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公开(公告)号:CN111705027A
公开(公告)日:2020-09-25
申请号:CN202010508135.4
申请日:2020-06-05
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种利用微生物发酵生产乙偶姻的方法,属于生物工程技术领域。本发明构建的基因工程菌株B.subtilis 6-7ΔacuBΔacoBΔrex于5L发酵罐中培养96h得到67.5g·L-1的乙偶姻,乙偶姻的生产效率提高至0.7g·L-1·h-1,乙偶姻摩尔得率为0.92,相对于原始菌株B.subtilis 6-7,乙偶姻摩尔得率提高了37%。此外,基因工程菌株B.subtilis 6-7ΔacuBΔacoBΔrex不含抗性基因,得到的产物可直接用于食品加工中,安全高效。
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公开(公告)号:CN111690624A
公开(公告)日:2020-09-22
申请号:CN202010501634.0
申请日:2020-06-04
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种利用微生物合成2-O-α-D-甘油葡糖苷的方法,属于基因工程技术领域。本发明所述突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明所述突变体是在肠膜明串珠菌来源的蔗糖磷酸化酶的基础上,进行定点突变实现蔗糖磷酸化酶酶活的提高的,将突变体酶在大肠杆菌中表达,并用作全细胞催化剂生产2-O-α-D-甘油葡糖苷,在5L发酵罐水平,可短时间内生产大量的2-O-α-D-甘油葡糖苷,这有利于扩大蔗糖磷酸化酶生产2-O-α-D-甘油葡糖苷工业化应用前景,实现大规模工业化应用。
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公开(公告)号:CN111690585A
公开(公告)日:2020-09-22
申请号:CN202010618499.8
申请日:2020-06-30
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了rcsB基因缺失的重组粘质沙雷氏菌及其应用,属于生物技术领域。本发明提供了一株可高产灵菌红素的粘质沙雷氏菌工程菌JNB5-1ΔrcsB,此粘质沙雷氏菌工程菌JNB5-1ΔrcsB是通过敲除粘质沙雷氏菌JNB5-1中编码转录调控因子RcsB的基因获得的,将此粘质沙雷氏菌工程菌JNB5-1ΔrcsB接种至LB液体培养基中发酵24h,即可使发酵液中灵菌红素的产量高达116.48mg/L,是野生型粘质沙雷氏菌JNB5-1的2.28倍。
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公开(公告)号:CN109370993B
公开(公告)日:2020-09-04
申请号:CN201811430826.6
申请日:2018-11-28
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种酶活提高的苯乙烯单加氧酶突变体及其应用,属于基因工程以及微生物工程技术领域。此突变体是通过将出发氨基酸序列为SEQ ID NO.1的苯乙烯单加氧酶的第305位氨基酸由天冬氨酸突变为甘氨酸得到的;此突变体的酶活可达99.12±1.5U/mL、Kcat/Km可达268.2±19.5mM‑1·min‑1,分别较野生型提高了1.7倍、3.4倍;此突变体的温度稳定性以及pH稳定性较野生型有了明显的提高,将此突变体在60℃下保持24h依旧可残留59%的酶活,在pH5.0的状态下保持12h依然可残留71%的酶活。
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公开(公告)号:CN108070581B
公开(公告)日:2020-09-04
申请号:CN201711354029.X
申请日:2017-12-15
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种酶活提高的L‑天冬氨酸β‑脱羧酶突变体及其应用,属于基因工程领域。本发明的突变体是在SEQIDN0.2所示的氨基酸的基础上,将第484位亮氨酸突变成甲硫氨酸。因为表达包涵体问题将构建的重组载体L484M‑pET28aN端起始密码子后一段冗余序列删除得到重组质粒L484M‑pET28a‑M。本发明得到的突变体在大肠杆菌中表达,经纯化得到的酶做酶学性质研究,pH4.5、pH5.0、pH6.5下相对酶活分别提高了40%、36%、42%。L484M和未突变酶在相同酶活不同pH条件下进行全细胞转化1h取样测定产量,在最适pH5.5条件下,产量提高48.5%。本发明表明484位氨基酸残基对酶的催化作用有较大影响,对该酶的催化机理的研究提供了一定的基础,并提高了该酶的工业应用潜力。
