公开(公告)号：US06191267B1

公开(公告)日：2001-02-20

申请号：US09586935

申请日：2000-06-02

申请人： Huimin Kong ,  Lauren S. Higgins ,  Michael Dalton ,  Rebecca B. Kucera ,  Ira Schildkraut

发明人： Huimin Kong ,  Lauren S. Higgins ,  Michael Dalton ,  Rebecca B. Kucera ,  Ira Schildkraut

IPC分类号： C07H2104

CPC分类号： C12N9/22 ,  C12P21/02

摘要： The present invention relates to recombinant DNA which encodes a novel nicking endonuclease, N.BstNBI, and the production of N.BstNBI restriction endonuclease from the recombinant DNA utilizing PleI modification methylase. Related expression vectors, as well as the application of N.BstNBI in non-thio strand displacement amplification, is disclosed also.

摘要翻译： 本发明涉及编码新的切口内切核酸酶，N.BstNBI，以及利用PleI修饰甲基化酶从重组DNA生产N.BstNBI限制性内切核酸酶的重组DNA。 相关表达载体以及N.BstNBI在非硫链置换扩增中的应用也被公开。

公开(公告)号：US5210036A

公开(公告)日：1993-05-11

申请号：US513994

申请日：1990-04-26

申请人： Donald G. Comb ,  Rebecca B. Kucera

发明人： Donald G. Comb ,  Rebecca B. Kucera

IPC分类号： C12N9/12 ,  C12N15/54

CPC分类号： C12N9/1252

摘要： There is provided an extremely thermostable enzyme obtainable from Thermococcus litoralis. The thermostable enzyme has a molecular weight of about 90,000-95,000 daltons, a half-life of about 60 minutes at 100.degree. C. in the absence of stabilizer, and a half-life of about 95 minutes at 100.degree. C. in the presence of stabilizer, such as octoxynol (TRITON X-100) or bovine serum albumin. The thermostable enzyme possesses a 3'-5' proofreading exonuclease activity. The thermostable enzyme may be native or recombinant and may be used for second-strand cDNA synthesis in cDNA cloning, DNA sequencing, and DNA amplification.

摘要翻译： 提供了可从Thermococcus litoralis获得的极热稳定的酶。 热稳定酶的分子量约为90,000-95,000道尔顿，在不存在稳定剂的情况下，在100℃下的半衰期约为60分钟，而在100℃存在时，半衰期约为95分钟 的稳定剂如辛苯醇（TRITON X-100）或牛血清白蛋白。 耐热酶具有3'-5'校对核酸外切酶活性。 耐热酶可以是天然的或重组的，并且可以用于cDNA克隆，DNA测序和DNA扩增中的第二链cDNA合成。

公开(公告)号：US06846658B1

公开(公告)日：2005-01-25

申请号：US09689343

申请日：2000-10-12

申请人： Romualdas Vaisvila ,  Richard D. Morgan ,  Rebecca B. Kucera ,  Toby E. Claus ,  Elisabeth A. Raleigh

发明人： Romualdas Vaisvila ,  Richard D. Morgan ,  Rebecca B. Kucera ,  Toby E. Claus ,  Elisabeth A. Raleigh

IPC分类号： C12N15/09 ,  C12N1/15 ,  C12N1/19 ,  C12N1/21 ,  C12N5/10 ,  C12N9/10 ,  C12N9/22 ,  C12N15/54 ,  C12N15/55 ,  C12R1/265 ,  C12P21/00 ,  C12N15/70

CPC分类号： C12N9/1007 ,  C12N9/22

摘要： A method for cloning restriction-modification system is provided whereby the target modification methylase is produced and confers full protection during all growth phases in which the cognate restriction enzyme is present. The method is employed in the cloning of the MseI restriction-modification system.

摘要翻译： 提供克隆限制性修饰体系的方法，由此产生目标修饰甲基化酶，并在存在相关限制性内切酶的所有生长期赋予完全保护。 该方法用于克隆MseI限制性修饰系统。