过氧化氢诱导的猪脾细胞氧化应激模型的建立方法

    公开(公告)号:CN106479958A

    公开(公告)日:2017-03-08

    申请号:CN201610901262.4

    申请日:2016-10-17

    申请人: 广西大学

    IPC分类号: C12N5/071

    摘要: 本发明公开了一种过氧化氢诱导的猪脾细胞氧化应激模型的建立方法,采用过氧化氢体外诱导处理猪脾细胞,过氧化氢浓度为50-450μM。与现有技术相比,本发明首次使用猪脾细胞作为过氧化氢诱导氧化应激模型的造模细胞,通过考察细胞死亡率和细胞内ROS水平确定了H2O2溶液的最佳使用浓度和细胞孵育时间,操作容易、成本较低,可帮助初次进行猪脾细胞制备和氧化应激模型的研究人员比较顺利的完成猪脾细胞的制备和氧化应激模型的建立。

    一种脾脏终隔细胞原代分离培养方法

    公开(公告)号:CN106244536A

    公开(公告)日:2016-12-21

    申请号:CN201610833378.9

    申请日:2016-09-20

    申请人: 新乡医学院

    IPC分类号: C12N5/078 C12N5/077

    摘要: 本发明属于动物细胞培养技术领域,涉及一种脾脏终隔细胞原代分离培养方法。步骤如下:脾脏样品的预处理;酶解样品,获得终隔细胞悬液;终隔细胞悬液的细胞接种,制备原代细胞;原代细胞的传代扩大培养,制备传代细胞;固定传代细胞,完成大鼠脾脏终隔细胞的原代分离培养。本发明针对脾脏组织的结构特点,采用0.1%胶原酶I、0.125%胰蛋白酶和0.002%I型脱氧核糖核酸酶,联合消化法分离培养脾脏中的TCs,该方法得到的细胞纯度高,活力好,且传代后细胞形态稳定,活力高,可广泛用于后续相关TCs形态和功能实验的有效开展。