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公开(公告)号：CN108802381B
公开(公告)日：2021-03-12
申请号：CN201810604281.X
申请日：2018-06-13
申请人： 河南中泽生物工程有限公司 , 扬州大学
IPC分类号： G01N33/569 , G01N33/558
摘要： 本发明公开了一种牛病毒性腹泻病毒鉴别检测试纸条及其制备方法，以快速灵敏检测BVDV抗体。该试纸条由支撑底板、包被吸附材料层、蛋白标记承载材料层、样品缓冲材料层、液体吸收材料层、外层保护材料组成；所述包被吸附材料设有测试线和质控线；所述试纸条的蛋白标记采用胶体金标记；所述蛋白标记所用的蛋白为从噬菌体多肽文库中筛选所得的与BVDV抗体结合的噬菌体单克隆；所述噬菌体单克隆表达的多肽表位为LTPHKHHKHLHA。其制备方法包括金标噬菌体单克隆的制备、金标垫的制备、硝酸纤维素膜的制备、组装各部件，即得。本发明可以在十分钟之内获得检测结果，快速敏感，成本低，操作简单易于基层在生产和科研中推广和应用。
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公开(公告)号：CN108802381A
公开(公告)日：2018-11-13
申请号：CN201810604281.X
申请日：2018-06-13
申请人： 河南中泽生物工程有限公司 , 扬州大学
IPC分类号： G01N33/569 , G01N33/558
摘要： 本发明公开了一种牛病毒性腹泻病毒鉴别检测试纸条及其制备方法，以快速灵敏检测BVDV抗体。该试纸条由支撑底板、包被吸附材料层、蛋白标记承载材料层、样品缓冲材料层、液体吸收材料层、外层保护材料组成；所述包被吸附材料设有测试线和质控线；所述试纸条的蛋白标记采用胶体金标记；所述蛋白标记所用的蛋白为从噬菌体多肽文库中筛选所得的与BVDV抗体结合的噬菌体单克隆；所述噬菌体单克隆表达的多肽表位为LTPHKHHKHLHA。其制备方法包括金标噬菌体单克隆的制备、金标垫的制备、硝酸纤维素膜的制备、组装各部件，即得。本发明可以在十分钟之内获得检测结果，快速敏感，成本低，操作简单易于基层在生产和科研中推广和应用。
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公开(公告)号：CN108640990A
公开(公告)日：2018-10-12
申请号：CN201810549725.4
申请日：2018-05-31
申请人： 河南省农业科学院 , 扬州大学 , 河南中泽生物工程有限公司
IPC分类号： C07K16/10 , G01N33/577
摘要： 本发明公开了一种NcpBVDV单克隆抗体及其制备方法和应用，该单克隆抗体的重链型为：lgG1，轻链型为：Kappa型；IPMA效价不低于1.02×106。本发明提供一种NcpBVDV单克隆抗体的制备方法，并将所述的NcpBVDV单克隆抗体在抗病毒药物高通量筛选中应用。本发明还提供一种抗NcpBVDV药物筛选的方法。本发明具有较强的特异性，成本低，操作简便快速，显示检测结果直观准确，不依赖于大型仪器，易于在科研和临床诊断中广泛应用推广。
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公开(公告)号：CN107012170A
公开(公告)日：2017-08-04
申请号：CN201710299948.5
申请日：2017-05-02
申请人： 扬州大学
CPC分类号： C12N15/85 , C12N7/00 , C12N15/66 , C12N2750/14352 , C12N2800/106
摘要： 本发明涉及生物技术领域，特别涉及一种番鸭细小病毒(Muscovy duck parvovirus,MDPV)感染性克隆的构建和拯救方法。该方法是将MDPV的完整基因组克隆入载体质粒pBSKN，获得重组质粒；将重组质粒与转染试剂混合后，通过绒毛尿囊膜途径接种非免疫番鸭胚，重组质粒在番鸭胚中得到拯救；所述pBSKN载体，是将商品化质粒pBluescript II(SK)多克隆位点原有的EcoRV酶切位点用NcoI位点替换而得到。产生的感染性病毒可致死番鸭胚，拯救病毒与亲本病毒对雏番鸭具有相近的致死率。该拯救方法操作简便高效，避免了转染原代细胞带来的繁琐和低效问题，在MDPV反向遗传学研究和疫苗创制上具有潜在应用价值。
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公开(公告)号：CN108315447A
公开(公告)日：2018-07-24
申请号：CN201810124793.6
申请日：2018-02-07
申请人： 扬州大学 , 国药集团扬州威克生物工程有限公司
CPC分类号： C12Q1/689 , C12Q2600/158
摘要： 本发明涉及产肠毒素大肠杆菌I型菌毛基因的应用。本发明公开了fimA序列中第71位的一段特有基序AAACTA作为监测、鉴别产肠毒素大肠杆菌的分子标记的应用。并设计一对特异性鉴定引物，可以在猪场临床环境中快速检测产肠毒素大肠杆菌。通过这对引物对分离的细菌DNA模板进行PCR扩增，如果存在产肠毒素大肠杆菌，则可以扩增预期的阳性条带；如果是其他非产肠毒素大肠杆菌病原菌，非致病大肠杆菌或引起腹泻的其他病原菌如沙门菌、魏氏梭菌等其他菌属，则结果阴性。本发明基于不同菌属I型菌毛FimA基因序列的差异性，发现在产肠毒素大肠杆菌fimA存在的特有的一段序列，设计出为临床快速区分和鉴定产肠毒素大肠杆菌提供新策略和方法。
