公开(公告)号：CN109837226A

公开(公告)日：2019-06-04

申请号：CN201910128376.3

申请日：2019-02-21

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 郭爱珍 ,  朱习芳 ,  董亚旗 ,  李茜茜 ,  陈颖钰 ,  胡长敏 ,  陈焕春

IPC: C12N1/20 ,  C12N15/31 ,  C12N1/21 ,  C07K14/30 ,  C12Q1/02 ,  C12R1/35 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明属于动物传染病防治技术领域，涉及黏附能力降低的牛支原体基因突变株及黏附蛋白。蛋白基因Mbov_0503从牛支原体HB0801基因组中克隆获得。根据大肠杆菌对密码子的偏爱性，对Mbov_0503基因进行了修饰，将牛支原体色氨酸密码子UGA突变成大肠杆菌中编码色氨酸的密码子UGG，获得重组蛋白Mbov0503。本发明的蛋白基因核苷酸序列如SEQ ID NO:13所示，编码的蛋白质序列如SEQ ID NO:14所示。本发明的突变株从突变体库筛选的黏附缺陷株。该突变株对宿主EBL细胞的黏附能力，对MDBK细胞的跨膜传播能力及对细胞间紧密连接的破坏能力较野生株显著下降。可在牛支原体致病和防控中应用。

公开(公告)号：CN109825515A

公开(公告)日：2019-05-31

申请号：CN201910143457.0

申请日：2019-02-26

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 陈颖钰 ,  郭佳成 ,  郭爱珍 ,  李倩倩 ,  师红玲 ,  胡长敏 ,  陈焕春

IPC: C12N15/31 ,  C12N1/21 ,  C12R1/32

Abstract: 本发明属于动物传染病防制技术领域，涉及一种牛分枝杆菌卡介苗低侵袭力突变株B2801，该突变株含有牛分枝杆菌卡介苗BCG_2658的突变体基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，突变位点位于基因组2922763位点后，位于BCG_2658基因序列的748位点后，是一种新的结构基因和功能因。本发明的突变株为低侵袭力，低胞内存活能力，高生长速度，无索状结构及小菌落形态。本发明的突变株保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M 2018864。本发明分离的突变基因及其突变株可望在牛分枝杆菌致病机理、免疫机制研究和制备防制牛结核病药物中应用。

公开(公告)号：CN109750054A

公开(公告)日：2019-05-14

申请号：CN201910129071.4

申请日：2019-02-21

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 郭爱珍 ,  朱习芳 ,  董亚旗 ,  李茜茜 ,  陈颖钰 ,  胡长敏 ,  陈焕春

IPC: C12N15/55 ,  C12N9/16 ,  C12N1/21 ,  A61K38/46 ,  A61P31/04 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明属于动物传染病防制技术领域，具体涉及牛支原体蛋白基因MbovGdpP及其应用。Mbov_0276根据牛支原体HB0801基因组序列人工合成获得。针对大肠杆菌对密码子的偏爱性，对Mbov_0276基因进行了修饰：将牛支原体色氨酸密码子UGA突变成大肠杆菌中编码色氨酸的密码子UGG，得到大肠杆菌重组蛋白rMbovGdpP。Mbov_0276基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，编码的蛋白质序列如SEQ ID NO:2所示。突变株T6.290出现生长缺陷表型，在PPLO培养基上呈小菌落形态，对EBL细胞黏附减少，对盐离子的敏感性升高。该突变株可望在牛支原体致病机理和制备免疫防制药物中应用。

公开(公告)号：CN109652357A

公开(公告)日：2019-04-19

申请号：CN201910128368.9

申请日：2019-02-21

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 郭爱珍 ,  朱习芳 ,  董亚旗 ,  李茜茜 ,  陈颖钰 ,  胡长敏 ,  陈焕春

