一种生产乳糖-N-四糖的大肠杆菌及基于其的双菌耦合发酵方法

    公开(公告)号:CN118931810A

    公开(公告)日:2024-11-12

    申请号:CN202410461109.9

    申请日:2024-04-17

    申请人: 江南大学

    摘要: 本发明公开了一种生产乳糖‑N‑四糖的大肠杆菌及基于其的双菌耦合发酵方法。本发明首先在大肠杆菌中构建了LNT生物合成途径;然后对双质粒系统进行组合优化,构建了四株工程菌,并筛选出EP3菌株(含有galT1‑SP ase和galE‑Cvβ3GalT表达框)与酵母耦合发酵产LNT能力最优,可产生25.2g/L LNT,其摩尔转化率(mol/mol LNT II)为71.22%。接着对生产体系进行优化,比较UTP和UMP作为辅因子对LNT合成的影响,在仅添加20mM UMP作为辅因子时,即可生成29.4g/L LNT,其摩尔转化率(mol/mo l LNT II)为83.09%。最后补料分批培养EP3菌株,经全细胞催化后产生39.6g LNT。本发明为高效廉价生产LNT提供了一种新的策略。

    一种产人白蛋白的重组工程菌及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN118895293A

    公开(公告)日:2024-11-05

    申请号:CN202411388675.8

    申请日:2024-10-08

    摘要: 本申请涉及一种产人白蛋白的重组工程菌及其构建方法和应用,属于基因工程技术领域。本申请方案中通过密码子优化人白蛋白基因序列,构建高效表达的重组人白蛋白毕赤酵母菌株,进一步过表达PDI和SSB2,并且针对重组质粒中过表达蛋白的基因序列进行密码子优化,转化至重组人白蛋白毕赤酵母菌株后,成功获得了高表达人白蛋白的毕赤酵母基因工程菌株,且该菌株经高密度发酵实现了人白蛋白的高效表达,产量可达38.6g/L,为重组人白蛋白的产业化应用奠定基础,具有重要的工业应用前景和经济价值。

    生产天然α-生育酚的光合细菌重组菌株及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN118834813A

    公开(公告)日:2024-10-25

    申请号:CN202410901585.8

    申请日:2024-07-05

    申请人: 厦门大学

    摘要: 本发明涉及一种生产天然α‑生育酚的光合细菌重组菌株及其构建方法和应用,光合细菌重组菌株含有来源于自恶臭假单胞菌的对羟基苯基丙酮酸双氧化酶HPPD、来源于集胞藻的尿黑酸叶绿基转移酶HPT和来源于拟南芥的生育酚环化酶VTE1。该光合细菌重组菌株通过整合异源表达三个酶,对羟苯基丙酮酸双加氧酶HPPD、尿黑酸叶绿基转移酶HPT和生育酚环化酶VTE1,可实现天然α‑生育酚的异源生产,首次报道了α‑生育酚在除植物、蓝藻等以外的光合细菌中的直接生产问题,具有广阔的工业化应用前景。

    一种差向异构酶突变体及其应用
    10.
    发明公开

    公开(公告)号:CN118792293A

    公开(公告)日:2024-10-18

    申请号:CN202410960630.7

    申请日:2024-07-17

    摘要: 本发明提供了一种差向异构酶突变体及其应用,属于酶工程技术领域,一种D‑阿洛酮糖‑3‑差向异构酶突变体I33L/S213G/N214D,是在野生型D‑阿洛酮糖‑3‑差向异构酶氨基酸序列上进行突变,将氨基酸序列中第33位的异亮氨酸突变为亮氨酸,第213位的丝氨酸突变为甘氨酸,第214位的天冬酰胺突变为天冬氨酸,所述野生型D‑阿洛酮糖‑3‑差向异构酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示;所述突变体在生产D‑阿洛酮糖中的应用;本发明提供的突变体与原始酶DPEase相比,D‑阿洛酮糖转化率提高了7.5%,转化能力显著提高,最适催化温度由55℃提高至65℃,在酸性条件下的耐受性提高了5%。