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公开(公告)号：CN116121303A
公开(公告)日：2023-05-16
申请号：CN202211248852.3
申请日：2022-10-12
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N15/866 , C12N15/66 , C12N15/41 , C07K14/085 , A61K39/125 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了猪脑心肌炎病毒样颗粒及其制备方法和应用。本发明将EMCV的P1、3CD基因扩增后，然后分别连接到pFastBacDual载体的PpH和Pp10启动子下，构建了重组转移载体pFBD‑P1‑3CD，将pFBD‑P1‑3CD转化至E.coli DH10Bac感受态细胞，通过筛选蓝白斑获得了重组杆粒rBacmid‑P1‑3CD。将rBacmid‑P1‑3CD转染至sf9昆虫细胞，最后通过蔗糖密度梯度纯化获得病毒样颗粒EMCV‑VLPs。实验证明获得的EMCV‑VLPs具有良好的免疫原性，可以诱导机体产生良好的免疫反应，能够作为战略储备疫苗用于EMCV的防控。
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公开(公告)号：CN116041547A
公开(公告)日：2023-05-02
申请号：CN202211739856.1
申请日：2022-12-30
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种O型口蹄疫病毒多表位病毒样颗粒抗原及其制备方法和应用。所述的O型口蹄疫病毒多表位病毒样颗粒抗原是选取O型口蹄疫病毒5个拓扑型的代表毒株O/Tibet/CHA/99，O/Mya98/BY/2010，O/HN/CHA/93、O/XJPS/CHA/2017和Cathay的抗原表位依次顺序串联后与SpyCather和噬菌体AP205基因串联，然后再与前4个毒株的表位串联，形成的重组抗原蛋白，该重组蛋白能够自组装成VLP抗原。免疫学试验结果显示，该VLP抗原具有良好的抗原性，其与O型口蹄疫病毒的抗原反应性没有明显的差异，可替代口蹄疫病毒灭活抗原建立检测方法。利用该VLP抗原制成的疫苗不仅能诱导产生高水平的保护性抗体，而且能保护免疫动物抵抗病毒攻击。且不受动物种属限制，对猪牛羊O型口蹄疫均有免疫保护作用。
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公开(公告)号：CN111944768B
公开(公告)日：2022-10-25
申请号：CN202010724770.6
申请日：2020-07-24
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N7/01 , C12N15/85 , A61K39/135 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种耐热型口蹄疫重组病毒株及其在制备口蹄疫灭活疫苗中的应用。本发明所述的一种耐热型口蹄疫重组病毒株，命名为rM10，其是由SEQ ID NO.1所示的感染性cDNA通过病毒拯救获得的。实验证明，该重组病毒株的衣壳完全裂解的温度比野生毒株病毒的高，表明该拯救获得的口蹄疫重组病毒株rM10比野生毒株更耐热。本发明的提出为进一步推进热稳定性疫苗的研究和应用，为重大疫病防控及彻底净化提供了技术支持。同时本发明的提出为制备稳定性口蹄疫疫苗奠定了基础。
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公开(公告)号：CN110759348B
公开(公告)日：2022-10-25
申请号：CN201911078617.4
申请日：2019-11-07
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于纳米材料领域，涉及一种具有多级孔结构的二氧化硅材料的制备方法。本发明以原硅酸四乙酯为硅源，三乙醇胺为碱性催化剂，水杨酸钠和十六烷基三甲基溴化铵为结构导向剂和模板剂，在水溶液中制备具有多级孔结构的二氧化硅材料。该方法制备的二氧化硅材料粒径均一、孔体积较大，不仅具有从内到外发射状的树枝状大孔道结构，而且具有尺寸较小的介孔结构。本发明的方法制备简单、成本较低，重复性好，环境友好，粒径大小在50~500 nm范围可调，而且可以实现大规模制备。本发明制备的具有多级孔结构的二氧化硅材料可用于药物递送载体，尤其是对小分子药物和大分子量蛋白的共同负载具有显著的优势。
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公开(公告)号：CN115028744A
公开(公告)日：2022-09-09
申请号：CN202210771918.0
申请日：2022-06-30
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K19/00 , C12N15/70 , A61K39/135 , A61P31/14 , G01N33/569 , C12R1/19
Abstract: 本发明提供了一种口蹄疫病毒VP1嵌合纳米颗粒及其制备方法和应用，涉及生物医药技术领域。本发明所述VP1嵌合纳米颗粒，为将O型/A型口蹄疫病毒结构蛋白VP1和天然蛋白质纳米骨架蛋白共价连接得到。本发明在制备所述VP1嵌合纳米颗粒时，通过蛋白骨架共价连接口蹄疫VP1结构蛋白，将其展示在纳米笼外部，并且采用小泛素样修饰蛋白原核表达系统，既促进了目的蛋白的正确折叠，提高可溶性表达，又兼顾了原核表达系统表达效率高，成本低等优点。本发明的O型/A型口蹄疫病毒VP1嵌合纳米颗粒可在制备用于预防O型/A型口蹄疫病毒引起疾病的疫苗中应用，也可在制备用于检测O型/A型口蹄疫病毒的检测试剂中应用。