IPC: C12N1/21 ,  C12R1/35

Abstract: 本发明属于动物传染病防制技术领域，具体涉及细胞共培养下生长缺陷的牛支原体突变株及应用,从牛支原体基因突变体库中筛选得到一株牛支原体Mbov_0328基因缺失突变菌株T9.386，该基因编码环二核苷酸磷酸二酯酶。突变菌株与牛胚胎肺细胞共培养时，表现出显著生长缺陷表型；在PPLO固体培养基上表现为小菌落形态。所述的突变株与野生菌株间的蛋白组学呈现显著的差异表达谱。突变菌株间具有38个差异表达蛋白，其中30个蛋白呈上调表达，8个蛋白呈下调表达。该突变株可在牛支原体代谢生理、致病和免疫防制领域应用。

公开(公告)号：CN104726413B

公开(公告)日：2018-03-09

申请号：CN201510054798.2

申请日：2015-02-01

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 郭爱珍 ,  赵刚 ,  陈曦 ,  汪乾坤 ,  张慧 ,  郭雨丝 ,  陈颖钰 ,  胡长敏

IPC: C12N5/20 ,  C07K16/40 ,  G01N33/577 ,  G01N33/573

Abstract: 本发明属于动物传染病防治技术领域，具体涉及一株牛支原体NADH氧化酶的单克隆抗体。该单克隆抗体是由交瘤细胞株8B7分泌的，所述的NADH氧化酶是一种牛支原体烟酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化酶，本发明修饰的NOX基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。公开了NOX基因的克隆和表达及纯化步骤，重组蛋白质rNOX单克隆抗体的制备步骤以及免疫荧光检测法的建立和初步应用的步骤及效果。所述的杂交瘤细胞株8B7保藏在中国典型培养物保藏中心，其保藏号为CCTCC NO：C2014221，该单克隆抗体能特异性地识别牛支原体。

公开(公告)号：CN107304231A

公开(公告)日：2017-10-31

申请号：CN201610237578.8

申请日：2016-04-18

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 郭爱珍 ,  任宁宁 ,  王洁茹 ,  陈颖钰 ,  葛盼 ,  熊学凯 ,  胡长敏 ,  陈焕春

IPC: C07K19/00 ,  C12N15/62 ,  C12N1/21 ,  G01N33/569 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明属于微生物基因工程技术领域，具体涉及一种结核分枝杆菌融合蛋白及应用。利用软件预测三基因的B细胞结合位点的序列，通过Linker将结核分枝杆菌Rv0222，Rv2657c和Rv1509三个基因的B细胞结合位点序列串联，获得融合基因，其序列如SEQ ID NO：11所示。该融合基因包含在原核表达质粒中，含有该重组质粒的大肠杆菌保藏在CCTCC，保藏编号为CCTCC NO：M2016159。本发明还公开了该融合基因编码蛋白在制备检测活动性肺结核血清诊断试剂盒中作为诊断标识抗原蛋白的应用。

公开(公告)号：CN107118262A

公开(公告)日：2017-09-01

申请号：CN201610101212.8

申请日：2016-02-24

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 郭爱珍 ,  安瓦尔 ,  赵刚 ,  费萨尔 ,  陈曦 ,  陈颖钰 ,  胡长敏 ,  陈焕春

IPC: C07K14/30 ,  C12N1/21 ,  G01N33/68 ,  G01N33/569

CPC classification number: C07K14/30 ,  G01N33/569 ,  G01N33/68 ,  G01N2333/30

Abstract: 本发明具体涉及到一种牛支原体MbovP579蛋白及其应用。所述的蛋白是从牛支原体HB0801基因组中克隆表达获得，是一种未知功能的特异性免疫原性蛋白。以牛支原体HB0801基因组为模板，克隆Mbov_579基因，根据大肠杆菌的密码子偏爱性，对Mbov_579基因进行修饰，将牛支原体色氨酸密码子UGA突变成大肠杆菌中编码色氨酸的密码子UGG，最终获得在大肠杆菌中表达的重组rMbovP579。本发明的蛋白的基因的核苷酸序列是SEQ ID NO:13中1-2187位碱基所示的序列，其蛋白质的氨基酸序列如SEQ ID NO:14所示。该重组蛋白可作为牛支原体感染和疫苗免疫诊断试剂盒中的抗原蛋白。

