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公开(公告)号：CN106701719B
公开(公告)日：2020-04-21
申请号：CN201710029003.1
申请日：2017-01-16
申请人： 中国科学院合肥物质科学研究院
摘要： 本发明公开了一种利用纳豆芽孢杆菌发酵联产维生素K2和纳豆激酶的方法，包括以下步骤：菌种活化：将纳豆芽孢杆菌划线至平板培养基中培养，再取单菌落在试管培养基，进行培养；制备种子：将试管中纳豆芽孢杆菌接种到种子培养基中培养；纳豆激酶、维生素K2的生产：配置联产发酵培养基，待配置联产发酵培养基冷却后，取制备的种子液，接种，于最佳联产培养条件下进行纳豆激酶和维生素K2的生产；纳豆激酶、维生素K2的分离和提取：将发酵液离心后，上清与沉淀分离，向上清中添加无机高分子絮凝剂，并选用壳聚糖作为助凝剂，将上清中维生素K2和纳豆激酶分离。本发明具有提高了原料的利用率且适合于工业生产的优点。
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公开(公告)号：CN110437993A
公开(公告)日：2019-11-12
申请号：CN201910881952.1
申请日：2019-09-18
申请人： 中国科学院合肥物质科学研究院
摘要： 一种多物理场耦合生物反应器，包括依次连通设置的生物反应罐体、超声波产生与控制装置、光照产生与控制装置和磁场产生与控制装置，磁场产生与控制装置与生物反应罐体连通设置；超声波产生与控制装置包括超声波发生器以及容器，超声波发生器的探头设置在容器内，容器外设置有第一冷却层；光照产生与控制装置包括第一玻璃管，第一玻璃管外设置有遮光套，遮光套的内壁设置有发光体；磁场产生与控制装置包括第二玻璃管，第二玻璃管外设置有电磁线圈。本发明可对不同微生物进行充分培养，对系统中各装置的腔体和管路均可实现单独灭菌，维护升级简便，也可与任意类型罐体连接，针对微生物不同培养需求，可自由组合使用，适用范围广。
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公开(公告)号：CN106631748B
公开(公告)日：2019-11-05
申请号：CN201611169315.4
申请日：2016-12-16
申请人： 中国科学院合肥物质科学研究院
摘要： 本发明公开了一种分离纯化纳豆芽孢杆菌中维生素K2的方法，包括以下步骤：维生素K2萃取液的获取，维生素K2上柱原液的获取，低纯度的维生素K2浓缩液的获取，较高纯度的维生素K2浓缩液的获取，高纯度的维生素K2的获取，维生素K2晶体的获取。本发明的优点在于：(1)获得的维生素K2晶体产品纯度高、生物活性高、回收率高；(2)分离纯化工艺操作简单、条件温和、处理能力大；(3)各有机溶剂可回收利用，便于工业化应用。
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公开(公告)号：CN109825537A
公开(公告)日：2019-05-31
申请号：CN201910181169.4
申请日：2019-03-11
申请人： 中国科学院合肥物质科学研究院
摘要： 一种纳豆芽孢杆菌清液发酵制备维生素K2的方法，包括原料预处理与培养基配制、真空蒸煮处理、高温复合酶处理、蛋白酶处理、低温等离子体处理、除渣处理和发酵培养。本发明采用低温等离子体技术与蛋白酶酶解技术结合，在减压蒸煮条件下对高固形物含量的半合成培养基进行预处理，以形成清液，避免高固形物含量培养基的一系列缺点；同时，经过预处理的半合成培养基，无需再进行高压湿热灭菌，减少能耗的同时降低了培养基的黏度，有利于后期的发酵生产与分离纯化。
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公开(公告)号：CN109824496A
公开(公告)日：2019-05-31
申请号：CN201910183305.3
申请日：2019-03-12
申请人： 中国科学院合肥物质科学研究院
摘要： 一种从破壁纳豆芽孢杆菌菌体中提取纯化维生素K2的方法，将发酵之后的微生物用超滤和离心进行固液分离，得到湿菌体，用离子束处理湿菌体进行破壁之后，用无水乙醇进行提取，不仅会获得大量的维生素K2，也提取出较少的油脂，在提取过程中进行了粗纯化，为后面一步式高效率纯化提供了很好的溶液。将提取物通过柱萃取，采用极性不同的有机试剂进行萃取纯化，将不同极性的杂质萃取出来，从而使溶液的纯度得到很大提高。之后将其冷冻结晶能得到纯度为95%的维生素K2晶体。本方法省去了传统方法中的干燥和菌体粉碎的过程，提高了提取效率与提取的纯度。并通过一步式纯化就获得纯度较高的维生素K2。
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公开(公告)号：CN104630049A
