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公开(公告)号：CN112724203A
公开(公告)日：2021-04-30
申请号：CN202011607069.2
申请日：2020-12-30
申请人： 郑州大学 , 河南中泽生物工程有限公司
IPC分类号： C07K14/01 , C07K16/08 , G01N33/577 , G01N33/569
摘要： 本发明涉及一种非洲猪瘟病毒p54蛋白抗原表位肽及其应用。本发明筛选出了新的非洲猪瘟病毒p54蛋白抗原表位，完成了对p54蛋白N端B细胞表位的鉴定，完善了p54蛋白的抗原表位图谱。本发明筛选出的抗原表位(2DSEFFQPV9)为首次发现，在非洲猪瘟各毒株之间高度保守，对ASFV的血清学检测具有重要意义。该抗原表位肽及由其衍生的具有同等功能的抗原表位肽能够用于制备非洲猪瘟病毒p54蛋白的特异性抗体、制备检测或鉴定ASFVp54蛋白的试剂，并为研发预防和/或治疗非洲猪瘟病毒感染疫苗奠定了基础。
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公开(公告)号：CN112552396B
公开(公告)日：2022-07-12
申请号：CN202011607066.9
申请日：2020-12-30
申请人： 河南中泽生物工程有限公司
IPC分类号： C07K16/08 , C12N15/13 , G01N33/577 , G01N33/569
摘要： 本发明涉及抗非洲猪瘟病毒p54蛋白单克隆抗体、制备方法及应用。本发明设计并合成能够模拟保守性p54蛋白NTD的多肽，并将其与BSA偶联作为免疫原，通过免疫学方法免疫BALB/c小鼠制备获得抗ASFVp54蛋白单克隆抗体，该抗体能够特异性的识别并结合p54蛋白的N端区域，该识别区域(aa 1‑29)区别于现有商品化单抗。本发明提供了上述抗体的重链可变区及轻链可变区基因序列，在此基础上，可以采用常规基因工程或蛋白质工程方法获得本发明的单克隆抗体。该单克隆抗体特异性强，灵敏度高，能与ASFV HLJ/18株病毒发生特异性反应，而与CSFV、PCV2、PRRSV、PEDV及PRV等猪源病毒不发生反应，为进行ASFV病原学和致病机理的研究及ASFV病原的临床检测研究奠定了基础。
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公开(公告)号：CN112940087B
公开(公告)日：2022-04-12
申请号：CN202110285354.5
申请日：2021-03-17
申请人： 郑州大学 , 河南中泽生物工程有限公司
IPC分类号： C07K14/165 , C07K19/00 , C07K16/10 , G01N33/569 , G01N33/577 , A61K39/295 , A61K39/215 , A61K47/64 , A61P31/14
摘要： 本发明公开了一种SARS‑CoV和SARS‑CoV‑2共同抗原表位肽及其应用，属于生物医学领域。本发明首次公开了一种SARS‑CoV和SARS‑CoV‑2共同抗原表位肽，其氨基酸序列如SEQ ID NO.8或SEQ ID NO.35所示。本发明提供的抗原表位肽是具有高度保守性的B细胞线性抗原表位，能够诱导动物产生有效的体液免疫应答，具有较强的免疫原性。本发明将上述抗原表位肽偶联载体蛋白后，免疫小鼠筛选制备靶向该抗原表位的单克隆抗体，制备的单克隆抗体能够同时识别SARS‑CoV和SARS‑CoV‑2，具有优秀的亲和力和很高的特异性，稳定性能良好，为SARS‑CoV和SARS‑CoV‑2的预防、检测、治疗提供了新的工具。
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公开(公告)号：CN112940087A
公开(公告)日：2021-06-11
申请号：CN202110285354.5
申请日：2021-03-17
