具有探针竞争物的扩增分析

    公开(公告)号:CN107614701A

    公开(公告)日:2018-01-19

    申请号:CN201680031658.6

    申请日:2016-06-13

    IPC分类号: C12Q1/6827 C12P19/34

    摘要: 用于检测等位形式目标的方法和组合物。在示例性方法中,可形成多个分解部分,其都包含目标的至少一种第一等位形式和第二等位形式目标。每个分解部分可包含(i)能够特异性结合至目标的每一种第一和第二等位形式的相同探针和(ii)配置成选择性结合相对于第一等位形式而言的第二等位形式并配置成阻断探针与第二等位形式的结合的竞争物。该第一等位形式目标在各分解部分中可以扩增。当该些分解部分包含标签时,可从探针的标签检测到信号。基于该信号可确定对于至少一种第一等位形式是阳性(或阴性)的分解部分的数量。

    一种基于数字PCR平台的miRNA检测质量控制试剂盒及其使用方法

    公开(公告)号:CN106399501A

    公开(公告)日:2017-02-15

    申请号:CN201610831646.3

    申请日:2016-09-19

    发明人: 魏亮 卢俊 杨洪吉

    IPC分类号: C12Q1/68

    摘要: 本发明公开了一种基于数字PCR平台的miRNA检测质量控制试剂盒,它包括人工合成的miRNA、反转录引物、检测上引物、检测下引物和DEPC水。本发明还公开了该试剂盒的使用方法。本发明试剂盒提供的人工合成miRNA序列在人体中绝对不存在类似序列,避免了可能出现的PCR假阳性扩增,不但可作为数字PCR检测的外源性内参miRNA用于质量控制,且由于miRNA分子自身结构稳定、不易降解的特点有利于其长期稳定保存。此外,本试剂盒提供的反转录茎环引物和检测引物在数字PCR平台检测时均验证可得到稳定可靠的检测结果。本发明试剂盒的使用方法操作简单、使用方便,适用于大批量检测。

    单管中多重靶核酸的实时荧光PCR检测方法及其试剂盒

    公开(公告)号:CN105624311A

    公开(公告)日:2016-06-01

    申请号:CN201610129787.0

    申请日:2016-03-08

    IPC分类号: C12Q1/68

    摘要: 本发明实施例公开了一种单管中多重靶核酸的实时荧光PCR检测方法及其试剂盒,其包括在所述单个PCR反应管中混合样本核酸,Tth DNA聚合酶,H-Taq DNA聚合酶,Mn(OAc)2,dNTPs,内标,HBV-DNA、HCV-RNA以及HIV-1-RNA的上下游引物和探针,以及内标上下游引物和探针,针对所述的各种探针标记有荧光基团和荧光淬灭基团,而且各种探针标记的荧光基团的检测波长不同;所述内标是竞争性内标,其与HIV共用所述HIV的上下游引物。本发明的能够检测HIV、HCV、HBV三种常见血液传染病毒的各种基因型别,同时降低成本,提高仪器使用率,满足血液中心检测要求。

    IFN-γ检测引物、试剂盒和半定量检测方法

    公开(公告)号:CN105039549A

    公开(公告)日:2015-11-11

    申请号:CN201510450656.8

    申请日:2015-07-28

    发明人: 曾宪卓 鲁菲

    IPC分类号: C12Q1/68 C12N15/11

    摘要: 本发明提供了一种IFN-γ检测引物,包括具有序列表SEQ.ID.No.1碱基序列的引物P1、具有序列表SEQ.ID.No.2碱基序列的引物P2。本发明的上述引物基于基因表达过程中编码IFN-γ的mRNA合成远先于分泌的IFN-γ蛋白产物,且蛋白质的表达量的多少与对应编码的mRNA的量成线性正比的关系;通过RT-PCR方式扩增对应编码的mRNA,再通过mRNA的量即可得到对应IFN-γ蛋白产物的量;其检测的不是IFN-γ分泌、吸附、消耗和降解后的净含量,而是IFN-γ产生过程中基因转录、翻译及翻译后调控机制的实时定点水平;其能更真实和准确反应细胞或组织内实时的IFN-γ表达水平。在上述引物的基础上,本发明还进一步提出包括上述IFN-γ检测引物检测试剂盒、以及利用上述引物进行半定量检测的方法。

    目标碱基序列的识别方法

    公开(公告)号:CN102844446A

    公开(公告)日:2012-12-26

    申请号:CN201180016090.8

    申请日:2011-03-25

    摘要: 本发明提供一种伴随竞争性杂交的碱基序列的识别方法,该方法在保持识别碱基序列差异的精度的同时,可在与现有方法相比非常短的时间内识别具有目标碱基序列的核酸。本发明的目标碱基序列的识别方法,具有下述工序:热变性工序,其将试样双链核酸和含有与目标碱基序列相同的碱基序列的标准双链核酸在单反应液内进行热变性处理;降温工序,其在上述热变性工序之后,通过使上述反应液的温度降低,从而在上述试样双链核酸和上述标准双链核酸中进行竞争性杂交;测定工序,其对由构成上述标准双链核酸的核酸链和构成上述试样双链核酸的核酸链形成的双链核酸进行测定;和识别工序,其基于通过上述测定工序得到的测定结果,识别上述标准双链核酸与上述试样双链核酸的同一性。并且,上述降温工序在阳离子性梳型聚合物的存在下进行。