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公开(公告)号：CN104774829B
公开(公告)日：2017-10-31
申请号：CN201510195795.0
申请日：2015-04-22
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N9/88 , C07K2319/00 , C12P13/02 , C12P21/02 , C12Y402/01084
Abstract: 本发明公开了一种比酶活和稳定性提高的融合型腈水合酶，属于基因工程领域。本发明将来源于恶臭假单胞菌的腈水合酶在大肠杆菌中高效表达并采用亚基融合策略提高稳定性及产物耐受性。本发明方法简单高效安全，能够在较短的表达周期里获得稳定性高，产物耐受性强的大量可溶性腈水合酶，有利于在简单条件下进行大规模工业生产，以及进一步对融合型腈水合酶成熟机制的理论研究。
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公开(公告)号：CN107236752A
公开(公告)日：2017-10-10
申请号：CN201710324067.4
申请日：2017-05-09
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一种重组大肠杆菌的构建方法，包括以下步骤：敲除大肠杆菌中天冬氨酸激酶的编码基因lysC、泛酸合成酶的编码基因panC和葡萄糖转运蛋白EⅡCBGlc的编码基因ptsG，并用PL启动子过表达panD基因，得到重组大肠杆菌。本发明还提供了上述方法构建的重组大肠杆菌发酵生产β‑丙氨酸的方法。本发明构建的重组大肠杆菌在改良的无机盐培养基中进行上罐补料发酵，其β‑丙氨酸的产量可高达18.4g/L，生产强度达到0.61g/L·h，而未经本发明的方法改造的大肠杆菌B0016‑050的β‑丙氨酸的产量仅为5.2mg/L。
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公开(公告)号：CN104789566B
公开(公告)日：2017-09-29
申请号：CN201510203088.1
申请日：2015-04-24
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种启动子及其应用，属于微生物基因工程领域。本发明所述方法中涉及的启动子Pd(‑35～‑10)HpaII基因是在启动子PHpaII的基础上对其核心区进行串联改造而形成的。在新启动子Pd(‑35～‑10)HpaII控制转录下，重组纳豆激酶的纤溶活力高达200.83FU/ml。该方法高效安全，能够有效提高纳豆激酶的表达量，且为进一步研究启动子对异源基因表达的影响提供了理论基础。
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公开(公告)号：CN106636048A
公开(公告)日：2017-05-10
申请号：CN201611149184.3
申请日：2016-12-14
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N9/88 , A61K38/00 , C12Y403/01005
Abstract: 本发明公开了一株酶活提高的苯丙氨酸脱氨酶突变体，属于蛋白质工程。本发明提供的苯丙氨酸脱氨酶突变体S73N的比酶活为2.22U/mg，较原酶的1.78U/mg提高了25％；kcat(s‑1)较原酶的1.650s‑1提高了26.7％。
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公开(公告)号：CN106497905A
公开(公告)日：2017-03-15
申请号：CN201611149189.6
申请日：2016-12-14
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N9/88 , A61K38/00 , C12N15/70 , C12Y403/01005
Abstract: 本发明公开了一株鱼腥藻来源的苯丙氨酸脱氨酶的突变体，属于蛋白质工程。本发明得到的苯丙氨酸脱氨酶E75L，包括抗胰蛋白酶降解能力以及抵抗低pH的能力，都相比野生酶有了很大的提高。本发明提供的苯丙氨酸脱氨酶E75L，将在一定程度上促进苯丙氨酸脱氨酶在口服治疗苯丙酮尿症(PKU)中的应用。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN105505931A
公开(公告)日：2016-04-20
申请号：CN201610004239.5
申请日：2016-01-05
Applicant: 江南大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/75 , C12N1/21 , C12N9/54 , C12N9/48
CPC classification number: C12N9/54 , C12N9/485 , C12Y304/11011
Abstract: 本发明公开了一种强启动子及其在提高纳豆激酶表达的应用，属于微生物基因工程领域。本发明涉及的一系列启动子基因是在启动子PP43和/或PHpaII的基础上对其进行n次(n≥1)串联形成的。在强启动子PHpaII-PHpaII-PP43控制转录下，重组纳豆激酶的纤溶活力高达264.2FU/ml。该方法高效安全，能够有效提高纳豆激酶的表达量，且为进一步研究启动子对异源基因表达的影响提供了理论基础。
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公开(公告)号：CN102093410B
公开(公告)日：2015-04-22
申请号：CN201110004065.X
申请日：2011-01-11
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种用硅胶层析柱法分离纯化甘油磷酸胆碱(L-α-GPC)的方法，属于脂质开发应用技术领域。包括如下步骤：酶解反应液为原料，先用离子交换树脂除去Ca2+和Cl-，然后将水相转化成醇相，通过硅胶层析柱将L-α-GPC和GPE、LPC及其它副产物分开，活性炭脱色，真空浓缩除水，得到无色、透明的产品；醇解反应液为原料，直接过硅胶柱分离，阳离子交换树脂除Na+，活性炭脱色，真空浓缩除水，得到产品。产品的指标检测：化学纯度99.6％，光学纯度ee：99％，mp142-143℃，(C＝2.6，H2O含量16％，pH＝5.8)。本发明为分离纯化L-α-GPC提供了一种新的思路和方法，也增加了硅胶柱层析分离纯化方法在脂质科学中的应用。
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公开(公告)号：CN104152523A
公开(公告)日：2014-11-19
申请号：CN201410364770.4
申请日：2014-07-28
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种生产高光学纯度D-苯丙氨酸的方法，属于酶学与酶工程技术领域。本发明采用介孔材料MCM-41为载体固定苯丙氨酸脱氨酶，不对称拆分DL-苯丙氨酸生产高光学纯度的D-苯丙氨酸。通过构建重组菌，高效表达，获得大量的重组酶，将重组酶进行固定化，制备高稳定性的酶催化剂，搭建填充床反应器，半连续生产D-苯丙氨酸。采用本方法可以获得高纯度的D-苯丙氨酸，以满足工业化生产需求。
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公开(公告)号：CN102676438B
公开(公告)日：2013-06-12
申请号：CN201210189014.3
申请日：2012-06-08
Applicant: 江南大学
Abstract: 一株产α-酮戊二酸的菌株及用其发酵生产α-酮戊二酸的方法，属于微生物基因工程技术领域。本重组菌命名为大肠杆菌（Escherichiacoli）B0013-090A，已保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号CCTCC NO：M 2012173，该菌株由大肠杆菌（Escherichiacoli）B0013-070B（保藏编号CCTCC NO：M 2012071）经基因工程改造获得。用其动态调控发酵生产α-酮戊二酸，发酵36~48h产α-酮戊二酸水平达到9%，且所产α-酮戊二酸化学纯度达到95%以上。该工艺以葡萄糖或淀粉、糖蜜或生物柴油副产甘油为原料，工业化生产α-酮戊二酸，其使用价值非常巨大。本发明发酵培养基简单清洁，既有利于降低生产成本，也有利于简化后提取步骤获得高品质产品。操作工艺简单易行，有利于在工业化规模生产中推广使用。
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