公开(公告)号：US20100151541A1

公开(公告)日：2010-06-17

申请号：US12159547

申请日：2006-12-08

申请人： Gerhard Steinbauer ,  Micheal Stanek ,  Peter Pojarliev ,  Wolfgang Skranc ,  Helmut Schwab ,  Marcel Wubbolts ,  Joannes Kierkels ,  Harald Pichler ,  Manuela Hermann ,  Christoph Zenzmaier

发明人： Gerhard Steinbauer ,  Micheal Stanek ,  Peter Pojarliev ,  Wolfgang Skranc ,  Helmut Schwab ,  Marcel Wubbolts ,  Joannes Kierkels ,  Harald Pichler ,  Manuela Hermann ,  Christoph Zenzmaier

IPC分类号： C12P7/62 ,  C12N9/16 ,  C07H21/04

CPC分类号： C12N9/18 ,  C12P7/02 ,  C12P41/005

摘要： Polypeptide and recombinant protein having esterase activity which exhibit the amino acid sequence SEQ. ID. No. 1 and the use thereof.

摘要翻译： 多肽和具有酯酶活性的重组蛋白质，其表现出氨基酸序列SEQ。 ID。 1及其用途。

公开(公告)号：US08642312B2

公开(公告)日：2014-02-04

申请号：US13417734

申请日：2012-03-12

申请人： Gerhard Steinbauer ,  Micheal Stanek ,  Peter Pojarliev ,  Wolfgang Skranc ,  Helmut Schwab ,  Joannes Kierkels ,  Marcel Wubbolts ,  Harald Pichler ,  Manuela Hermann ,  Christoph Zenzmaier

发明人： Gerhard Steinbauer ,  Micheal Stanek ,  Peter Pojarliev ,  Wolfgang Skranc ,  Helmut Schwab ,  Joannes Kierkels ,  Marcel Wubbolts ,  Harald Pichler ,  Manuela Hermann ,  Christoph Zenzmaier

IPC分类号： C12N9/18

CPC分类号： C12N9/18 ,  C12P7/02 ,  C12P41/005

摘要： Polypeptide and recombinant protein having esterase activity which exhibit the amino acid sequence SEQ. ID. No. 1 and the use thereof.

摘要翻译： 多肽和具有酯酶活性的重组蛋白质，其表现出氨基酸序列SEQ。 ID。 1及其用途。

公开(公告)号：US08158393B2

公开(公告)日：2012-04-17

申请号：US12159547

申请日：2006-12-08

申请人： Gerhard Steinbauer ,  Micheal Stanek ,  Peter Pojarliev ,  Wolfgang Skranc ,  Helmut Schwab ,  Marcel Wubbolts ,  Joannes Kierkels ,  Harald Pichler ,  Manuela Hermann ,  Christoph Zenzmaier

发明人： Gerhard Steinbauer ,  Micheal Stanek ,  Peter Pojarliev ,  Wolfgang Skranc ,  Helmut Schwab ,  Marcel Wubbolts ,  Joannes Kierkels ,  Harald Pichler ,  Manuela Hermann ,  Christoph Zenzmaier

IPC分类号： C12P7/62 ,  C12N9/16

CPC分类号： C12N9/18 ,  C12P7/02 ,  C12P41/005

摘要： Method of resolving stereoselectively racemic 2-alkyl-5-halopent-4-ene-carboxylic esters of the formula (I) in which R is a C1-C6-alkyl radical, R1 is C1-C4-alkyl and X is chlorine, bromine or iodine, by contacting a racemic ester of formula (I) with a polypeptide or recombinant protein having esterase activity and exhibiting an amino acid sequence that is at least 98% identical to the amino acid sequence of SEQ. ID. No. 1.

摘要翻译： 拆分式（I）的立体选择性外消旋的2-烷基-5-卤代-4-烯 - 羧酸酯的方法，其中R是C 1 -C 6 - 烷基，R 1是C 1 -C 4 - 烷基，X是氯，溴 或碘，通过使式（I）的外消旋酯与具有酯酶活性的多肽或重组蛋白质接触，并显示与SEQ ID NO：1的氨基酸序列至少98％相同的氨基酸序列。 ID。 1号

公开(公告)号：US20120220014A1

公开(公告)日：2012-08-30

申请号：US13417734

申请日：2012-03-12

申请人： Gerhard Steinbauer ,  Michael Stanek ,  Peter Pojarliev ,  Wolfgang Skranc ,  Helmut Schwab ,  Joannes Kierkels ,  Marcel Wubbolts ,  Harald Pichler ,  Manuela Hermann ,  Christoph Zenzmaier

发明人： Gerhard Steinbauer ,  Michael Stanek ,  Peter Pojarliev ,  Wolfgang Skranc ,  Helmut Schwab ,  Joannes Kierkels ,  Marcel Wubbolts ,  Harald Pichler ,  Manuela Hermann ,  Christoph Zenzmaier

IPC分类号： C12N9/16 ,  C07H21/04

CPC分类号： C12N9/18 ,  C12P7/02 ,  C12P41/005

摘要： Polypeptide and recombinant protein having esterase activity which exhibit the amino acid sequence SEQ. ID. No. 1 and the use thereof.