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公开(公告)号：CN114437183A
公开(公告)日：2022-05-06
申请号：CN202210146783.9
申请日：2022-02-17
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K14/09 , C07K17/08 , C07K17/04 , A61K39/135 , A61K39/385 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了一种基于金属有机框架仿生矿化提高病毒样颗粒(VLPs)热稳定性的方法。本发明运用二甲基咪唑与硝酸锌配位作用成功将VLPs包封在沸石咪唑框架‑8(ZIF‑8)内部从而形成VLPs‑ZIF‑8纳米颗粒。本发明通过在病毒样颗粒外封装由金属离子与有机物配位形成的框架架构，提高了VLPs疫苗的耐热性，解决了冷链运输所带来的大量人力、物力消耗等问题。本发明制备的ZIF‑8金属有机框架成本低廉、方法简单、合成过程温和。金属有机框架仿生矿化的VLPs疫苗的细胞免疫应答水平明显提升，本发明的提出为提升VLPs疫苗细胞免疫水平提供了新的技术手段。
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公开(公告)号：CN109652593B
公开(公告)日：2022-03-22
申请号：CN201910013717.2
申请日：2019-01-07
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种检测A型塞内卡病毒的荧光定量PCR引物及试剂盒，所述的引物是基于塞内卡病毒L/VP4区段基因序列设计的，其上游引物序列如SEQ ID NO.1所示，下游引物序列如SEQ ID NO.2所示。本发明所述的试剂盒可以在加入TRIzol试剂将病毒灭活后在普通实验室进行检测，安全方便；对A型塞内卡病毒能定量检测，最低检出限浓度为6.4×10°拷贝/μL，灵敏度高；对A型口蹄疫病毒cDNA、O型口蹄疫病毒cDNA、猪瘟病毒cDNA无扩增反应，特异性好，可用于检测A型塞内卡病毒感染动物的样品如血液、组织中的病毒，也可用于A型塞内卡病毒的基础研究及疫苗研制、生产过程中病毒滴度的检测等，具有良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN113252891A
公开(公告)日：2021-08-13
申请号：CN202110021181.6
申请日：2021-01-08
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/569
Abstract: 本发明公开一种用于检测猪塞尼卡病毒A抗体的试剂盒。本发明的检测塞尼卡病毒A抗体的试剂盒至少有包被有塞尼卡病毒A兔抗血清的酶标板和塞尼卡病毒A豚鼠抗血清。本发明具有敏感性高、特异性好、且操作简单、结果稳定、适合于批量检测，可评估未免疫猪群中塞尼卡病毒A的感染情况，及疫苗免疫后猪群的特异性抗体水平的优点。
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公开(公告)号：CN109799345B
公开(公告)日：2021-08-03
申请号：CN201811492145.2
申请日：2018-12-07
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/569 , G01N33/543 , G01N33/535
Abstract: 本发明公开一种采用C型口蹄疫病毒样颗粒(VLPs)制备的检测试剂盒及制备方法。本发明的试剂盒的制备方法是将HRP直接标记在跟被检抗体同时作用的竞争性抗体上，其内酶标板包被的C型口蹄疫病毒样颗粒是由C型口蹄疫病毒的结构蛋白VP0、VP1和VP3组装而成。本发明采用的VLPs能高效组装，且不影响其诊断效率，有利于降低诊断制剂的成本。本发明方法相对现有技术的检测步骤有所减少，实验操作简单，工作量小，用时短，并可提高诊断试剂的特异性和敏感性。
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公开(公告)号：CN112415207A
公开(公告)日：2021-02-26
申请号：CN202011163418.6
申请日：2020-10-27
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/68 , G01N33/569 , G01N33/58 , G01N33/543
Abstract: 本发明提供了一种基于抗猪流行性腹泻病毒变异毒株重组S2蛋白的IgA抗体ELISA检测试剂盒，属于畜牧检测技术领域。本发明的ELISA检测试剂盒是以流行的PEDV变异毒株(基因型GⅡb)为亲本毒株，在体外成功的表达了其完整的S2蛋白，然后将完整S2蛋白为抗原包被至酶标板。所述试剂盒能有效同时检测血清和猪口腔粘液类型样本。采用本发明提供的试剂盒成功建立了一种敏感性强、特异性高、稳定性、重复性好且易于制备的PEDV特异性IgA抗体的ELISA检测方法，该方法对PEDV的临床诊断及防控具有重要临床实践意义。
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