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公开(公告)号：CN101144078A
公开(公告)日：2008-03-19
申请号：CN200710084566.7
申请日：2005-03-08
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种表达传染性法氏囊病毒VP1基因编码蛋白永生化细胞制备方法。反转录获得传染性法氏囊病毒基因组cDNA，PCR扩增VP1基因片段与哺乳动物细胞真核表达pCI－neo构建成重组表达质粒。在Lipofectamine2000介导下转染Vero细胞，在G418的抗性下，通过极限稀释法克隆单细胞，经PCR、RT－PCR、Southern blot、Northern blot、IFA/IPMA检测，获得含目的基因的克隆化细胞系，经反复传代培养后不丢失。这些细胞系可作为研究传染性法氏囊病毒基因编码蛋白对宿主细胞基因表达调控的载体，以及将表达传染性法氏囊病毒VP1基因编码蛋白应用于传染性法氏囊病的免疫接种。本发明应用基因工程技术、细胞重组技术制备表达传染性法氏囊病毒VP1基因编码蛋白的永生细胞，具有重复性强、稳定性好，再生能力强等特点。
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公开(公告)号：CN101139588A
公开(公告)日：2008-03-12
申请号：CN200710084565.2
申请日：2005-03-08
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种表达传染性法氏囊病毒VP5基因编码蛋白永生化细胞制备方法。反转录获得传染性法氏囊病毒基因组cDNA，PCR扩增VP5基因片段与哺乳动物细胞真核表达pCI－neo构建成重组表达质粒。在Lipofectamine 2000介导下转染Vero细胞，在G418的抗性下，通过极限稀释法克隆单细胞，经PCR、RT－PCR、Southern blot、Northern blot、IFA/IPMA检测，获得含目的基因的克隆化细胞系，经反复传代培养后不丢失。这些细胞系可作为研究传染性法氏囊病毒基因编码蛋白对宿主细胞基因表达调控的载体，以及将表达传染性法氏囊病毒VP5基因编码蛋白应用于传染性法氏囊病的免疫接种。本发明应用基因工程技术、细胞重组技术制备表达传染性法氏囊病毒VP5基因编码蛋白的永生细胞，具有重复性强、稳定性好，再生能力强等特点。
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公开(公告)号：CN101121748A
公开(公告)日：2008-02-13
申请号：CN200710070131.7
申请日：2007-07-20
Applicant: 浙江大学
IPC: C07K16/08
Abstract: 本发明抗传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP4蛋白单克隆抗体属于生物技术领域，涉及基因工程。将IBDV VP4基因克隆于原核表达载体pET－28a，在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达；分离包涵体，用8M尿素溶解，经镍螯合亲和层析纯化获得VP4重组蛋白。用VP4重组蛋白免疫BALB/c小鼠，取其脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0进行细胞融合，以HAT培养基选择性培养后，以VP4重组蛋白和IBDV感染细胞进行双重ELISA筛选和有限稀释法克隆化，获得分泌抗IBDV VP4蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株，其中4C3、6A4和6H8腹水的ELISA效价分别为：6.4×105、2.6×106和5.2×106，均能特异识别IBDV感染细胞的病毒蛋白，其Ig亚型重链为IgG1，轻链为κ。
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公开(公告)号：CN1789415A
公开(公告)日：2006-06-21
申请号：CN200510061379.8
申请日：2005-11-02
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种重组水禽流感病毒H5亚型血凝素(HA)抗原、制备方法及其用途。本发明的重组水禽流感病毒H5亚型血凝素抗原，它采用大肠杆菌原核表达系统表达了我国水禽流感病毒分离株的血凝素基因，利用表达的血凝素蛋白作为抗原可检测H5亚型流感病毒及感染产生的抗血凝素蛋白抗体。虽然A型流感病毒亚型众多，但血凝素抗原是流感病毒分类和诊断基础，因此，基于重组水禽流感病毒血凝素蛋白抗原建立的诊断技术可以检测鸭、鹅等水禽流感病毒的感染。本发明所生产的重组膜蛋白不仅生产容易，操作简单而且纯度较高，具有良好的特异性和敏感性。且重组膜蛋白纯化后包被聚苯乙烯微量反应板也可建立敏感性更高的ELISA诊断方法。
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公开(公告)号：CN1588076A
公开(公告)日：2005-03-02
申请号：CN200410066998.1
申请日：2004-09-28
Applicant: 浙江大学
IPC: G01N33/547 , G01N33/535
Abstract: 本发明公开了一种猪II型圆环病毒(PCV2)抗体间接ELISA诊断试剂盒。试剂盒内设有抗体检测板，酶结合物工作液，阳性对照，阴性对照，样品稀释液，10×浓缩洗涤液，显色液A，显色液B和终止液，该试剂盒的检测板为包被PCV2重组去核定位信号衣壳蛋白(dCap)的可拆96孔酶标板，酶结合物工作液为HRP标记山羊抗猪IgG多克隆抗体，阳性对照为猪PCV2标准阳性血清，阴性对照为猪标准阴性血清。本发明有益的积极效果是：检测试剂盒、特异性强、敏感性高、操作简单，易于大范围推广应用，具有广阔的市场前景。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN1584597A
