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公开(公告)号:CN107045063B
公开(公告)日:2019-01-25
申请号:CN201610084498.3
申请日:2016-02-06
Applicant: 华中农业大学
IPC: G01N33/68
Abstract: 本发明属于生化免疫和分析技术领域,具体涉及肺结核相关血清标识蛋白TIMP‐1及其应用。本发明利用细胞因子和全蛋白芯片对宿主蛋白进行筛选,提供了一种可检测肺结核相关血清生物标识蛋白即蛋白基质金属蛋白酶抑制因子TIMP‐1,该抑制因子TIMP‐1的蛋白质序列如SEQ ID NO:1所示。本发明的抑制因子TIMP‐1可在制备肺结核病血清诊断试剂盒中作为标识抗原蛋白应用。
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公开(公告)号:CN108977413A
公开(公告)日:2018-12-11
申请号:CN201710415514.7
申请日:2017-06-05
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N7/01 , A61K39/265 , A61P31/22 , C12R1/93
Abstract: 本发明属于动物病毒学和基因工程技术领域,具体涉及一种表达双拷贝gD基因的重组牛传染性鼻气管炎病毒。将牛传染性鼻气管炎病毒免疫原性gD基因胞外区插入到牛传染性鼻气管炎△gG/△TK双基因缺失毒株的TK基因位置,表达出双拷贝gD基因。该重组病毒的增殖没有改变,但其免疫原性得到提高。重组牛传染性鼻气管炎病毒IBRV△gG/△TK/gD+,保藏在中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:V201552,本发明还公开了重组牛传染性鼻气管炎病毒IBRV△gG/△TK/gD+在制备牛传染性鼻气管炎基因工程疫苗中的应用。
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公开(公告)号:CN104694432B
公开(公告)日:2018-03-09
申请号:CN201510110209.8
申请日:2015-03-13
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N1/20 , A61K39/112 , A61P31/04 , C12R1/42
Abstract: 本发明属于农业微生物基因工程领域,涉及一株缺失phoQ和rpoS基因的都柏林沙门氏菌及应用。利用λ噬菌体Red重组系统对亲本株都柏林沙门氏菌的phoQ、rpoS基因进行缺失,得到一株缺失phoQ和rpoS基因的重组的都柏林沙门氏菌ΔphoQ‑ΔrpoS,该菌株保藏在中国典型培养物保藏中心(CCTCC NO:M2014039)。具有如下特征:带有基因缺失标记;不含外源基因;不含抗生素标记。与都柏林沙门氏菌亲本株相比,该菌株的生长速度基本一致,生化特性没有改变,但其毒力比亲本株显著降低,具有良好的免疫原性,对都柏林沙门氏菌和鼠伤寒沙门氏菌感染均具有良好的免疫保护力。
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公开(公告)号:CN102220263B
公开(公告)日:2012-10-03
申请号:CN201110117094.7
申请日:2011-05-06
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种牛支原体致弱菌株及其应用,其步骤是A.分离鉴定牛支原体强毒株:通过病原分离培养、PCR检测,确定其病原为牛支原体B.牛支原体弱毒株的培育:将分离到的牛支原体在体药物体培养基,于培养箱中培养,培养基从红色变成透亮的黄色。.从上一代菌液取出1μL,接种PPLO培养基,培养。C.试验表明,该代次牛支原体已充分致弱。通过形态学检测,试验结果验证了由牛支原体MbovHB0801培育的150代传代菌株MbovHB0801-150.2。D.该牛支原体致弱株MbovHB0801-150.2,CCTCCNO:M2011102。具有良好的疫苗开发前景和广阔的临床应用价值,成本低、对动物体刺激性小,产生巨大的经济效益和社会效益。
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公开(公告)号:CN102220263A
公开(公告)日:2011-10-19
申请号:CN201110117094.7
申请日:2011-05-06
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种牛支原体致弱菌株及其应用,其步骤是A.分离鉴定牛支原体强毒株:通过病原分离培养、PCR检测,确定其病原为牛支原体。B.牛支原体弱毒株的培育:将分离到的牛支原体在体药物体培养基,于培养箱中培养,培养基从红色变成透亮的黄色。从上一代菌液取出1μl,接种PPLO培养基,培养。C.试验表明,该代次牛支原体已充分致弱。通过形态学检测,试验结果验证了由牛支原体MbovHB0801培育的150代传代菌株MbovHB0801-150.2。D.该牛支原体致弱株MbovHB0801-150.2,CCTCC M2011102。具有良好的疫苗开发前景和广阔的临床应用价值,成本低、对动物体刺激性小,产生巨大的经济效益和社会效益。