申请人： 郑州大学 , 河南中泽生物工程有限公司
IPC分类号： C07K14/165 , C07K19/00 , C07K16/10 , G01N33/569 , G01N33/577 , A61K39/295 , A61K39/215 , A61K47/64 , A61P31/14
摘要： 本发明公开了一种SARS‑CoV和SARS‑CoV‑2共同抗原表位肽及其应用，属于生物医学领域。本发明首次公开了一种SARS‑CoV和SARS‑CoV‑2共同抗原表位肽，其氨基酸序列如SEQ ID NO.8或SEQ ID NO.35所示。本发明提供的抗原表位肽是具有高度保守性的B细胞线性抗原表位，能够诱导动物产生有效的体液免疫应答，具有较强的免疫原性。本发明将上述抗原表位肽偶联载体蛋白后，免疫小鼠筛选制备靶向该抗原表位的单克隆抗体，制备的单克隆抗体能够同时识别SARS‑CoV和SARS‑CoV‑2，具有优秀的亲和力和很高的特异性，稳定性能良好，为SARS‑CoV和SARS‑CoV‑2的预防、检测、治疗提供了新的工具。
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公开(公告)号：CN112625091A
公开(公告)日：2021-04-09
申请号：CN202011565041.7
申请日：2020-12-25
申请人： 河南中泽生物工程有限公司
IPC分类号： C07K7/06 , G01N33/569 , G01N33/68
摘要： 本发明主要涉及猪瘟病毒Erns蛋白亲和多肽及应用，该多肽由计算机模拟的虚拟分子对接技术设计而成，序列为WRHYIH。本发明以同源建模获得的猪瘟Erns蛋白晶体结构为模板，根据虚拟分子筛选技术，获得多肽序列P1。人工合成多肽后，采用酶联免疫吸附测定试验和等离子共振试验鉴定该序列与猪瘟Erns蛋白相互作用的亲和性，结果表明P1序列与猪瘟Erns蛋白具有较高的特异性和亲和力；本发明为以亲和肽作为亲和配基的亲和层析提供了可靠理论基础，可通过对多肽标记，从而对猪瘟Erns蛋白进行快速检测。
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公开(公告)号：CN109535250A
公开(公告)日：2019-03-29
申请号：CN201811527178.6
申请日：2018-12-13
申请人： 郑州大学 , 河南中泽生物工程有限公司
IPC分类号： C07K16/10 , G01N33/577 , G01N33/569 , A61K39/42 , A61P31/14
摘要： 本发明公开了一种美洲型PRRSV N蛋白单克隆抗体、其制备方法及其应用，以期研发新型PRRSV疫苗。该单克隆抗体可特异性识别氨基酸序列如SEQ NO.1所示的美洲型PRRSV N蛋白的抗原表位。本发明设计了所述单克隆抗体的制备方法。本发明设计了PRRSV双抗夹心ELISA抗原检测试剂盒，含上述的美洲型PRRSV N蛋白单克隆抗体，可避免PRRSV感染早期而出现的抗体空白现象，对病毒感染的检测更直观、快速。本发明将所述美洲型PRRSV N蛋白单克隆抗体在免疫学检测中应用。本发明为进一步研究PRRSV核衣壳蛋白结构奠定基础，为研制新型PRRSV疫苗提供帮助，进而为免疫预防PRRS提供了新方向。
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公开(公告)号：CN110408633B
公开(公告)日：2022-06-24
申请号：CN201910618587.5
申请日：2019-07-10
申请人： 郑州大学 , 河南中泽生物工程有限公司
摘要： 本申请属于动物疫苗制备技术领域，具体涉及一种利用基因工程技术制备BTV1（蓝舌病1型病毒）VP2蛋白的制备方法专利申请事宜。蓝舌病1型病毒VP2蛋白基因编码序列VP2U由2886bp碱基组成，具体碱基序列如SEQ ID NO.1所示。具体原核表达制备BTV1 VP2蛋白时，包括：PCR扩增，酶切、与质粒pET28连接构建重组质粒pET28‑VP2U，转化，诱导表达等步骤。本申请通过对相关编码基因的优化，进一步借助于原核表达系统的技术优势，为发酵制备BTV1 VP2蛋白奠定了一定技术基础。初步实验结果表明，发酵液上清中的目的蛋白表达量可达到58.4μg/ml，可为工业化生产奠定良好技术基础。
