一种检测VHL基因突变的固相PCR试剂盒

    公开(公告)号:CN107385092A

    公开(公告)日:2017-11-24

    申请号:CN201710802853.0

    申请日:2017-09-08

    IPC分类号: C12Q1/68

    摘要: 本发明公开了本发明公开了一种检测VHL基因突变的固相PCR试剂盒,包括由PCR反应缓冲液、dNTPs、引物组、热启动DNA聚合酶构成,所述的PCR反应缓冲液由Buffer、Mg+构成,所述的引物组的浓度为100nM-1000nM,所述的引物组的浓度为400nM-600nM,VHL基因突变检测引物组中,所述的引物组由以下2对引物组成:用于检测VHL-1外显子突变引物对的上下游引物分别为SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2;用于检测VHL-2外显子突变引物对的上下游引物分别为SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4;用于检测VHL-3外显子突变引物对的上下游引物分别为SEQ ID NO.5、SEQ ID NO.6。本发明具有操作方便、检测效率较高等优点。

    一种应用于核酸扩增实时电化学pH检测的反应体系和检测方法

    公开(公告)号:CN103923998A

    公开(公告)日:2014-07-16

    申请号:CN201410165263.8

    申请日:2014-04-23

    申请人: 浙江大学

    发明人: 张芳 俞永华 吴坚

    IPC分类号: C12Q1/68

    摘要: 本发明提供了一种应用于核酸扩增实时电化学pH检测的反应体系及检测方法。所述反应体系为恒温扩增反应体系,含有引物、反应液、DNA聚合酶、和待检DNA;所述反应体系中的反应液含有TritonX-100、dNTP、甜菜碱、Mg2+、K+与NH4+,反应体系的反应液中有额外添加的OH-。本发明具有以下特点,本发明是利用对pH敏感的电化学传感器对核酸扩增进行实时检测:对于阴性样本,扩增反应过程中由于不产生质子因此反应前后pH无变化,而对于阳性样本,随扩增反应进行,氢离子作为副产物不断产生,因此反应前后pH发生变化;该反应液能够替代普通核酸扩增的反应缓冲液,不仅能保证核酸扩增正常进行,且对扩增过程中氢离子的产生足够敏感,产生明显的pH变化。