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公开(公告)号：CN109134622B
公开(公告)日：2021-07-02
申请号：CN201810933260.2
申请日：2018-08-16
申请人： 金宇保灵生物药品有限公司
摘要： 本发明公开了一种口蹄疫抗原的多步连续集成纯化方法，是从BHK‑21悬浮细胞培养的口蹄疫病毒液中多步连续集成纯化得到口蹄疫抗原，包括经离心澄清、超滤浓缩和/或深层过滤澄清后的离子交换层析等步骤。该多步连续集成纯化方法，使用深层过滤技术结合PEG沉淀法去除口蹄疫超滤浓缩液中的部分杂蛋白成分，再根据口蹄疫抗原表面所带电荷的差异性，应用离子交换层析和疏水层析进行多步层析纯化的工艺。本发明可用于高纯度口蹄疫抗原的制备，对超滤浓缩液的单次处理量可达900ml，纯度可达到90％，适用于要求纯度大于90％的口蹄疫抗原的大规模生产，并可根据生产规模进行扩缩，用于生产高纯度抗原的精制口蹄疫疫苗。
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公开(公告)号：CN117070475B
公开(公告)日：2023-12-29
申请号：CN202311325511.6
申请日：2023-10-13
申请人： 金宇保灵生物药品有限公司
发明人： 杨青春 , 王凯 , 陈坚 , 包文明 , 俎红利 , 宋志刚 , 田瑞霞 , 闫聪 , 王秉昆 , 泰鹏 , 李超 , 李晓燕 , 齐志涛 , 辛俊利 , 贺瑶 , 关平原 , 赵丽霞 , 王华
摘要： 本发明涉及兽用制品技术领域，尤其涉及一种牛轮状病毒无血清悬浮培养方法及其产品和应用。本发明所述牛轮状病毒无血清悬浮培养方法以猪小肠黏膜上皮细胞为宿主细胞，接毒培养，得到牛轮状病毒培养液。市面上对于牛轮状病毒敏感的细胞种类非常较少，大部分仅局限于贴壁细胞培养。本发明偶然发现，猪小肠黏膜上皮细胞具有无血清悬浮培养潜力，经常规无血清悬浮培养驯化后，能稳定连续增殖，且在牛轮状病毒的培养中表现出特殊优势：无需添加血清，即可稳定培养获得高效价BRV病毒培养液。且利用获得的病毒培养液制备得到的灭活疫苗免疫
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公开(公告)号：CN101664549B
公开(公告)日：2012-05-23
申请号：CN200910092433.3
申请日：2009-09-08
申请人： 金宇保灵生物药品有限公司
IPC分类号： A61K39/135 , A61P31/14
摘要： 本发明提供了一种口蹄疫疫苗纯化抗原工艺，包括以下步骤：(1)无菌控制下，向用于制备纯化的病毒抗原的口蹄疫病毒液中加入氯仿，氯仿体积为口蹄疫病毒液体积的0.5～2％，搅拌混合；(2)2～8℃静置3～24小时，然后分离得到上清液；(3)离心处理上清液，获取纯化的病毒抗原。按照上述口蹄疫疫苗纯化抗原工艺获取纯化的病毒抗原，然后进行抗原灭活和疫苗配制，就可以获得免疫效果和安全性都得到提高的口蹄疫疫苗。
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公开(公告)号：CN116121208A
公开(公告)日：2023-05-16
申请号：CN202310048446.0
申请日：2023-01-31
申请人： 金宇保灵生物药品有限公司
摘要： 本发明涉及病毒疫苗制备技术领域，尤其涉及一种牛轮状病毒纯化浓缩方法及牛轮状病毒浓缩液。所述牛轮状病毒纯化浓缩方法通过依次对病毒液进行切向流过滤浓缩和PEG浓缩，浓缩倍数可达10倍以上，抗原回收率达到100％，且蛋白去除率达到96％以上。本发明所述牛轮状病毒纯化浓缩方法得到的浓缩液具有良好的免疫原性，且免疫后副反应几率低。本发明所述牛轮状病毒纯化浓缩方法可用于活病毒和灭活病毒的纯化浓缩，其可制备出纯化牛轮状病毒抗原，能为后续抗原的进一步精细纯化提供原料。
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公开(公告)号：CN101664549A