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公开(公告)号:CN111593038A
公开(公告)日:2020-08-28
申请号:CN202010584474.0
申请日:2020-06-23
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种稳定性提高的谷氨酰胺酶突变体,属于酶工程和微生物工程技术领域,本发明提供的谷氨酰胺酶突变体是将罗伊氏乳杆菌来源的谷氨酰胺酶亲本的第37位的酪氨酸突变为了半胱氨酸,谷氨酰胺酶突变体突变体在44℃时半衰期达到12h,其稳定性相对于突变前的谷氨酰胺酶提高了50%。
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公开(公告)号:CN109486738B
公开(公告)日:2020-08-04
申请号:CN201811507100.8
申请日:2018-12-10
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种利用重组大肠杆菌全细胞转化生产宝丹酮的方法,属于基因工程和酶工程领域。本发明克隆了来源于Bipolaris oryzae的17β‑羟基类固醇脱氢酶,并实现在E.coli BL21(DE3)中过量共表达。此全细胞转化体系的建立,首次鉴定出Bipolaris oryzae来源的17β‑HSD具有17β‑羟基甾体脱氢酶功能,并在大肠杆菌表达体系中实现了Bipolaris oryzae来源的17β‑HSD的功能鉴定。经过24h全细胞转化,1g/L ADD可转化为872.9mg/L宝丹酮。本发明为微生物工业化生产宝丹酮提供了基础。
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公开(公告)号:CN108559735B
公开(公告)日:2020-07-07
申请号:CN201810443305.8
申请日:2018-05-10
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提供一种亮氨酸脱氢酶突变体的构建及其应用,属于基因工程领域。本发明提供了SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.6及SEQ ID NO.8三个亮氨酸脱氢酶突变体,以及上述突变体或产生突变体的基因工程菌在氨化还原α‑酮酸制备光学纯手性L‑α‑氨基酸中的应用。本发明在于:所述亮氨酸脱氢酶突变体或含有突变体基因工程菌氨化还原制备L‑α‑氨基酸具有高催化活性及稳定性,能够合成高光学纯度L‑α‑氨基酸(ee>99%),如突变体酶催化L‑苯甘氨酸的转化速率提高了2.62倍,为其工业化生产提供了一种实际有效策略。
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公开(公告)号:CN111206011A
公开(公告)日:2020-05-29
申请号:CN202010147933.9
申请日:2020-03-05
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种重组谷氨酸棒杆菌及其在生产L-谷氨酸中的应用,属于生物技术领域。本发明提供了一种可高产L-谷氨酸的重组谷氨酸棒杆菌C.glutamicum DL01/pDXW-10-ppc,将此重组谷氨酸棒杆菌C.glutamicum DL01/pDXW-10-ppc接种至5-L发酵罐中发酵48h,即可使发酵液中L-谷氨酸的产量高达136.09±5.53g/L、糖酸转化率高达58.9%,分别较野生型谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)G01提高了45.5%和13.7%。
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公开(公告)号:CN111172090A
公开(公告)日:2020-05-19
申请号:CN202010095689.6
申请日:2020-02-17
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种用离子转运蛋白促进钝齿棒杆菌合成L-精氨酸的方法,具体公开了一种通过过表达单价阳离子/H+逆转运蛋白Mrp1A以及阳离子转运ATP酶CTAP1提高L-精氨酸产量的方法,属于生物工程技术领域。本发明成功实现了对基因mrp1和ctap1的敲除和过表达,通过对胞内[Na+]和[K+]的测定,明确离子转运蛋白在离子浓度、pH稳态和渗透压方面的调节作用。采用5L发酵罐分批发酵策略,优化发酵条件,最终重组钝齿棒杆菌5-5(mrp1ctap1)发酵至96h,重组菌的L-精氨酸产量达到65.3g/L,产率为0.395g/g,比钝齿棒杆菌SYPA5-5提高了39.1%。
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