公开(公告)号：CN105400810A

公开(公告)日：2016-03-16

申请号：CN201510557129.7

申请日：2015-09-06

Applicant: 吉林大学

Inventor： 隋婷婷 ,  赖良学 ,  袁琳 ,  李占军 ,  刘欢

IPC: C12N15/66 ,  C12N15/89

Abstract: 一种采用敲除技术建立低磷性佝偻病模型的方法，属于生物技术领域。本发明的目的是采用CRISPR-CAS9基因敲除技术成功获得人类低磷性佝偻病模型的采用敲除技术建立低磷性佝偻病模型的方法。本发明的步骤是：sgRNA表达载体的构建，CAS9mRNA的合成，受精卵的获取和显微注射，受精卵的培养和发育。本发明成功获得低磷性佝偻病模型，该模型的获得能够有效地模拟人类疾病的病理过程，能更有效地预测新疫苗、新药和新诊断试剂等在临床应用中的效果，同时大大降低新药研发的风险，为临床研究提供基础模型。

公开(公告)号：CN114946766B

公开(公告)日：2024-02-09

申请号：CN202210548261.1

申请日：2022-05-20

Applicant: 吉林大学

Inventor： 宋宇宁 ,  李占军 ,  赖良学 ,  王东旭

IPC: C12N15/85 ,  A01K67/0276

Abstract: 应用，能够有助于基础医学研究及机制探究。本发明公开了一种构建先天性高胰岛素血症模型的方法及模型，通过对kcnj11基因P.H259R位点及P.H296R位点进行共同突变打靶，胚胎注射后进行胚胎移植，获得兔先天性高胰岛素血症模型，利用SpRY‑ABEmax基因编辑技术优势是没有识别PAM区域的序列限制，可以完成指定位点的突变顺利进行；克服了传统的CRISPR/(56)对比文件Walczewska-Szewc, K.Spacial models ofmalfunctioned protein complexes help toelucidate signal transduction criticalfor insulin release《.systems》.2019,第177卷第48-55页.Song, YN.CRISPR/Cas9-mediated mosaicmutation of SRY gene induceshermaphroditism in rabbits《.BIOSCIENCEREPORTS》.2018,第38卷(第2期),第1490页.

公开(公告)号：CN115820603A

公开(公告)日：2023-03-21

申请号：CN202211427547.0

申请日：2022-11-15

Applicant: 吉林大学

Inventor： 隋婷婷 ,  张涛 ,  李占军 ,  赵飞宇 ,  李金泽 ,  孙小迪 ,  张曦匀 ,  范鹏 ,  王鹤均

IPC: C12N9/22 ,  C12N15/113 ,  C12N15/63 ,  C12N15/85 ,  A61K38/46 ,  A61K48/00 ,  A61P43/00

Abstract: 本发明提供了一种靶向RNA的5‑甲基胞嘧啶修饰编辑系统，所述编辑系统包括失活的CasRx核酸酶融合5‑甲基胞嘧啶修饰酶及其酶活性功能区的蛋白表达载体、靶向RNA至少一个位点的crRNA表达载体。进一步的本发明还靶向RPSA的mRNA的CDS区中一个位点的crRNA表达载体。本发明还提供了靶向RNA的5‑甲基胞嘧啶修饰载体系统的制备方法及其应用。采用本发明提供的编辑系统，可以对RNA 5‑甲基胞嘧啶修饰位点进行靶向修饰5‑甲基胞嘧啶，准确高效。

公开(公告)号：CN115011581A

公开(公告)日：2022-09-06

申请号：CN202210391619.4

申请日：2022-04-14

Applicant: 吉林大学

Inventor： 李占军 ,  李金泽 ,  隋婷婷 ,  赵丁

IPC: C12N9/22 ,  C12N15/113 ,  C12N15/55 ,  C12N15/85

Abstract: 一种使cas3系统可以精确敲除的方法，属于生物工程技术领域。本发明的目的是通过控制cas3介导的缺失的大小，可以使敲除大小保持在预期范围内的使cas3系统可以精确敲除的方法。本发明步骤是：将cas9点突变成dcas9，将突变好的产物进行转化和质粒扩繁，细胞靶向位点的cas3的crRNA的制备，细胞靶向位点的dcas9的gRNA的设计，crRNA和74707表达载体的构建。本发明通过dcas9和其gRNA的空间位阻作用将cas3的运动阻碍，使其无法继续降解，从而达到精确敲除。

公开(公告)号：CN114958848A

公开(公告)日：2022-08-30

申请号：CN202210521762.0

申请日：2022-05-13

Applicant: 吉林大学

Inventor： 赖良学 ,  刘鑫 ,  李占军 ,  宋宇宁 ,  王东旭

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/89 ,  C12N15/85 ,  C12N15/12 ,  A01K67/027

Abstract: 本发明公开了一种人原发性小头畸形症兔模型，同时还提供其建立方法，利用YIPF5基因突变构建模型，采用CRISPR‑CAS9基因突变技术构建兔YIPF5基因突变模拟人原发性小头畸形症的模型，该模型的获得能够有效地模拟人类疾病的病理过程，有助于探究YIPF5基因突变对于哺乳动物头部和神经发育的具体调控作用，能更有效地测试新药和新诊断试剂等在临床应用中的效果，为临床研究提供动物模型。