公开(公告)日：2010-03-10
申请号：CN200910092433.3
申请日：2009-09-08
申请人： 金宇保灵生物药品有限公司
IPC分类号： A61K39/135 , A61P31/14
摘要： 本发明提供了一种口蹄疫疫苗纯化抗原工艺，包括以下步骤：(1)无菌控制下，向用于制备纯化的病毒抗原的口蹄疫病毒液中加入氯仿，氯仿体积为口蹄疫病毒液体积的0.5～2％，搅拌混合；(2)2～8℃静置3～24小时，然后分离得到上清液；(3)离心处理上清液，获取纯化的病毒抗原。按照上述口蹄疫疫苗纯化抗原工艺获取纯化的病毒抗原，然后进行抗原灭活和疫苗配制，就可以获得免疫效果和安全性都得到提高的口蹄疫疫苗。
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公开(公告)号：CN117070475A
公开(公告)日：2023-11-17
申请号：CN202311325511.6
申请日：2023-10-13
申请人： 金宇保灵生物药品有限公司
发明人： 杨青春 , 王凯 , 陈坚 , 包文明 , 俎红利 , 宋志刚 , 田瑞霞 , 闫聪 , 王秉昆 , 泰鹏 , 李超 , 李晓燕 , 齐志涛 , 辛俊利 , 贺瑶 , 关平原 , 赵丽霞 , 王华
摘要： 本发明涉及兽用制品技术领域，尤其涉及一种牛轮状病毒无血清悬浮培养方法及其产品和应用。本发明所述牛轮状病毒无血清悬浮培养方法以猪小肠黏膜上皮细胞为宿主细胞，接毒培养，得到牛轮状病毒培养液。市面上对于牛轮状病毒敏感的细胞种类非常较少，大部分仅局限于贴壁细胞培养。本发明偶然发现，猪小肠黏膜上皮细胞具有无血清悬浮培养潜力，经常规无血清悬浮培养驯化后，能稳定连续增殖，且在牛轮状病毒的培养中表现出特殊优势：无需添加血清，即可稳定培养获得高效价BRV病毒培养液。且利用获得的病毒培养液制备得到的灭活疫苗免疫原性良好，能够有效的预防由牛轮状病毒引起的犊牛腹泻。
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公开(公告)号：CN111172121A
公开(公告)日：2020-05-19
申请号：CN201811344603.8
申请日：2018-11-13
申请人： 金宇保灵生物药品有限公司
摘要： 本发明公开了一种塞内卡病毒的浓缩方法，包括塞内卡病毒液预处理，及预处理后的浓缩；所述浓缩依次经过过滤浓缩、洗滤、过滤浓缩。本发明涉及一种可适用于大规模工业化生产的SVV抗原浓缩纯化方法。该方法采用切向流过滤及洗滤相结合的方式对SVV抗原进行浓缩纯化，具有操作方便，易于放大，过程温和、稳定，抗原回收率高等特点。该方法可用于活病毒和灭活病毒的浓缩纯化，抗原回收率>80％，蛋白去除率>90％，可制备出纯化SVV抗原或为后续抗原进一步精细纯化提供原料。
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公开(公告)号：CN109134622A
公开(公告)日：2019-01-04
申请号：CN201810933260.2
申请日：2018-08-16
申请人： 金宇保灵生物药品有限公司
CPC分类号： C07K14/005 , C12N2770/32122
摘要： 本发明公开了一种口蹄疫抗原的多步连续集成纯化方法，是从BHK‑21悬浮细胞培养的口蹄疫病毒液中多步连续集成纯化得到口蹄疫抗原，包括经离心澄清、超滤浓缩和/或深层过滤澄清后的离子交换层析等步骤。该多步连续集成纯化方法，使用深层过滤技术结合PEG沉淀法去除口蹄疫超滤浓缩液中的部分杂蛋白成分，再根据口蹄疫抗原表面所带电荷的差异性，应用离子交换层析和疏水层析进行多步层析纯化的工艺。本发明可用于高纯度口蹄疫抗原的制备，对超滤浓缩液的单次处理量可达900ml，纯度可达到90％，适用于要求纯度大于90％的口蹄疫抗原的大规模生产，并可根据生产规模进行扩缩，用于生产高纯度抗原的精制口蹄疫疫苗。
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