCR一步扩增呼吸道合胞病毒A型的全基因组，灵敏度高，可快速构建呼吸道合胞病毒基因组文库，并适用于二代测序和三代测序。
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公开(公告)号：CN113801966B
公开(公告)日：2022-09-27
申请号：CN202111294163.1
申请日：2021-11-03
IPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
摘要： 本发明提供了一种检测新型冠状病毒亚基因的荧光定量PCR方法及试剂盒。该试剂盒可敏感、特异的检测各种样本是否存在N亚基因，从而反映新型冠状病毒的感染性。同时试剂盒使用内标以质控核酸抽提及PCR反应过程，消除假阴性的产生，使整个检测过程实验准确可靠。
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公开(公告)号：CN114836577A
公开(公告)日：2022-08-02
申请号：CN202210461391.1
申请日：2022-04-28
IPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
摘要： 本发明公开了一种检测新型冠状病毒7a亚基因的引物组和探针及其应用、产品，涉及生物技术领域。所述引物组包括如SEQ ID NO.4所示的上游引物和如SEQ ID NO.2所示的下游引物；所述探针的核苷酸系列如SEQ ID NO.3所示。根据转录组测序分析发现，在病毒复制过程中N、E、7a亚基因表达量较高，本发明通过提供一种针对新型冠状病毒7a亚基因的引物组和探针，利用荧光RT‑RAA技术实现了对新型冠状病毒亚基因的快速检测，从而为判断SARS‑CoV‑2临床样本的感染性提供参考。
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公开(公告)号：CN109097450B
公开(公告)日：2022-05-13
申请号：CN201810998894.6
申请日：2018-08-30
申请人： 江苏省疾病预防控制中心
IPC分类号： C12Q1/6844
摘要： 本发明涉及一种核酸序列非依赖的全RNA扩增方法，首先在随机引物的5’端引入T7 RNA多聚酶启动子序列与固定序列用于合成RNA的互补cDNA，通过纯化去除多余引物后使用另一条5’端带有固定序列的随机引物合成第二链cDNA，再次通过纯化去除多余引物后获得两端带有不同固定序列的双链cDNA，其中一端具有T7 RNA多聚酶启动子序列，然后以固定序列为引物、T7 RNA多聚酶，AMV反转录酶和RNase H进行恒温转录反转录反应，实现对模板中全RNA的扩增。该方法可以对模板中所有RNA分子进行扩增，不依赖核酸序列信息，对于微量核酸特别是未知病原的靶标放大优势明显，有助于下游特定分子的检测。
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公开(公告)号：CN108950038A
公开(公告)日：2018-12-07
申请号：CN201811032875.4
申请日：2018-09-05
申请人： 江苏省疾病预防控制中心
CPC分类号： C12Q1/689 , C12Q1/686 , C12Q2600/16 , C12Q2600/166 , C12Q2537/143 , C12Q2545/113 , C12Q2565/125
摘要： 本发明涉及一种大肠杆菌H血清型分型检测试剂盒，其包括扩增大肠杆菌H血清型H1～H12、H14～H21、H23～H49、H51～H56的PCR引物，引物序列见SEQ ID NO.1‑106，还包括H血清型分型标准物。本发明解决了现有技术中对大肠杆菌H血清型分型方法的技术要求高、不全面、耗时、耗力以及交叉反应导致的误判问题，利用本发明的试剂盒对大肠杆菌H血清型进行分型检测，使分型检测更客观、简便和准确，并可同时检测大肠杆菌53个血清型，分型效果与传统血清分型一致，检测过程操作简便，结合毛细管电泳对扩增产物进行分析，可实现大肠杆菌H血清型分型检测的自动化与高通量。
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公开(公告)号：CN116200537A
公开(公告)日：2023-06-02
申请号：CN202211259258.4
申请日：2022-10-14
IPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/6869 , C12N15/11 , C12R1/93
摘要： 本发明公开了一种呼吸道合胞病毒A型全基因组测序方法，该方法针对呼吸合胞病毒A型进行设计覆盖基因全长的引物，引物共有25对，其中在第1对引物中添加了一条正向引物序列，引物选自于由SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.51表示的寡核苷酸序列。上述引物组合对呼吸道合胞病毒A型具有特异性，且对于呼吸合胞病毒A型的亚型具有通用性，上述引物组合可实现在一个PCR反应体系中进行多重PCR一步扩增呼吸道合胞病毒A型的全基因组，灵敏度高，可快速构建呼吸道合胞病毒基因组文库，并适用于二代测序和三代测序。
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公开(公告)号：CN113832262A
公开(公告)日：2021-12-24
申请号：CN202111324425.4
申请日：2021-11-10
IPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
摘要： 本发明涉及一种检测新型冠状病毒感染性的寡核苷酸,以及含有该寡核苷酸的试剂盒及应用，属于生物技术领域。本发明的试剂盒，包括以下组分：（1）叠氮溴化丙锭（PMA）溶液；（2）磷酸盐缓冲盐溶液（PBS，PH=7.4）；（3）RNA提取试剂；（4）扩增反应液，包括One Step PrimeScript III RT‑qPCR Mix、上下游引物和Taqman探针；（5）阳性质控品；为灭活的新型冠状病毒或假病毒；（6）阴性对照，灭菌去离子水。本发明具有检测灵敏度高、检测时间短、操作步骤简单、应用范围广等特性，且在生物安全二级（BSL‑2）实验室即可开展，具有广阔的应用前景。
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