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公开(公告)号：CN106318975A
公开(公告)日：2017-01-11
申请号：CN201610817565.8
申请日：2016-09-12
申请人： 扬州大学
CPC分类号： C12N15/85 , C12N7/00 , C12N2770/24321 , C12N2770/24351 , C12N2800/107
摘要： 本发明属于兽用生物制品技术领域。具体涉及一种猪源BVDV-2毒株感染性cDNA克隆及应用。所述包含了猪源BVDV-2种毒全长cDNA，所述猪源BVDV-2种毒全长cDNA 5’末端插入T7 RNA聚合酶启动子、3’末端插入SbfI限制性内切酶。本发明还公开了含有所述猪源BVDV-2毒株感染性cDNA的质粒pASH28，该质粒线性化后，体外转录成RNA，并转染MDBK细胞，能成功拯救出牛病毒性腹泻病毒。这种猪源BVDV-2感染性cDNA克隆可用于研究不同动物源BVDV蛋白之间的功能差异，也可用于遗传改造制备高效价减毒BVDV疫苗。
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公开(公告)号：CN108384865A
公开(公告)日：2018-08-10
申请号：CN201810123080.8
申请日：2018-02-07
申请人： 扬州大学
CPC分类号： C12Q1/689 , C12Q2600/158
摘要： 本发明涉及Alpha菌毛基因在仔猪腹泻致病性大肠杆菌监测、鉴别中的应用。本发明还提供一对用于检测仔猪腹泻致病性大肠杆菌的特异性引物和试剂盒。鉴定引物用于猪场临床环境中致仔猪腹泻大肠杆菌的快速检测；对从饲料、饮水(或污水)、扬尘和粪便中分离细菌为模板，利用这对引物进行PCR扩增，如果是致仔猪腹泻致病性大肠杆菌，则PCR扩增为预期阳性；如果是其他非致病大肠杆菌，如沙门菌、魏氏梭菌等其他菌属，则结果为阴性。本发明基于不同菌属或者不同表型大肠杆菌中Alpha菌毛基因的分布差异，以及Alpha菌毛cblB基因序列保守性的特点，为临床快速区分和鉴定致仔猪腹泻大肠杆菌提供新的方法和选择。
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公开(公告)号：CN105123945A
公开(公告)日：2015-12-09
申请号：CN201510515696.6
申请日：2015-08-20
申请人： 扬州大学
IPC分类号： A23C9/156
摘要： 本发明涉及一种芦苇牛奶饮品的制备方法，包括如下步骤：制备芦苇叶提取物：采用天然生长的芦苇叶，从顶端采集幼嫩的叶子；取嫩叶用清水将叶子漂洗，洗去表面的灰尘；将芦苇叶表面进行消毒处理；将芦苇叶截断并粉碎；将截断的芦苇叶放在平底锅内，加入水，煮沸后浓缩；弃掉残渣，将提取的液体采用滤网过滤；将滤液进一步文火加热浓缩成同时再一次高温灭菌；将获得的提取液密封冷冻保存；将芦苇提取物与牛奶按比例混合；匀浆处理；牛奶适量分装后冷藏保存。本发明从芦苇叶中提取具有抗炎作用的水溶性提取物，并将其用于制备牛奶，以改变牛奶的风味和色泽，同时使牛奶具有抗炎等保健功能。
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公开(公告)号：CN107881260A
公开(公告)日：2018-04-06
申请号：CN201711145762.0
申请日：2017-11-17
申请人： 扬州大学
CPC分类号： C12Q1/686 , C12Q2565/125
摘要： 本发明提供一种对牛血清中牛病毒性腹泻病毒进行分离鉴定的方法，过程如下：将MDBK细胞与牛血清样品经三次盲传后离心处理，再提取病毒RNA，进一步利用试剂盒将RNA反转录合成病毒基因组cDNA；进行PCR反应完成血清样品中牛病毒性腹泻病毒的分离鉴定。本发明的方法可以同时对大批量样品进行处理，不仅提高了工作效率，病毒经扩增培养后更易于准确检测，准确率得到提高，为临床样品和商品化血清批量样品分离BVDV均提供了切实可行的分离方法。
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公开(公告)号：CN106893732A
公开(公告)日：2017-06-27
申请号：CN201710251311.9
申请日：2017-04-18
申请人： 扬州大学
摘要： 本发明涉及生物技术领域，特别涉及一种鹅细小病毒(Goose parvovirus,GPV)感染性克隆的拯救方法。该方法是将GPV的完整基因组克隆入载体质粒pBSKNB，获得重组质粒；将重组质粒与转染试剂混合后，通过绒毛尿囊膜途径接种非免疫鹅胚，重组质粒在鹅胚中得到拯救；所述pBSKNB载体，是将pBluescript II(SK)质粒上原有的EcoRV和HindIII酶切位点分别用NcoI和BclI位点替换而得到。本发明产生的感染性病毒可致死鹅胚，拯救病毒与亲本病毒具有一致生物学特性。该拯救方法操作简便高效，避免了转染细胞带来的繁琐和低效问题，在GPV反向遗传学研究和疫苗创制上具有潜在应用价值。
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