一种重组蛋白酶K的冻干工艺

    公开(公告)号:CN114277019B

    公开(公告)日:2023-10-24

    申请号:CN202210054641.X

    申请日:2022-01-18

    发明人: 罗强 梁良 丁海平

    IPC分类号: C12N9/60 C12N9/96

    摘要: 本发明提供了一种重组蛋白酶K的冻干工艺,包括以下步骤:S1、对蛋白酶k溶液进行纯化,并对蛋白酶k溶液进行浓缩;S2、加入等比例的蛋白酶冻干保存液;S3、进行冻干程序:首先加入蛋白酶溶液进行预冻,预冻后在真空状态在进行冻干,所述冻干的温度曲线为:在‑25~‑15℃保持0.5‑1.5h,在‑15~‑5℃保持5‑7h,在‑5~5℃保持3‑5h,在0‑10℃保持1~3h,在5~15℃保持1‑3h,在10‑20℃保持7~9h;结束后冻干完成。本发明提供的重组蛋白酶K的冻干工艺操作简单、成本低廉、冻干时间短,产品易溶解且保质期长。

    一种耐盐的RPK突变体及其应用
    5.
    发明公开

    公开(公告)号:CN113913413A

    公开(公告)日:2022-01-11

    申请号:CN202110918233.X

    申请日:2021-08-11

    发明人: 刘晓 赵致

    IPC分类号: C12N9/60 C12N15/57 C12P21/06

    摘要: 本发明提供了一种耐盐的RPK突变体及其应用。本发明人发现蛋白酶K的一些位点与其耐盐性及稳定性密切相关,在此基础上开发了一种蛋白酶K突变体,与野生型相比,所述突变体的耐盐性及稳定性更好。本发明也提供了优化的表达重组蛋白酶K突变体的方法,其产量高、生产成本低、适合规模化生产。

    龙脑樟单萜合酶CcTPS1及其相关生物材料与应用

    公开(公告)号:CN112409492A

    公开(公告)日:2021-02-26

    申请号:CN201910776208.5

    申请日:2019-08-21

    摘要: 本发明公开了一种龙脑樟单萜合酶CcTPS1及其相关生物材料与应用。本发明首先公开了如下任一所示蛋白质:A1)由序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质;A2)序列2所示的蛋白质的N端或/和C端连接蛋白标签得到的融合蛋白;A3)将序列2所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的与A1)所示的蛋白质具有90%以上的同一性且功能相同的蛋白质。本发明进一步公开了上述蛋白质相关生物材料及其应用。本发明首次从龙脑樟中得到单萜类成分合成关键酶基因,并证明其蛋白CcTPS1能够催化GPP形成右旋龙脑,对于调节和生产植物单萜类化合物及培育高品质的龙脑樟树具有重要的理论及实际意义。

    制备蛋白酶的方法
    10.
    发明公开

    公开(公告)号:CN106636043A

    公开(公告)日:2017-05-10

    申请号:CN201611230292.3

    申请日:2016-12-27

    发明人: 王俊 张利萍 冯甲

    IPC分类号: C12N9/56 C12N9/60

    摘要: 本发明涉及一种制备蛋白酶的方法,在微生物生长的对数期至稳定期的特定时间段内,持续向培养基中加入蛋白酶抑制剂,蛋白酶抑制剂能够有效抑制蛋白酶的自降解。并且发明人意外发现蛋白酶抑制剂在微生物生长的特定时间段内持续加入培养基中,并不会抑制发酵微生物的生长,极大的提升蛋白酶的产量。