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公开(公告)号：CN119709741A
公开(公告)日：2025-03-28
申请号：CN202411752458.2
申请日：2024-12-02
Applicant: 江南大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/77 , C12N15/31 , C12N15/65 , C12Q1/6897 , G01N21/64 , C12R1/15
Abstract: 本发明公开了一种谷氨酸棒杆菌中的BDPs活性表征温敏型逆变器及其制备方法，本发明的温敏型逆变器开关可以根据温度的变化进行基因的精确控制，在合适的时间段开启或关闭特定基因的表达，这种调控方式简化了在不同阶段对不同基因的调控流程，从而在代谢工程中实现更精确和灵活的控制；通过温度调节，可以有效提高代谢途径中关键酶的活性，最大化目标产物的合成量。
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公开(公告)号：CN118307650A
公开(公告)日：2024-07-09
申请号：CN202410237180.9
申请日：2024-03-01
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种多突变位点的YeeJ反向自转运蛋白突变体及其应用，属于基因工程及酶工程技术领域，从大肠杆菌(Escherichiacoli)K‑12菌株MG1655的基因组中通过易错PCR和高通量筛选得到了多突变位点的YeeJ反向自转运蛋白突变体，提供了通用型的YeeJ反向自转运体系，成功表面展示了PETase对PET较高的降解效率，达到了目前报道最高的620mg/L/d，对污水中微塑料的降解提供了技术保障。
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公开(公告)号：CN116875595A
公开(公告)日：2023-10-13
申请号：CN202310617466.5
申请日：2023-05-29
Applicant: 江南大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/77 , C12N15/65 , C12N1/21 , C12R1/15
Abstract: 本发明公开了一种谷氨酸棒杆菌中的BDPs活性表征新型生物传感器BDP‑SWITCH及其制备方法，其包括，所述生物传感器包括一个设有BDPcat和BDPicl启动子的质粒。本发明提供了一种能够用于高通量筛选的表征BDPs强度的荧光生物传感器，为谷氨酸棒杆菌高通量挖掘天然BDPs提供了有效工具，同时为原核生物中BDPs筛选提供了新的思路。
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公开(公告)号：CN113652442B
公开(公告)日：2023-04-07
申请号：CN202110998111.6
申请日：2021-08-27
Applicant: 江南大学
IPC: C12N15/77
Abstract: 本发明基于pEC‑XK99E中的pGA1棒杆菌复制子这一在谷氨酸棒杆菌中拷贝数约为30的低拷贝质粒复制子，将复制蛋白Rep的325位异亮氨酸突变为苏氨酸、398位编码丝氨酸的氨基酸变为同义密码子，成功获得了一种可以提高棒杆菌质粒拷贝数的复制子pGA1‑Rep‑I325T/S398。将该复制子用于高拷贝质粒的构建，携带有pGA1‑Rep‑I325T/S398复制子的质粒pEC‑XK99E‑Rep‑T/S在谷氨酸棒杆菌中复制后，通过质粒体外抽提证实增加了菌体中质粒的数量。构建pEC‑XK99E‑EGFP‑Rep‑T/S质粒，通过测定不同菌体量下的荧光值，与为突变质粒相比荧光量增加三倍即改造后的质粒提高了蛋白的表达量。同时通过荧光定量PCR手段，测定突变后拷贝数为野生型复制子的质粒的8倍约为245。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN115786340A
公开(公告)日：2023-03-14
申请号：CN202211376459.2
申请日：2022-11-04
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种提高leaderless启动子活性的方法及其应用，包括，在leaderless启动子和目的基因之间插入一段SEQ ID NO.2所示的62bp的核酸序列、SEQ ID NO.3所示的13bp的SD序列和SEQ ID NO.4所示的5bp的翻译偶联结构，制得高活性启动子。本发明提出的方法对于提高leadless启动子的活性具有很好的普适性；在所测试的另外两个leaderless启动子H36和Cg0124中，也观察到显著的启动子活性提高效果。
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公开(公告)号：CN114574618A
公开(公告)日：2022-06-03
申请号：CN202210219429.4
申请日：2022-03-08
Applicant: 江南大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6851 , C12Q1/6806 , C12N15/11 , C12R1/84
Abstract: 本发明公开了一种巴斯德毕赤酵母不同生长阶段的内参基因及其引物和应用，所述内参基因为TIF1基因和/或RPL19A基因。本发明获得了适用于巴斯德毕赤酵母不同生长阶段的实时荧光定量内参基因，并设计了候选内参基因的实时荧光定量引物，该引物特异性强，扩增效率高，填补了巴斯德毕赤酵母不同生长阶段没有针对性的内参基因的现状。
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公开(公告)号：CN114574617A
公开(公告)日：2022-06-03
申请号：CN202210219172.2
申请日：2022-03-08
Applicant: 江南大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6851 , C12Q1/04 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种巴斯德毕赤酵母不同碳源下的内参基因及其引物和应用，所述内参基因为Eif5a基因和/或RPL14B基因。本发明提供的内参基因在巴斯德毕赤酵母不同碳源培养基中稳定表达，为蛋白生产过程中相关功能基因的表达定量提供可靠的分析依据；弥补了巴斯德毕赤酵母实时荧光定量内参基因的缺失，有利于菌株构建工程和重组蛋白生产，为今后开展基因表达研究提供了可靠依据。
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公开(公告)号：CN108085287B
公开(公告)日：2021-08-24
申请号：CN201711334447.2
申请日：2017-12-14
Applicant: 江南大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/113 , C12N15/63 , C12P21/00 , C12R1/15
Abstract: 本发明提供了一种重组谷氨酸棒状杆菌，其能有效解决现有谷氨酸棒状杆菌外源蛋白表达量低的技术问题。该重组谷氨酸棒状杆菌中的肽聚糖内切酶基因mepA、细胞膜表面阴离子通道蛋白基因porB和胞内蛋白酶基因clpC均被敲除，同时ABC转运体基因Ncgl0909过量表达。此外，本法还提供了该重组谷氨酸棒状杆菌的制备方法及其应用。
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公开(公告)号：CN109694841A
公开(公告)日：2019-04-30
申请号：CN201910107941.8
申请日：2019-02-02
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提供了一种谷氨酸棒状杆菌重组菌，其能解决传统的谷氨酸棒状杆菌的宿主菌外源蛋白表达量较低，限制了其作为外源蛋白表达宿主的应用程度的技术问题。一种谷氨酸棒状杆菌重组菌，其特征在于：谷氨酸棒状杆菌重组菌的NCgl1689基因不能正确地转录或翻译。本发明改造的谷氨酸棒状杆菌重组菌其通过阻断NCgl1689基因的转录和翻译，实现外源蛋白的高表达。
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