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公开(公告)号：CN106631748B
公开(公告)日：2019-11-05
申请号：CN201611169315.4
申请日：2016-12-16
Applicant: 中国科学院合肥物质科学研究院
Abstract: 本发明公开了一种分离纯化纳豆芽孢杆菌中维生素K2的方法，包括以下步骤：维生素K2萃取液的获取，维生素K2上柱原液的获取，低纯度的维生素K2浓缩液的获取，较高纯度的维生素K2浓缩液的获取，高纯度的维生素K2的获取，维生素K2晶体的获取。本发明的优点在于：(1)获得的维生素K2晶体产品纯度高、生物活性高、回收率高；(2)分离纯化工艺操作简单、条件温和、处理能力大；(3)各有机溶剂可回收利用，便于工业化应用。
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公开(公告)号：CN109825537A
公开(公告)日：2019-05-31
申请号：CN201910181169.4
申请日：2019-03-11
Applicant: 中国科学院合肥物质科学研究院
Abstract: 一种纳豆芽孢杆菌清液发酵制备维生素K2的方法，包括原料预处理与培养基配制、真空蒸煮处理、高温复合酶处理、蛋白酶处理、低温等离子体处理、除渣处理和发酵培养。本发明采用低温等离子体技术与蛋白酶酶解技术结合，在减压蒸煮条件下对高固形物含量的半合成培养基进行预处理，以形成清液，避免高固形物含量培养基的一系列缺点；同时，经过预处理的半合成培养基，无需再进行高压湿热灭菌，减少能耗的同时降低了培养基的黏度，有利于后期的发酵生产与分离纯化。
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公开(公告)号：CN109824496A
公开(公告)日：2019-05-31
申请号：CN201910183305.3
申请日：2019-03-12
Applicant: 中国科学院合肥物质科学研究院
Abstract: 一种从破壁纳豆芽孢杆菌菌体中提取纯化维生素K2的方法，将发酵之后的微生物用超滤和离心进行固液分离，得到湿菌体，用离子束处理湿菌体进行破壁之后，用无水乙醇进行提取，不仅会获得大量的维生素K2，也提取出较少的油脂，在提取过程中进行了粗纯化，为后面一步式高效率纯化提供了很好的溶液。将提取物通过柱萃取，采用极性不同的有机试剂进行萃取纯化，将不同极性的杂质萃取出来，从而使溶液的纯度得到很大提高。之后将其冷冻结晶能得到纯度为95%的维生素K2晶体。本方法省去了传统方法中的干燥和菌体粉碎的过程，提高了提取效率与提取的纯度。并通过一步式纯化就获得纯度较高的维生素K2。
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公开(公告)号：CN104630049A
公开(公告)日：2015-05-20
申请号：CN201510036049.7
申请日：2015-01-23
Applicant: 中国科学院合肥物质科学研究院
Abstract: 本发明公开了一种全自动固体发酵真菌孢子的分离装置，包括一级旋风分离器、螺旋轴分离装置和二级旋风分离器。一级旋风分离器包括第一风机、相连通的主分离器和副分离器。主分离器的底部连接主收集桶，副分离器的底部连接副收集桶。出风通道和进料通道均与主分离器和副分离器的内腔相连通。螺旋轴分离装置室包括电机和螺旋轴分离室，螺旋轴分离室内置不规则螺旋轴，电机带动不规则螺旋轴的转动。本发明还公开了基于该全自动分离装置的固体发酵真菌孢子分离方法。采用本发明的方法分离真菌孢子，不但实现菌丝和孢子的分离，获得了高孢粉。而且实现了菌丝和孢子从物料上的自动分离，减少了物料的手动前处理过程，提高了分离效率。
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公开(公告)号：CN103333804B
公开(公告)日：2015-01-07
申请号：CN201310162551.3
申请日：2013-05-04
Applicant: 中国科学院合肥物质科学研究院
Abstract: 本发明公开了改变真菌孢子产量及形态的方法，包括以下步骤：（1）将目的真菌在菌丝液体培养基中培养，提取目的真菌全基因组；（2）设计引物从目的真菌全基因组中扩增几丁质合成酶基因片段；（3）将几丁质合成酶基因片段与载体连接构建用于抑制形态表达的干扰载体；（4）干扰载体转化目的真菌，利用载体上的抗性基因筛选转化子；（5）将转化子接入平板，培养一定时间后，统计孢子数量，并用电子显微镜观察孢子形态。本发明通过分子生物学手段调控几丁质合成酶基因的表达水平可以大量获得突变株，本发明获得的突变株的孢子产量和形态均有明显变化。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103333804A