摘要翻译： 多肽和具有酯酶活性的重组蛋白质，其表现出氨基酸序列SEQ。 ID。 1及其用途。

公开(公告)号：US06861243B2

公开(公告)日：2005-03-01

申请号：US10046232

申请日：2002-01-16

申请人： Helmut Schwab ,  Anton Glieder ,  Christoph Kratky ,  Ingrid Dreveny ,  Peter Pöchlauer ,  Wolfgang Skranc ,  Herbert Mayrhofer ,  Irma Wirth ,  Rudolf Neuhofer ,  Rodolfo Bona

发明人： Helmut Schwab ,  Anton Glieder ,  Christoph Kratky ,  Ingrid Dreveny ,  Peter Pöchlauer ,  Wolfgang Skranc ,  Herbert Mayrhofer ,  Irma Wirth ,  Rudolf Neuhofer ,  Rodolfo Bona

IPC分类号： C12N15/09 ,  C07K19/00 ,  C12N9/04 ,  C12N9/88 ,  C12N15/52 ,  C12N15/60 ,  C12P13/00

CPC分类号： C12P13/004 ,  C12N9/88 ,  C12N15/52

摘要： New genes containing a DNA sequence coding for hydroxynitrile lyase, which genes can be prepared via a primer combination based on the DNA sequence of the 5′-region of the mdl genes from Prunus serotina and from Prunus amygdalus and/or a primer 2 based on the 3′-region of the DNA sequences of one of the hydroxynitrile lyase isoenzymes from Prunus serotina or from Prunus amygdalus, subsequent amplification with a DNA polymerase using a DNA from organisms, containing genes coding for hydroxynitrile lyase, as templates and cloning, and also recombinant proteins which can be prepared in suitable host cells by heterologous expression of the DNA sequence of said HNL genes, and proteins and fusion proteins derived therefrom and use of said proteins for preparing (R)- or (S)-cyanohydrins.

摘要翻译： 含有编码羟基腈裂解酶的DNA序列的新基因，该基因可以通过引物组合基于来自黑麦白浆和来自杏仁核的md1基因的5'区域的DNA序列和/或基于 其中一个羟基腈裂解酶同工酶的一个来自山梨果皮或杏仁杏仁的DNA序列的3'区域，随后用含有编码羟基腈裂解酶的基因的来自生物体的DNA的DNA聚合酶扩增作为模板和克隆，以及 可以通过异源表达所述HNL基因的DNA序列以及从其衍生的蛋白质和融合蛋白质以及所述蛋白质用于制备（R） - 或（S） - 氰基氢化物的方法，在合适的宿主细胞中制备重组蛋白质。

公开(公告)号：US07202075B2

公开(公告)日：2007-04-10

申请号：US10940954

申请日：2004-09-15

申请人： Helmut Schwab ,  Anton Glieder ,  Christoph Kratky ,  Ingrid Dreveny ,  Rodolfo Bona ,  Peter Pöchlauer ,  Wolfgang Skranc ,  Herbert Mayrhofer ,  Irma Wirth ,  Rudolf Neuhofer

发明人： Helmut Schwab ,  Anton Glieder ,  Christoph Kratky ,  Ingrid Dreveny ,  Rodolfo Bona ,  Peter Pöchlauer ,  Wolfgang Skranc ,  Herbert Mayrhofer ,  Irma Wirth ,  Rudolf Neuhofer

IPC分类号： C12N9/88 ,  C12P1/00 ,  C07K1/00 ,  C07H21/04 ,  C07C253/00

CPC分类号： C12P13/004 ,  C12N9/88 ,  C12N15/52

摘要： New genes containing a DNA sequence coding for hydroxynitrile lyase, which genes can be prepared via a primer combination based on the DNA sequence of the 5′-region of the mdl genes from the Prunus serotina and from Prunus amygdalus and/or a primer 2 based on the 3′-region of the DNA sequences of one of the hydroxynitrile lyase isoenzymes from Prunus serotina or from Prunus amygdalus, subsequent amplification with a DNA polymerase using a DNA from organisms, containing genes coding for hydroxynitrile lyase, as templates and cloning, and also recombinant proteins which can be prepared in suitable host cells by heterologous expression of the DNA sequence of said HNL genes, and proteins and fusion proteins derived therefrom and use of said proteins for preparing (R)- or (S)-cyanohydrins.

