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公开(公告)号:CN109097469A
公开(公告)日:2018-12-28
申请号:CN201810941852.9
申请日:2018-08-17
申请人: 上海迈景纳米科技有限公司
IPC分类号: C12Q1/6886 , C12Q1/6858
CPC分类号: C12Q1/6886 , C12Q1/6858 , C12Q2600/156 , C12Q2600/16 , C12Q2531/113 , C12Q2537/143 , C12Q2535/137 , C12Q2565/519
摘要: 本发明公开了一种基于固相杂交技术的EGFR突变基因检测方法,涉及EGFR突变基因的检测。本发明提出了一种基于固相杂交技术的EGFR突变基因检测方法,该方法先将多种针对EGFR突变基因的特异性检测探针固定在固相载体上,然后通过modified ARMS-PCR扩增待检样品中含突变基因的片段,最后将扩增后的片段与固相载体上的探针进行杂交,从而达到判检样品中是否含有特定EGFR突变位点的目的。本发明同时提出一种利用该方法诊断EGFR突变基因的试剂盒。本发明具有灵敏度高、准确性高、特异性强,能同时检测出多种EGFR突变基因的优点。
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公开(公告)号:CN108977532A
公开(公告)日:2018-12-11
申请号:CN201811034966.1
申请日:2018-09-06
申请人: 武汉康录生物技术股份有限公司
IPC分类号: C12Q1/6883 , C12Q1/686 , C12N15/11
CPC分类号: C12Q1/6883 , C12Q1/686 , C12Q2600/156 , C12Q2535/137 , C12Q2537/143 , C12Q2531/113
摘要: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种人类MTHFR基因多态性检测试剂盒及其制备方法和应用。所述试剂盒由分别用于扩增MTHFR基因rs1801133、MTHFR基因rs1801131的2个位点的PCR预混反应液、阳性对照品及阴性对照品组成,所述PCR预混反应液包含用于扩增各位点的特异性引物序列组、探针组和PCR反应液,所述特异性引物组由普通的外引物和带荧光标签的特异性的ARMs引物组成。本发明所述试剂盒用于检测人类MTHFR基因多态性具有灵敏度高、特异性高、操作简便、结果可靠等优点,且能在1小时内完成检测,并且结果判读简单客观。
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公开(公告)号:CN107904294A
公开(公告)日:2018-04-13
申请号:CN201711459476.1
申请日:2017-12-28
申请人: 广州和实生物技术有限公司
IPC分类号: C12Q1/6858 , C12Q1/70 , C12N15/11
CPC分类号: C12Q1/6858 , C12Q1/706 , C12Q2535/137 , C12Q2525/117
摘要: 本发明公开了一种用于检测基因突变的凸环-ARMS引物及其应用方法,该凸环-ARMS引物的特点在于,在ARMS引物上增加一个凸环结构,从而形成凸环-ARMS引物。因凸环结构与模板结合力较弱,只有当其3’端区域(即基因突变点所在区域)与模板完全互补配对时,引物才可以延伸,即完成PCR扩增。本引物可应用于荧光PCR技术。本检测方法的应用降低了探针设计的难度,可以有效检测生物样本中的基因突变,且检测的准确性、灵敏度与特异性均更高。
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公开(公告)号:CN107841537A
公开(公告)日:2018-03-27
申请号:CN201710899417.X
申请日:2017-09-28
申请人: 苏州旷远生物分子技术有限公司
IPC分类号: C12Q1/6858 , C12N15/11
CPC分类号: C12Q1/6858 , C12Q2537/143 , C12Q2563/107 , C12Q2535/137
摘要: 本发明提供用于检测叶酸代谢途径MTHFR基因c.677与c.1298和MTRR基因c.66三个位点核苷酸多态性的全预混多重引物特异性PCR检测试剂盒和方法,根据“等位基因特异PCR”原理,设计多重引物特异性PCR,在实时荧光定量PCR技术平台上实现两管反应同时检测叶酸代谢途径MTHFR基因c.677与c.1298和MTRR基因c.66三个位点的核苷酸类型。并采用修饰的Taq DNA聚合酶及在反应体系中加入二聚糖PCR保护剂,增加反应体系的稳定性,实现全预混检测体系保存的长期稳定性。
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公开(公告)号:CN107312832A
公开(公告)日:2017-11-03
申请号:CN201710396710.4
申请日:2017-05-31
申请人: 上海芯超生物科技有限公司
IPC分类号: C12Q1/68
CPC分类号: C12Q1/6858 , C12Q2535/137 , C12Q2545/101 , C12Q2561/101
摘要: 本发明涉及一种试剂盒、试剂盒的使用方法、试剂盒的用途,其中试剂盒中:23s rRNA PCR反应液A包括通用引物对、23S rRNA基因特异性探针、内标引物对、内标特异性探针;23s rRNA PCR反应液B包括23S rRNA基因A2142G/C突变检测特异性引物对、23S rRNA基因特异性探针、内标引物对、内标特异性探针;23s rRNA PCR反应液C包括23S rRNA基因A2143G突变检测特异性引物对、23S rRNA基因特异性探针、内标引物对、内标特异性探针,本发明运用ARMS引物区分野生型和突变型基因,具有灵敏度高、特异性强的优点,检测结果准确性高,适用于胃黏膜组织样本类型,具有检测准确,灵敏度高、特异性强、简便快速的优点,具有良好的临床标本检测能力。
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公开(公告)号:CN106520971A