公开(公告)日：2015-05-20
申请号：CN201510036049.7
申请日：2015-01-23
申请人： 中国科学院合肥物质科学研究院
摘要： 本发明公开了一种全自动固体发酵真菌孢子的分离装置，包括一级旋风分离器、螺旋轴分离装置和二级旋风分离器。一级旋风分离器包括第一风机、相连通的主分离器和副分离器。主分离器的底部连接主收集桶，副分离器的底部连接副收集桶。出风通道和进料通道均与主分离器和副分离器的内腔相连通。螺旋轴分离装置室包括电机和螺旋轴分离室，螺旋轴分离室内置不规则螺旋轴，电机带动不规则螺旋轴的转动。本发明还公开了基于该全自动分离装置的固体发酵真菌孢子分离方法。采用本发明的方法分离真菌孢子，不但实现菌丝和孢子的分离，获得了高孢粉。而且实现了菌丝和孢子从物料上的自动分离，减少了物料的手动前处理过程，提高了分离效率。
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公开(公告)号：CN103333804B
公开(公告)日：2015-01-07
申请号：CN201310162551.3
申请日：2013-05-04
申请人： 中国科学院合肥物质科学研究院
摘要： 本发明公开了改变真菌孢子产量及形态的方法，包括以下步骤：（1）将目的真菌在菌丝液体培养基中培养，提取目的真菌全基因组；（2）设计引物从目的真菌全基因组中扩增几丁质合成酶基因片段；（3）将几丁质合成酶基因片段与载体连接构建用于抑制形态表达的干扰载体；（4）干扰载体转化目的真菌，利用载体上的抗性基因筛选转化子；（5）将转化子接入平板，培养一定时间后，统计孢子数量，并用电子显微镜观察孢子形态。本发明通过分子生物学手段调控几丁质合成酶基因的表达水平可以大量获得突变株，本发明获得的突变株的孢子产量和形态均有明显变化。
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公开(公告)号：CN103333804A
公开(公告)日：2013-10-02
申请号：CN201310162551.3
申请日：2013-05-04
申请人： 中国科学院合肥物质科学研究院
摘要： 本发明公开了改变真菌孢子产量及形态的方法，包括以下步骤：（1）将目的真菌在菌丝液体培养基中培养，提取目的真菌全基因组；（2）设计引物从目的真菌全基因组中扩增几丁质合成酶基因片段；（3）将几丁质合成酶基因片段与载体连接构建用于抑制形态表达的干扰载体；（4）干扰载体转化目的真菌，利用载体上的抗性基因筛选转化子；（5）将转化子接入平板，培养一定时间后，统计孢子数量，并用电子显微镜观察孢子形态。本发明通过分子生物学手段调控几丁质合成酶基因的表达水平可以大量获得突变株，本发明获得的突变株的孢子产量和形态均有明显变化。
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公开(公告)号：CN103290077A
公开(公告)日：2013-09-11
申请号：CN201310280268.0
申请日：2013-07-04
申请人： 中国科学院合肥物质科学研究院
摘要： 本发明公开了一种利用黄杆菌高效生产维生素K2的方法。将黄杆菌原始菌株在培养基上活化后，采用低能离子束及低温等离子体复合诱变方式选育高产菌株，经过含维生素K2类似物平板初筛及摇瓶发酵复筛后，高产菌株发酵单位提高50～100%；在黄杆菌发酵过程中通过添加表面活性剂，使胞内维生素K2溶至胞外，维生素K2产量提高50～200%。本发明能够能够极大的提高维生素K2发酵水平，实现高效生物合成维生素K2，为实现维生素K2的大规模工业化发酵提供了可能，使用方便。
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公开(公告)号：CN118562692A
公开(公告)日：2024-08-30
申请号：CN202311770189.8
申请日：2023-12-21
申请人： 中国科学院合肥物质科学研究院
摘要： 一株大肠杆菌及其制备重组人源Ⅲ型胶原蛋白的方法，大肠杆菌为大肠杆菌hf_#imgabs0#M_E.coli_rCOL3A1，已保藏于中国典型培养物保藏中心（CCTCC），保藏日期为2023年9月25日，菌种保藏编号为CCTCC NO:M 20231780。本发明所选择的序列完全来自于人的Ⅲ型胶原蛋白区域，在不影响氨基酸序列的前提下进行密码子的优化；采用大肠杆菌表达系统，生产成本较低；将目的蛋白与蛋白融合标签进行连接，大大提高蛋白的可溶性，解决了包涵体的问题；目的蛋白纯度与产量较高，发酵产量可达到911 mg/L目的蛋白；本发明所获得的重组人源Ⅲ型胶原蛋白序列及结构更接近于人体Ⅲ型胶原蛋白，有着良好的生物活性和较低的免疫原性。
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