公开(公告)日：2013-10-02
申请号：CN201310162551.3
申请日：2013-05-04
Applicant: 中国科学院合肥物质科学研究院
Abstract: 本发明公开了改变真菌孢子产量及形态的方法，包括以下步骤：（1）将目的真菌在菌丝液体培养基中培养，提取目的真菌全基因组；（2）设计引物从目的真菌全基因组中扩增几丁质合成酶基因片段；（3）将几丁质合成酶基因片段与载体连接构建用于抑制形态表达的干扰载体；（4）干扰载体转化目的真菌，利用载体上的抗性基因筛选转化子；（5）将转化子接入平板，培养一定时间后，统计孢子数量，并用电子显微镜观察孢子形态。本发明通过分子生物学手段调控几丁质合成酶基因的表达水平可以大量获得突变株，本发明获得的突变株的孢子产量和形态均有明显变化。
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公开(公告)号：CN103290077A
公开(公告)日：2013-09-11
申请号：CN201310280268.0
申请日：2013-07-04
Applicant: 中国科学院合肥物质科学研究院
Abstract: 本发明公开了一种利用黄杆菌高效生产维生素K2的方法。将黄杆菌原始菌株在培养基上活化后，采用低能离子束及低温等离子体复合诱变方式选育高产菌株，经过含维生素K2类似物平板初筛及摇瓶发酵复筛后，高产菌株发酵单位提高50～100%；在黄杆菌发酵过程中通过添加表面活性剂，使胞内维生素K2溶至胞外，维生素K2产量提高50～200%。本发明能够能够极大的提高维生素K2发酵水平，实现高效生物合成维生素K2，为实现维生素K2的大规模工业化发酵提供了可能，使用方便。
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公开(公告)号：CN114538589B
公开(公告)日：2023-08-25
申请号：CN202210181242.X
申请日：2022-02-25
Applicant: 中国科学院合肥物质科学研究院
IPC: C02F1/56 , C08F251/02 , C08F220/18 , C07C46/10 , C07C50/14 , C02F101/34
Abstract: 一种富集发酵液中萜类化合物的方法及其使用的纤维素基絮凝剂，包括步骤1：对微生物发酵生产法得到的含萜类化合物的发酵液进行离心得到上清液；步骤2：将上清液调节pH值至4.8‑6.0，然后在避光条件下，以转速200‑300r/min搅拌5‑10min；接着向其添加其质量0.1‑1.0%纤维素基絮凝剂，以转速30‑60r/min搅拌10‑30min后按0.25‑1.00%的质量比例加入硅藻土，混合至均匀悬浮，然后离心收取絮凝沉淀；步骤3：用无水乙醇或乙酸丁酯溶液萃取絮凝沉淀中的七烯甲萘醌，得到七烯甲萘醌的乙醇溶液或七烯甲萘醌的乙酸丁酯溶液。本发明对发酵液中的萜类化合物富集率高达80%以上。
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公开(公告)号：CN116606200A
公开(公告)日：2023-08-18
申请号：CN202310607043.5
申请日：2023-05-26
Applicant: 中国科学院合肥物质科学研究院
Abstract: 一种超声涡旋振荡联合高效萃取枯草芽孢杆菌中七烯甲萘醌的方法，包括如下步骤：（1）向发酵液中加入正己烷、异丙醇混合液，先进行超声波辅助萃取，剧烈旋涡振荡，之后摇床萃取2 h；（2）在上述发酵液和有机溶剂混合液中加入正丁醇，剧烈振荡,离心，收集有机相，得第一次萃取液；（3）重复步骤（2），得第二次萃取液，合并两次萃取液，以0.22μm孔径有机微孔滤膜过滤，即为发酵液中MK‑7的提取液。本发明利用超声波的破壁和促溶作用加上涡旋振荡，使有机溶剂与发酵液充分接触，使MK‑7最终得率达到99.9%。本发明具有萃取得率高，无需干燥设备，步骤简单，节约时间等优点，便于应用于工业化生产。
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公开(公告)号：CN115494026A
公开(公告)日：2022-12-20
申请号：CN202211126519.5
申请日：2022-09-16
Applicant: 中国科学院合肥物质科学研究院
IPC: G01N21/359 , G01N21/35
Abstract: 一种多烯甲萘醌萜类化合物溶液浓度的检测方法，包括下列步骤：步骤1：多烯甲萘醌萜类化合物近红外光谱特征峰的选择；步骤2：多烯甲萘醌萜类化合物近红外光谱数据的采集；步骤3：溶液浓度预测模型的建立和检测；步骤4：待测样品溶液浓度检测。本发明利用近红外光谱分析技术建立了一个快速高效检测多烯甲萘醌萜类化合物溶液浓度的方法，测试结果显示检测数值准确性高。
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