公开(公告)日：2005-02-23
申请号：CN200410025286.5
申请日：2004-06-15
Applicant: 浙江大学
IPC: G01N33/543 , G01N33/547 , G01N33/52 , G01N21/25
Abstract: 本发明公开了一种猪圆环病毒2型(PCV2)抗原或抗体检测ELISA试剂盒。试剂盒内试剂盒内设有抗原检测板，酶结合物工作液，阳性对照，阴性对照，样品稀释液，10×浓缩洗涤液，显色液A，显色液B和终止液，其中，抗原检测板为吸附抗猪圆环病毒2型去核定位信号肽衣壳蛋白单克隆抗体mAb1的可拆96孔酶标板，酶结合物工作液为辣根过氧化物酶标记抗猪圆环病毒2型去核定位信号肽衣壳蛋白单克隆抗体mAb2，阳性对照为重组猪圆环病毒2型去核定位信号肽衣壳蛋白溶液，阴性对照为牛血清白蛋白溶液。本发明有益的积极效果是：检测ELISA试剂盒操作简单，易于大范围推广应用，具有广阔的市场前景。
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公开(公告)号：CN1460718A
公开(公告)日：2003-12-10
申请号：CN03116340.8
申请日：2003-04-11
Applicant: 浙江大学
IPC: C12N15/82 , C12N15/50 , C12N15/74 , C12N1/21 , C12N5/10 , C12Q1/68 , A01H1/00 , A01H4/00 , A01H5/00
Abstract: 本发明公开了传染性支气管炎病毒纤突蛋白转基因马铃薯的生产方法。传染性支气管炎病毒纤突蛋白基因插入到植物表达载体pBI121上，经三亲交配的方法把重组表达载体导入农杆菌中，外源基因经农杆菌介导法转化马铃薯茎段，通过再生植株的抗生素抗性筛选和PCR、Southern blot及Northern blot等分子分析，获得表达传染性支气管炎病毒纤突蛋白的转基因植株。用这些表达传染性支气管炎病毒纤突蛋白的转基因植物直接饲喂鸡或用转基因植物中纯化出的传染性支气管炎病毒纤突蛋白作为注射剂注射给药的方式免疫鸡，引起了鸡对该抗原蛋白的免疫应答反应，说明转基因表达产物具有良好的免疫原性，为转基因植物生产传染性支气管炎疫苗打下基础。
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公开(公告)号：CN119529113A
公开(公告)日：2025-02-28
申请号：CN202411730406.5
申请日：2024-11-28
Applicant: 浙江大学
IPC: C07K19/00 , A61K39/295 , A61K39/145 , A61K39/12 , A61K39/385 , A61P31/16 , C12N15/70 , C12N15/62 , C07K1/34 , C12R1/19
Abstract: 本发明提供了一种基于PCV2VLPs的纳米抗原展示平台及制备方法和应用，属于免疫医药技术领域。本发明提供了一种猪圆环病毒2衍生的纳米颗粒，所述纳米颗粒由C端融合SpyTag003的猪圆环病毒2的Cap蛋白组装而成。本发明基于原核表达的PCV2VLPs技术，利用SpyTag003/SpyCatcher003系统，将其他病毒抗原蛋白搭载在PCV2VLPs上面，构建一种纳米抗原展示平台，并开展免疫原性研究及攻毒保护试验，为研制基于PCV2VLPs技术的多联亚单位疫苗及相关生物制品奠定理论基础。
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公开(公告)号：CN118526576A
公开(公告)日：2024-08-23
申请号：CN202410459669.0
申请日：2024-04-17
Applicant: 浙江大学
IPC: A61K38/21 , A61K47/64 , A61K48/00 , A61P31/14 , C12N15/21 , C12N15/20 , C12N7/01 , C12N15/861 , C12N15/62 , C12R1/92
Abstract: 本发明涉及生物医学技术领域，涉及干扰素亚型抗病毒应用，涉及一种重组腺病毒及其在制备抗PEDV药物方面的应用。一种重组腺病毒，该重组腺病毒包括猪干扰素IFN‑α6，IFN‑α14或IFN‑ω5中的一种和穿透肽的基因序列，所述穿透肽的氨基酸序列为PPRRRQRRKKRG，如SEQ ID NO.4所示。本发明通过体外过表达的方法筛选高效抗病毒干扰素亚型基因，将干扰素通过原核表达结构优化及腺病毒载体包装的方法进行干扰素递送。结合细胞穿透肽的重组腺病毒能够更高效发挥抗病毒效果，腺病毒载体基因递送系统高效地使靶细胞自主表达干扰素，简化干扰素递送流程。
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公开(公告)号：CN116515775B
公开(公告)日：2024-04-16
申请号：CN202310632792.3
申请日：2023-05-31
Applicant: 浙江大学
IPC: C12N7/01 , C12N15/34 , C12N15/85 , C12N15/65 , A61K39/245 , A61K39/12 , A61K39/295 , A61P31/22 , A61P31/20 , C12R1/93
Abstract: 本发明提供了一种囊膜表达猪圆环病毒2衣壳蛋白的伪狂犬病病毒及其应用，涉及病毒基因工程技术领域。本发明以伪狂犬病病毒(PRV)减毒疫苗株作为载体，用以表达外源免疫原，外源免疫原仅替换PRV非必须囊膜蛋白的胞外区，保留原有囊膜蛋白的跨膜区和胞内区，使得一个或多个外源免疫原表达在病毒囊膜上，而不改变PRV其它自身免疫原的基因，在重组病毒粒子被机体免疫系统识别的过程中，宿主免疫系统识别病毒粒子上所有免疫原(外源免疫原和PRV自身免疫原)并启动免疫应答，从而发挥基于重组PRV病毒粒子的二联或多联疫苗的保护作用。
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