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公开(公告)号：CN112409494A
公开(公告)日：2021-02-26
申请号：CN202011133005.3
申请日：2020-10-21
申请人： 河南中泽生物工程有限公司
摘要： 本发明提供了一种通用型流感病毒抗原蛋白。本发明将PCV2的Cap蛋白与来源于人、猪和禽的M2e表位蛋白融合表达。所述PCV2的Cap蛋白与来源于人、猪和禽的M2e表位蛋白融合表达，为来源于人、猪和禽的M2e表位按照不同的次序与Cap蛋白的羧基端融合串联表达并自组装形成Cap‑3M2e的抗原蛋白。本发明确定了基于M2e表位的通用型流感疫苗的最佳排列次序，并研制最适用于猪的基于M2e表位的通用型流感疫苗；该疫苗能够诱导高水平的PCV2特异性中和抗体，具有成为二价疫苗的潜力；经过优化的基因更适合在大肠杆菌宿主中高效率表达目标蛋白，而且能够满足工业化生产的要求，产量高，成本低。
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公开(公告)号：CN109781980A
公开(公告)日：2019-05-21
申请号：CN201910088471.5
申请日：2019-01-30
申请人： 河南中泽生物工程有限公司 , 郑州大学
IPC分类号： G01N33/569 , G01N33/58 , G01N33/68 , G01N33/558 , G01N33/532
摘要： 本发明公开了一种非洲猪瘟病毒快速检测卡及其应用，旨在解决非洲猪瘟病毒检测难的技术问题。该检测卡的金标垫上吸附有胶体金标记的抗非洲猪瘟病毒p30、p54和p72蛋白的多克隆抗体PoAbI；检测膜上设有羊抗或兔抗小鼠IgG抗体或金黄色葡萄球菌SPA印制的质控线C，还设有抗非洲猪瘟病毒p30、p54和p72蛋白的多克隆抗体PoAbII印制的检测线T。设计一种非洲猪瘟病毒快速检测卡的使用方法：采集待检样本加PBS或水混悬或研磨；滴入所述非洲猪瘟病毒快速检测卡的加样端；水平放置观察结果。本发明的非洲猪瘟病毒快速检测卡采用双抗体夹心法，特异性强、敏感性高，检测效率高，高效实用，具有重要的实际应用价值。
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公开(公告)号：CN113185584A
公开(公告)日：2021-07-30
申请号：CN202110437953.4
申请日：2021-04-22
申请人： 河南中泽生物工程有限公司
IPC分类号： C07K14/165 , C12N15/50 , C12N15/866 , C07K16/10 , G01N33/569
摘要： 本发明涉及重组SARS‑CoV‑2N蛋白及其制备方法、应用、及动物用新型冠状病毒ELISA抗体检测试剂盒。本发明提供了重组SARS‑CoV‑2N蛋白的制备方法，将经过密码子优化的编码SARS‑CoV‑2N蛋白的核苷酸序列构建入昆虫‑杆状病毒Bac‑to‑Bac表达系统的载体中，并转染昆虫细胞，实现病毒N蛋白的真核表达；亲和层析法提取并纯化昆虫细胞中表达的N蛋白。经过条件优化后每升感染重组杆状病毒的昆虫细胞中重组蛋白含量可达到200mg以上。本发明还提供了动物用新型冠状病毒ELISA抗体检测试剂盒，该试剂盒以优化后的SARS‑CoV‑2N蛋白作为包被抗原，能够对小鼠、水貂、家猫、狗等动物的新冠病毒感染后的血清抗体进行特异性检测，在间接ELISA检测中表现出良好的准确性。
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