一种海马药材基因组DNA提取方法

    公开(公告)号:CN107384913A

    公开(公告)日:2017-11-24

    申请号:CN201710788131.4

    申请日:2017-09-05

    IPC分类号: C12N15/10

    CPC分类号: C12N15/1003 C12Q2521/537

    摘要: 本发明一种海马药材基因组DNA提取方法,针对海马药材中表面杂质与真菌、螨虫等污染物多的特点,经本发明清洗液清洗后,有效去除表面的杂质和内部污染物;针对海马药材加工和储藏过程中导致基因组部分降解,DNA浓度低的特点,本发明对SDS提取法的步骤和配方进行了改良和优化,提高药材的裂解效果;裂解完成后,消化液进行抽提沉淀后取上清液加入预冷的异丙醇沉淀DNA,离心弃去液相,沉淀洗涤风干后用TE溶液充分溶解DNA,加入微量RNA酶去除样品中的RNA,获得海马基因组DNA。本发明解决了现有的提取技术获得的DNA质量不高的缺陷,并且避免了真菌和螨虫等对海马基因组的污染,可用于后续的PCR扩增和分子鉴定。

    一种分子SSR标记技术
    6.
    发明公开

    公开(公告)号:CN107058553A

    公开(公告)日:2017-08-18

    申请号:CN201710313764.X

    申请日:2017-05-05

    发明人: 李泽卿 喻超

    IPC分类号: C12Q1/68 C12N15/10

    摘要: 本发明公开了一种分子SSR标记技术,包括如下步骤:对所需标记的分子进行基因组DNA提取,且基因组DNA提取在35‑50摄氏度的密封条件下进行,选取分子标记所需要的多种引物,在45‑60摄氏度的条件下滴加催化剂,且边滴加边对其进行搅拌,从而分子标记所需的引物进行合成,将处理后的基因组DNA提取置于35‑50摄氏度的条件下,将上述处理完成的PCR扩增产物进行纯化,然后用65‑75%乙醇洗涤一次后,放干后再用无菌水或者TE溶解,然后将PCR扩增产物片段扫描准备,PCR扩增产物上机基因扫描。该能够改变传统的分子标记方法,加快分子标记的进步进程,推动科技成果的转化,促进种子创新工程的发展。

    一种提取猪蛔虫受精卵基因组DNA的方法

    公开(公告)号:CN106434629A

    公开(公告)日:2017-02-22

    申请号:CN201610850427.X

    申请日:2016-09-27

    申请人: 南昌大学

    IPC分类号: C12N15/10

    CPC分类号: C12N15/1003 C12Q2521/537

    摘要: 一种高效提取猪蛔虫受精卵基因组DNA的方法,包括蒸馏水洗虫卵、预处理虫卵、蛋白酶K消化、除杂质、高纯水洗脱DNA等五个步骤。本发明提取的猪蛔虫受精卵基因组DNA,质量稳定,能有效地进行下游PCR扩增,为猪蛔虫的分子流行病学、遗传多样性、遗传结构、系统发生学、谱系地理学研究提供重要的技术方法,该发明对猪蛔虫病的分子诊断和防控也有重要意义。

    一种鲍曼不动杆菌检测试剂盒及检测方法

    公开(公告)号:CN105624292A

    公开(公告)日:2016-06-01

    申请号:CN201610043809.1

    申请日:2016-01-22

    申请人: 江苏大学

    摘要: 本发明属于临床检验诊断学领域,涉及一种鲍曼不动杆菌快速检测试剂盒及检测方法;本发明还提供一种鲍曼不动杆菌检测试剂盒,所述试剂盒包括:DNA抽提试剂、2对多重PCR扩增引物、2×PCR Mix预混液、灭菌双蒸水;所述检测方法包括:痰液标本和血液标本鲍曼不动杆菌DNA提取, 根据鲍曼不动杆菌OXA24和OXA51基因序列设计PCR引物,采用多重PCR方法检测待测样本中多重耐药鲍曼不动杆菌和敏感菌株;本发明建立了一套简便、快速、可行的多重耐药鲍曼不动杆菌诊断方法,可以实现短时间内(4~6小时)对多重耐药鲍曼不动杆菌检测,为临床治疗争取时间,并遏制多重耐药的发生。