公开(公告)日:2017-03-22
申请号:CN201611052798.X
申请日:2016-11-25
申请人: 武汉海吉力生物科技有限公司
CPC分类号: C12Q1/6883 , C12Q1/6858 , C12Q2600/106 , C12Q2600/156 , C12Q2531/113 , C12Q2535/137 , C12Q2561/101
摘要: 本发明公开了用于快速检测HLA-B*1502等位基因的核酸、试剂盒及方法,该核酸包括检测引物和检测探针,其中,所述检测引物包括正向引物1、正向引物2和反向引物,所述正向引物1的核苷酸序列如SEQ ID No.1,所述正向引物2的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示,所述反向引物的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示,所述检测探针的核苷酸序列如SEQ ID No.4所示。本发明提供的实时荧光定量PCR快速检测HLA-B*1502等位基因的检测试剂盒和方法,使用方便,操作简便,自动化程度高,大大简化了操作过程,并减少了在操作过程的污染,检测效果好,具有高灵敏度、高特异性、高准确度、高精确度的特点。
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公开(公告)号:CN105567837A
公开(公告)日:2016-05-11
申请号:CN201610071654.2
申请日:2016-02-02
申请人: 河南中医学院第一附属医院
CPC分类号: C12Q1/6886 , C12Q1/6858 , C12Q2600/106 , C12Q2600/156 , C12Q2525/117 , C12Q2535/137 , C12Q2563/107
摘要: 本发明涉及一种检测K-ras基因突变的引物和探针体系,包括SEQ ID NO:1~13所示的核苷酸序列;还公开了其检测方法,包括配置50μL荧光PCR反应体系、进行荧光PCR扩增程序、结果判定等步骤。本发明可同时检测KRAS基因7种突变;最多可以检测1~10拷贝的基因突变;特异性强,在10~30ng 野生型DNA背景下不受干扰;检测性能突出,在10ng DNA背景下,可以检测出1~10拷贝的基因突变。
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公开(公告)号:CN105441577A
公开(公告)日:2016-03-30
申请号:CN201610021335.0
申请日:2016-01-13
申请人: 武汉海吉力生物科技有限公司
CPC分类号: C12Q1/6886 , C12Q1/6858 , C12Q2600/106 , C12Q2600/156 , C12Q2531/113 , C12Q2535/137 , C12Q2537/163 , C12Q2561/101 , C12Q2561/113
摘要: 本发明公开了用于检测人类CKIT基因7种突变的探针、引物及试剂盒,其中CM1~CM7的7组引物和探针,每组中突变上游引物能与CKIT基因保守序列结合,突变下游ARMS引物能与其相应的突变序列特异性结合,扩增突变序列;检测探针能够与扩增片段结合,阻断探针能与突变位点对应的野生型序列特异性结合,抑制野生型非特异性扩增。本发明采用特异性突变引物和探针阻断技术,可准确检测CKIT基因7种突变类型;建立的实时荧光PCR扩增反应体系的试剂盒方便对CKIT基因突变的快速检测,操作简单,结果易读;检测方法灵敏度高,50拷贝突变能稳定检出;特异性好,20ng野生型基因组DNA无非特异性扩增,检测能力高达1%。
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公开(公告)号:CN105238871A
公开(公告)日:2016-01-13
申请号:CN201510781712.6
申请日:2015-11-13
申请人: 北京泛生子基因科技有限公司
IPC分类号: C12Q1/68
CPC分类号: C12Q1/6858 , C12Q1/6851 , C12Q2531/113 , C12Q2535/137 , C12Q2561/101 , C12Q2561/113 , C12Q2545/101
摘要: 本发明公开了一种检测人IDH1基因突变的探针法及其试剂盒。该方法包括以下步骤:(1)在IDH1 R132H PCR反应混合液中加入人基因组DNA,形成R132H反应体系并进行荧光定量PCR扩增,其中IDH1 R132H PCR反应混合液中包括溶解在PCR预混液中的:IDH1 R132H上游引物、IDH1 R132H下游引物、IDH1 R132H探针、内参上游引物、内参下游引物和内参探针;(2)结果判断:根据PCR扩增的突变Ct值进行分析。该试剂盒包括:IDH1 R132H PCR反应混合液。该探针法和试剂盒为临床上提供了一种速度快、灵敏度高、特异性强的IDH1基因突变检测体系。
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公开(公告)号:CN105063177A
公开(公告)日:2015-11-18
申请号:CN201510245213.5
申请日:2015-05-14
申请人: 广州和实生物技术有限公司
IPC分类号: C12Q1/68
CPC分类号: C12Q1/6858 , C12Q1/6886 , C12Q2600/156 , C12Q2531/113 , C12Q2535/137 , C12Q2547/101
摘要: 本发明公开了多点突变单管快速检测方法及试剂盒。多点突变单管快速检测方法,包括:1)设计ARMS引物及对应的下游引物、中介连接引物、通用荧光探针及其淬灭探针;2)将ARMS引物及对应的下游引物、中介连接引物、通用荧光探针及其淬灭探针与热启动快速Taq酶系统混合,扩增;3)检测反应体系的荧光变化,确定是否存在点突变。本发明的发明,操作简单,可以定性检测出多点突变的存在。本发明的检测方法中使用的引物设计难度低,大幅降低了引物合成的成本;克服了现有ARMS技术的局限性,大大提高了其检测通量;实现了1管反应取代了之前的多管检测,节省人力物力。
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