公开(公告)号：CN119524133A

公开(公告)日：2025-02-28

申请号：CN202411692075.0

申请日：2024-11-23

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 郭爱珍 ,  彭永崇 ,  陈颖钰 ,  谢胜松 ,  周诗颖 ,  孙钦 ,  周信君 ,  胡长敏 ,  张磊 ,  陈曦

IPC: A61K45/00 ,  A61K31/7105 ,  A61P31/06 ,  C12N15/113 ,  C12N15/12 ,  C12N5/10 ,  C12Q1/02 ,  A01K67/0276 ,  A01K67/0275

Abstract: 本发明公开了NmrAL2_Bovine基因作为靶点在防治牛结核病中的应用，敲除或敲低NmrAL2_Bovine基因可以显著抑制牛分枝杆菌、结核分枝杆菌、牛分枝杆菌BCG和耻垢分枝杆菌在宿主细胞中存活，且不影响宿主细胞正常增殖。因此，NmrAL2_Bovine基因的抑制剂可用于制备防治牛结核病的药物，NmrAL2_Bovine基因也可作为转基因牛设计的靶点，用于抗牛结核病育种或遗传治疗研究。

公开(公告)号：CN119019529A

公开(公告)日：2024-11-26

申请号：CN202411327051.5

申请日：2024-09-23

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 郭爱珍 ,  耿元晨 ,  陈颖钰 ,  胡长敏 ,  姜传文 ,  杨浩 ,  陈建国 ,  陈曦 ,  张磊 ,  项志杰

IPC: C07K14/47 ,  C12N15/12 ,  C12N15/113 ,  C12N9/22 ,  C12N5/10 ,  C12N15/867 ,  A61K45/00 ,  A61K48/00 ,  A61P31/14 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明公开了WNT5A基因在调控宿主抗牛副流感病毒3型(Bovine parainfluenza virus type 3，BPIV‑3)中的应用。利用CRISPR/Cas9基因编辑技术，构建了WNT5A基因敲除的MDBK细胞系和抗BPIV‑3感染的细胞模型，发现基因敲除细胞对BPIV‑3感染表现出显著抗性，BPIV‑3在基因敲除细胞上的增殖速度显著低于野生型细胞，而回补WNT5A基因则导致细胞的抗病毒作用消失。以上结果表明，WNT5A基因在调控宿主抗病毒中发挥重要作用。本发明从细胞水平上鉴定了WNT5A基因的抗病毒调节功能，首次发现该基因可以作为基因编辑细胞和动物设计的潜在靶点应用于抗病育种和牛抗BPIV‑3感染预防与治疗药物的研发，对减少药物滥用，避免疫情发生具有重大意义。

公开(公告)号：CN118340888A

公开(公告)日：2024-07-16

申请号：CN202410338376.7

申请日：2024-03-22

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 郭爱珍 ,  彭永崇 ,  陈颖钰 ,  谢胜松 ,  汪超 ,  高霖 ,  周诗颖 ,  孙钦 ,  胡长敏 ,  张磊 ,  陈曦 ,  陈焕春

IPC: A61K45/00 ,  C12N15/113 ,  C12N15/55 ,  C12N5/10 ,  C12N15/867 ,  C12Q1/02 ,  A61P31/06 ,  A61K31/7105 ,  A61K31/713

Abstract: 本发明公开了ENPP3基因作为靶点在防治牛结核病中的应用，敲除或敲低ENPP3基因可以显著抑制牛分枝杆菌、结核分枝杆菌、牛分枝杆菌BCG和耻垢分枝杆菌在宿主细胞中存活，且不影响宿主细胞正常增殖，通过小鼠模型进一步证实了敲除ENPP3基因可显著降低牛分枝杆菌BCG在小鼠体内的存活及减轻肺部损伤。同时ENPP3在哺乳动物中高度保守，因此可以广泛应用于人兽共患结核病的预防与治疗，也可作为基因编辑动物设计的潜在靶点，减少药物滥用，避免疫病的发生，具有丰富的应用和经济价值。