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公开(公告)号:CN118406623A
公开(公告)日:2024-07-30
申请号:CN202410563562.0
申请日:2024-05-08
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了Mce4D基因作为关键毒力因子在调控牛分枝杆菌毒力中的应用,所述Mce4D基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,编码蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。通过牛分枝杆菌卡介苗随机插入突变体库筛选并获得到了一株突变株,通过鉴定,证实发生突变的基因为Mce4D基因,对该突变株的毒力表型进行鉴定,发现突变株的侵袭能力、胞内存活能力和耐环境压力能力相比野生株显著降低,由此推断Mce4D基因在调控牛分枝杆菌毒力方面发挥重要作用。
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公开(公告)号:CN117777268A
公开(公告)日:2024-03-29
申请号:CN202311682845.9
申请日:2023-12-08
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07K14/47 , C12N15/867 , C12N15/113 , C12N5/10 , A61K48/00 , A61K38/46 , A61P31/04 , A61P31/06
Abstract: 本发明公布了一种基于CRISPR‑Cas9基因编辑技术的牛rbmx2基因敲除细胞系的构建方法,本发明采用CRISPR‑Cas9技术敲除EBL细胞中的rbmx2基因序列,建立rbmx2基因敲除的EBL细胞系,证实rbmx2基因是牛分枝杆菌感染依赖因子,确定rbmx2基因敲除的EBL细胞系能抵抗牛分枝杆菌感染,可用于在人畜抵抗牛分枝杆菌感染中的功能验证。
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公开(公告)号:CN114752594B
公开(公告)日:2024-03-15
申请号:CN202210549786.7
申请日:2022-05-20
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/11 , C12Q1/689 , C12Q1/6893 , C12Q1/6851 , C12R1/42 , C12R1/90
Abstract: 本发明公开一种多重实时荧光定量PCR引物和探针组合,它由两组分别针对沙门氏菌InvA基因、隐孢子虫18SrRNA基因设计的引物和探针组成,本发明还公开了含有该引物和探针组合的试剂盒以及检测方法。本发明实现了沙门氏菌和隐孢子虫的双重实时荧光定量PCR检测,此方法快速、准确、特异性和灵敏性高,可以同时实现对沙门氏菌和隐孢子虫的定性和准确定量检测。
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公开(公告)号:CN117683142A
公开(公告)日:2024-03-12
申请号:CN202311665648.6
申请日:2023-12-06
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07K19/00 , C12N15/62 , C12N15/70 , G01N33/569 , G01N33/68
Abstract: 本发明属于分子生物学领域,公开了融合蛋白LSDV090‑133及其在检测牛结节性皮肤病病毒(LSDV)感染抗体和鉴别疫苗免疫抗体中的应用。本发明利用噬菌体展示文库筛选针对牛结节性皮肤病病毒感染血清和山羊痘弱毒疫苗免疫血清的特异性多肽,经生物信息学分析,选取牛结节性皮肤病病毒感染血清特有的3条多肽,通过柔性肽串联至pET28a载体,送公司进行基因合成,原核表达得到LSDV090‑133融合蛋白,分子量约为20 kDa。经验证,该蛋白与LSDV感染牛阳性血清有很强的反应原性,其灰度值明显强于与山羊痘弱毒疫苗免疫60dpi后的免疫血清,是一种潜在的鉴别诊断新靶标,能用于鉴别诊断LSDV感染和山羊痘弱毒疫苗免疫的抗体反应,为牛结节性皮肤病的血清学诊断和防控提供参考工具。
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公开(公告)号:CN114657273B
公开(公告)日:2023-11-14
申请号:CN202210484565.6
申请日:2022-05-06
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种检测多种牛乳腺炎病原的引物对和探针组合,所述引物对和探针分别针对金黄色葡萄球菌rpoB基因、链球菌tuf基因、牛支原体oppD/F基因、产色葡萄球菌sodA基因、大肠杆菌79号基因,序列如SEQ ID NO:1‑15所示。本发明公开的引物对和探针组合能够对临床奶样或其它样本中的金黄色葡萄球菌、链球菌(无乳链球菌、停乳链球菌、乳房链球菌)、牛支原体、产色葡萄球菌、大肠杆菌同时进行检测,不仅能提高检测效率,而且还具有较高的灵敏度和特异性。
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