摘要翻译： 含有编码羟基腈裂解酶的DNA序列的新基因，该基因可以通过引物组合基于来自白芥子和来自杏仁核的md1基因的5'区域的DNA序列和/或引物2 在其中一个羟基腈裂解酶同工酶的一个DNA序列的3'区域上，接着使用含有编码羟基腈裂解酶的基因的生物体的DNA作为模板和克隆，用DNA聚合酶扩增，以及 还可以通过异源表达所述HNL基因的DNA序列，以及从其衍生的蛋白质和融合蛋白质以及所述蛋白质用于制备（R） - 或（S） - 氰基醇的方法，在合适的宿主细胞中制备重组蛋白质。

公开(公告)号：US20050064552A1

公开(公告)日：2005-03-24

申请号：US10940954

申请日：2004-09-15

申请人： Helmut Schwab ,  Anton Glieder ,  Christoph Kratky ,  Ingrid Dreveny ,  Rodolfo Bona ,  Peter Pochlauer ,  Wolfgang Skranc ,  Herbert Mayrhofer ,  Irma Wirth ,  Rudolf Neuhofer

发明人： Helmut Schwab ,  Anton Glieder ,  Christoph Kratky ,  Ingrid Dreveny ,  Rodolfo Bona ,  Peter Pochlauer ,  Wolfgang Skranc ,  Herbert Mayrhofer ,  Irma Wirth ,  Rudolf Neuhofer

IPC分类号： C12N15/09 ,  C07K19/00 ,  C12N9/04 ,  C12N9/88 ,  C12N15/52 ,  C12N15/60 ,  C12P13/00 ,  C07H21/04 ,  C12N5/04 ,  C12N15/82

CPC分类号： C12P13/004 ,  C12N9/88 ,  C12N15/52

摘要： New genes containing a DNA sequence coding for hydroxynitrile lyase, which genes can be prepared via a primer combination based on the DNA sequence of the 5″-region of the mdl genes from the Prunus serotina and from Prunus amygdalus and/or a primer 2 based on the 3′-region of the DNA sequences of one of the hydroxynitrile lyase isoenzymes from Prunus serotina or from Prunus amygdalus, subsequent amplification with a DNA polymerase using a DNA from organisms, containing genes coding for hydroxynitrile lyase, as templates and cloning, and also recombinant proteins which can be prepared in suitable host cells by heterologous expression of the DNA sequence of said HNL genes, and proteins and fusion proteins derived therefrom and use of said proteins for preparing (R)- or (S)-cyanohydrins.

摘要翻译： 含有编码羟基腈裂解酶的DNA序列的新基因，该基因可以通过引物组合基于来自蜜梅属和来自杏仁核的md1基因的5'区域的DNA序列和/或引物2 基于来自山梨果皮或杏仁杏仁的羟基腈裂解酶同工酶之一的DNA序列的3'区域，随后使用含有编码羟基腈裂解酶的基因的生物体的DNA作为模板和克隆用DNA聚合酶进行扩增， 以及可以通过异源表达所述HNL基因的DNA序列以及从其衍生的蛋白质和融合蛋白质以及所述蛋白质用于制备（R） - 或（S） - 氰基醇的方法，在合适的宿主细胞中制备的重组蛋白质。

公开(公告)号：US08921080B2

公开(公告)日：2014-12-30

申请号：US13265178

申请日：2010-04-26

申请人： Martin Kietzmann ,  Harald Pichler ,  Helmut Schwab ,  Amin El-Heliebi ,  Christine Winkler ,  Andreas Braun

发明人： Martin Kietzmann ,  Harald Pichler ,  Helmut Schwab ,  Amin El-Heliebi ,  Christine Winkler ,  Andreas Braun

IPC分类号： C12N9/18

CPC分类号： C12N9/18

摘要： The invention relates to an isolated polypeptide having esterase activity comprising an amino acid sequence shown in any one of SEQ ID NO's 2, 4, 6, 8, 10, 12 or 14 or a homologue thereof, comprising an amino acid substitution or deletion of one or more amino acids as shown in said SEQ ID NO's and resulting in a mutant polypeptide having an increased concentration of the fraction of the mutant polypeptide being present as an active and soluble protein in cleared lysate of the mutant polypeptide expressed in E. coli relative to the concentration of the fraction of the polypeptide without the mutation being present as an active and soluble protein in cleared lysate of the polypeptide without the one or more deletion or substitution expressed in E. coli under the same conditions. The invention also relates to nucleic acid encoding the polypeptides according to the invention, and the use of the polypeptides.