公开(公告)号：CN119193639A

公开(公告)日：2024-12-27

申请号：CN202411378602.0

申请日：2024-09-30

Applicant: 吉林大学

Inventor： 李占军 ,  牛文超 ,  钱育强 ,  王迪 ,  龚恒 ,  赵丁 ,  高汛 ,  陈佳惠 ,  于红亮

IPC: C12N15/63 ,  C12N15/55 ,  C12N15/113

Abstract: 本发明公开了一种利用I型CRISPR相关转座酶开发的腺嘌呤碱基编辑系统，开发出一种扩大及可移动编辑窗口的腺嘌呤碱基编辑系统（I‑F CAST QCascade ABE），具有扩大及可移动的靶向范围。相对于ABE8e系统扩大了靶向范围，且可通过改变crRNA spacer长度移动编辑窗口，具有良好的应用前景。

公开(公告)号：CN117904255A

公开(公告)日：2024-04-19

申请号：CN202311596815.6

申请日：2023-11-28

Applicant: 吉林大学

Inventor： 李占军 ,  韩杨 ,  周佳乐 ,  张仁泉 ,  梁玉茹

IPC: C12Q1/6806 ,  C12Q1/6869 ,  C12Q1/6851 ,  G01N33/68

Abstract: 一种基于脱氨酶的RNAm5C修饰的检测方法，属于生物工程技术领域。本发明的目的是将脱氨酶与m5C结合蛋白融合，利用m5C结合蛋白的靶向功能，将脱氨酶招募到m5C位点周围，使脱氨酶对单链RNA上的胞嘧啶和腺嘌呤实现脱氨基作用，最后通过检测C‑to‑U/A‑to‑G的转化就可以确定m5C区域，开发一种基于脱氨酶的RNAm5C修饰的检测方法。本发明将m5C结合蛋白ALYREF和YBX1分别与脱氨酶APOBEC1和TadA‑8e的C端融合，利用m5C结合蛋白的靶向功能，将脱氨酶招募到m5C位点附近，利用脱氨酶的脱氨活性改变m5C位点附近的序列，通过分析C‑to‑U/A‑to‑G的转换，确定m5C的区域。本发明新型的脱氨酶检测方法不依赖于抗体和化学试剂，显著增强检测的特异性和准确性。

公开(公告)号：CN117867019A

公开(公告)日：2024-04-12

申请号：CN202410085267.9

申请日：2024-01-21

Applicant: 吉林大学

Inventor： 李占军 ,  钱育强 ,  牛文超 ,  王迪 ,  赵丁 ,  李祥锐 ,  周佳乐 ,  高汛

IPC: C12N15/85 ,  C12N9/22 ,  C12N15/55

Abstract: 本发明公开了一种能够增加基因组突变率以及扩大编辑窗口的胞嘧啶碱基编辑系统，包括鼠源APOBEC1（rA1），dDDA（E1347A），nCas9（D10A）以及UGI序列。提供了一种新的碱基编辑工具（BE4max‑M‑dDDA），具有增加基因组突变率以及扩大编辑窗口的功能，能够提高编辑效率以及扩宽了编辑窗口，有助于人们对应不同的突变位点、不同突变位置时有不同的选择。

公开(公告)号：CN116497060A

公开(公告)日：2023-07-28

申请号：CN202210816453.6

申请日：2022-07-12

Applicant: 吉林大学

Inventor： 宋宇宁 ,  李占军 ,  赖良学 ,  武鑫宇 ,  王东旭

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/113 ,  C12N15/55 ,  C12N15/89 ,  C12N15/87 ,  A01K67/027

Abstract: 本发明提供一种构建新型肌萎缩侧索硬化症模型的方法及模型，利用SpRY‑CBE单碱基基因编辑技术进行ARPP21基因p.P521L位点突变构建一对寡聚核苷酸链。本发明提供的一种构建新型肌萎缩侧索硬化症模型的方法及模型通过对ARPP21基因P.P521L位点进行突变打靶，胚胎注射后进行胚胎移植，获得兔先天性高胰岛素血症模型，利用SpRY‑CBE基因编辑技术优势是没有识别PAM区域的序列限制，可以完成指定位点的突变顺利进行；克服了传统的CRISPR/Cas9基因编辑技术需要识别PAM区域为NGG碱基序列，大部分突变位点无法进行编辑；本发明所利用的SpRY‑CBE碱基编辑技术首次在家兔上进行应用。该兔疾病模型不但能够有助于基础医学研究及机制探究，同时也是SpRY‑CBE碱基编辑系统首次在家兔动物中进行应用。

公开(公告)号：CN115125244A

公开(公告)日：2022-09-30

申请号：CN202210522336.9

申请日：2022-05-14

Applicant: 吉林大学

Inventor： 李占军 ,  刘若楠 ,  宋宇宁 ,  赖良学 ,  王东旭

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/55 ,  C12N15/89 ,  C12N15/85 ,  C12Q1/6869 ,  A01K67/027 ,  A61K49/00

Abstract: 一种构建阿尔兹海默症的兔模型方法，属于动物生物技术领域。本发明的目的是利用CRISPR/Cas9技术将家兔的两个位点进行点突变，使得构建的双基因位点点突变的兔子呈现阿尔兹海默病表型的构建阿尔兹海默症的兔模型方法。本发明以兔MAPT基因11号外显子和/或PSEN1基因4号外显子为靶向，通过点突变的方式改变其遗传序列，使得兔子呈现阿尔兹海默症的表型。本发明为新一代药物筛选提供新思路，对研究阿尔兹海默病的病理过程对该疾病的预防和治疗具有指导意义。