摘要翻译： 本发明涉及具有酯酶活性的分离多肽，其包含SEQ ID NO：2,4,6,8,10,12或14中任一项所示的氨基酸序列或其同源物，其包含氨基酸取代或缺失的一个 或更多的氨基酸，如所述SEQ ID NO所示，并且产生突变体多肽的浓度增加，所述突变体多肽作为活性和可溶性蛋白质存在于大肠杆菌中表达的突变多肽的澄清裂解物中，相对于 不存在突变的多肽的级分的浓度作为活性和可溶性蛋白质存在于多肽的澄清裂解物中，而在相同条件下在大肠杆菌中表达的一个或多个缺失或取代。 本发明还涉及编码根据本发明的多肽的核酸和多肽的用途。

公开(公告)号：US20120100582A1

公开(公告)日：2012-04-26

申请号：US13265178

申请日：2010-04-26

申请人： Martin Kietzmann ,  Harald Pichler ,  Helmut Schwab ,  Amin El-Heliebi ,  Christine Winkler ,  Andreas Braun

发明人： Martin Kietzmann ,  Harald Pichler ,  Helmut Schwab ,  Amin El-Heliebi ,  Christine Winkler ,  Andreas Braun

IPC分类号： C12P7/62 ,  C12P7/02 ,  C12P7/40 ,  C12N9/18 ,  C12N15/55

CPC分类号： C12N9/18

摘要： The invention relates to an isolated polypeptide having esterase activity comprising an amino acid sequence shown in any one of SEQ ID NO's 2, 4, 6, 8, 10, 12 or 14 or a homologue thereof, comprising an amino acid substitution or deletion of one or more amino acids as shown in said SEQ ID NO's and resulting in a mutant polypeptide having an increased concentration of the fraction of the mutant polypeptide being present as an active and soluble protein in cleared lysate of the mutant polypeptide expressed in E. coli relative to the concentration of the fraction of the polypeptide without the mutation being present as an active and soluble protein in cleared lysate of the polypeptide without the one or more deletion or substitution expressed in E. coli under the same conditions. The invention also relates to nucleic acid encoding the polypeptides according to the invention, and the use of the polypeptides.

摘要翻译： 本发明涉及具有酯酶活性的分离多肽，其包含SEQ ID NO：2,4,6,8,10,12或14中任一项所示的氨基酸序列或其同源物，其包含氨基酸取代或缺失的一个 或更多的氨基酸，如所述SEQ ID NO所示，并且产生突变体多肽的浓度增加，所述突变体多肽作为活性和可溶性蛋白质存在于大肠杆菌中表达的突变多肽的澄清裂解物中，相对于 未突变的多肽的级分的浓度作为活性和可溶性蛋白质存在于多肽的澄清裂解物中，而在相同条件下在大肠杆菌中不表达一个或多个缺失或取代。 本发明还涉及编码根据本发明的多肽的核酸和多肽的用途。

公开(公告)号：US20110177553A1

公开(公告)日：2011-07-21

申请号：US12667414

申请日：2008-07-04

申请人： Martin Kietzmann ,  Helmut Schwab ,  Harald Pichler ,  Mirela Ivancic ,  Oliver May ,  Rudolf Gijsbertus Marie Luiten

发明人： Martin Kietzmann ,  Helmut Schwab ,  Harald Pichler ,  Mirela Ivancic ,  Oliver May ,  Rudolf Gijsbertus Marie Luiten

IPC分类号： C12P21/02 ,  C12N1/21 ,  C12N15/55 ,  C12N15/70 ,  C12P7/40

CPC分类号： C12N9/18 ,  C12N15/70 ,  C12Y301/01001

摘要： The present invention relates to a recombinant E. coli strain characterized in that the organisms contains a gene coding for a protein having esterase activity. Such E. coli is suitable for the preparation of a protein with esterase activity, whereby the expression takes place without coexpression of GroEL and/or GroES from a plasmid. The expression of glutathione reductase and/or thioredoxin reductase may be abolished by mutation. Furthermore, the ability of the organism to grow under oxygen-rich conditions has been restored by mutation. The expression of the gene of the protein with esterase activity is unaccompanied by the expression of an additional gene encoding a heat shock chaperone protein.

摘要翻译： 本发明涉及重组大肠杆菌菌株，其特征在于生物体含有编码具有酯酶活性的蛋白质的基因。 这种大肠杆菌适用于制备具有酯酶活性的蛋白质，从而在不与GroEL和/或GroES共同表达质粒的情况下进行表达。 谷胱甘肽还原酶和/或硫氧还蛋白还原酶的表达可以通过突变来消除。 此外，生物体在富氧条件下生长的能力已经通过突变恢复。 具有酯酶活性的蛋白质基因的表达与编码热休克分子伴侣蛋白的另外的基因的表达无关。