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公开(公告)号:CN116064618B
公开(公告)日:2024-03-12
申请号:CN202211551908.2
申请日:2022-12-05
申请人: 深圳市妇幼保健院
IPC分类号: C12N15/60 , C12N9/88 , C12Q1/6883 , C12N15/11 , C12N15/85 , G01N33/573 , C12Q1/527
摘要: 本发明提供一种ECHS1基因突变体、蛋白多肽、试剂盒及其应用,属于基因工程技术领域,本发明所述ECHS1基因突变体为ECHS1基因cDNA核苷酸序列第724位核苷酸发生G→A突变,其核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示;所述蛋白多肽具有p.E242K突变;所述试剂盒能够用于筛选易患Leigh综合征的生物样品,含有检测ECHS1基因突变体的试剂。本发明所提供的ECHS1基因突变体、蛋白多肽、试剂盒及其应用,可用于Leigh综合征的分子遗传学诊断,为ECHS1基因突变所致Leigh综合征患者的产前基因诊断提供依据。
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公开(公告)号:CN117448419A
公开(公告)日:2024-01-26
申请号:CN202311384888.9
申请日:2023-10-24
申请人: 福建中烟工业有限责任公司 , 龙岩烟草工业有限责任公司
摘要: 本发明涉及一种碱性液化果胶酶的制备及其酶活检测方法,具体提供了一种鉴定碱性果胶酶的种类的方法,该方法能够区分酶解产物是短链果胶还是小分子还原糖,从而能够直接计算出碱性糖化果胶酶的酶活和碱性液化果胶酶的酶活,进而能够将内切型果胶酶和外切型果胶酶加以区分,便于筛选出产内切型果胶酶(液化果胶酶)和外切型果胶酶(糖化果胶酶)的微生物。
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公开(公告)号:CN116904550A
公开(公告)日:2023-10-20
申请号:CN202310874154.2
申请日:2023-07-17
申请人: 青岛啤酒股份有限公司
摘要: 本发明提出一种基于制麦过程呼吸酶系活力的呼吸损失预测方法及其应用,属于制麦损失预测领域,能够解决传统制麦损失计算方法存在耗时较长、存在较大的滞后性,无法实现制麦过程精准调控的技术问题。该技术方案包括:原料大麦经过浸麦处理后得到露点的大麦,通过测定所述露点的大麦中关键呼吸酶的酶活力,将其代入呼吸损失计算公式中得到呼吸损失或者根据酶活力与呼吸损失评判标准,以预测所述原料大麦经过整个制麦过程后的实际呼吸损失。本发明具有操作方便、耗时短、结果准确且能够对制麦过程的呼吸损失进行提前预判的特点。本发明能够应用于制麦损失预测方面。
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公开(公告)号:CN116731135A
公开(公告)日:2023-09-12
申请号:CN202211642607.0
申请日:2022-12-20
申请人: 江南大学
摘要: 本发明公开了一种乳酸克鲁维酵母裂解工程菌及其应用,属于生物工程技术。本发明提供了甘露糖蛋白在促进乳酸克鲁维酵母菌胞内物质释放方面的新用途,通过敲除甘露糖蛋白编码基因,提高乳酸克鲁维酵母对裂解酶Lyticase的敏感性,可使构建的乳酸克鲁维酵母工程菌裂解时间较短,30min内几乎可使细胞完全裂解。本发明的乳酸克鲁维酵母裂解方法操作简便,在酶活检测、蛋白鉴定等方面有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN116200457A
公开(公告)日:2023-06-02
申请号:CN202310056091.X
申请日:2023-01-17
申请人: 光景生物科技(苏州)有限公司
摘要: 本发明提供了一种同型半胱氨酸检测试纸条及其制备方法和应用,所述试纸条包括卡壳下板和卡壳上板,以及夹在卡壳下板和卡壳上板之间依次层叠的反应层、辅助滤血层、滤血层及扩散层;所述反应层包括反应膜和固定于所述反应膜上的反应层试剂,所述反应层试剂包括胱硫醚β合成酶‑PLP共固定化酶和胱硫醚β裂解酶‑PLP共固定化酶。所述试纸条无需配合大型仪器使用,采集末梢全血加样即可测试,并且试纸条的保存条件为2‑30℃,不需限制冷藏保存,应用场景更加多样,具有简便、快速、灵活以及无需专业人员操作等优点。
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公开(公告)号:CN116064724A
公开(公告)日:2023-05-05
申请号:CN202310360983.9
申请日:2023-04-06
申请人: 百葵锐(天津)生物科技有限公司
摘要: 本发明提供了一种苯丙氨酸酶的高通量筛选纯化方法及其比酶活的测定方法,应用优化后的裂解液对大肠杆菌胞内表达蛋白进行裂解,并将充分裂解的裂解液上清采用磁珠法进行纯化,最后得到了高通量的测定苯丙氨酸酶比酶活的筛选方法。本发明发展了一种快速且稳定的PAL比酶活高通量的筛选方法,传统的PAL比酶活筛选耗时5天,并且最多可获得3~4突变体的比酶活数据,然而经过改良后的PAL比酶活筛选工艺实际耗时2天,并且可获得大量的比酶活数据,简化了传统工艺中多步酶活测定和放大工艺过程。保证了PAL酶活的准确性且具有一定的平行性,从而也大大减弱了传统工艺的冗杂步骤。
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公开(公告)号:CN114277021B
公开(公告)日:2022-09-20
申请号:CN202111400100.X
申请日:2021-11-19
申请人: 武汉瀚海新酶生物科技有限公司
摘要: 本发明涉及一种胱硫醚‑β‑裂解酶及其制备方法和应用。该胱硫醚‑β‑裂解酶,包括:氨基酸序列如SEQ ID No.5~SEQ ID No.6所示的多肽中的一种。本研究预料不到地发现,包括氨基酸序列如SEQ ID No.5~SEQ ID No.6所示的多肽中的一种的胱硫醚‑β‑裂解酶兼具较高的热稳定性和酶活力。经试验验证,氨基酸序列如SEQ ID No.5所示的胱硫醚‑β‑裂解酶的蛋白比活力为127.4U/mg,在50℃下的半衰期为135.3min,氨基酸序列如SEQ ID No.6所示的胱硫醚‑β‑裂解酶的蛋白比活力为98.9U/mg,在50℃下的半衰期为31.2min。
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公开(公告)号:CN111593040B
公开(公告)日:2022-08-30
申请号:CN202010569652.2
申请日:2020-06-20
申请人: 山东大学
摘要: 本发明涉及硫酸皮肤素裂解酶及其应用。本发明中的硫酸皮肤素裂解酶DLase降解硫酸皮肤素的酶活力为800~1800U/mg,其编码基因核苷酸序列如SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.2所示,氨基酸序列如SEQ ID NO.3或SEQ ID NO.4所示。本发明涉及的硫酸皮肤素裂解酶DLase具有更高的降解硫酸皮肤素活性,解决了现有技术中硫酸皮肤素专一性降解酶酶活低不利于大规模生产应用的问题,同时具有更好的温度稳定性,本发明的硫酸皮肤素裂解酶DLase为内切型酶,可用于CS/DS相关样品中DS组成结构的特异性分析、DS组分的选择性降解去除、DS寡糖的制备以及相关产品的质量控制分析等。
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公开(公告)号:CN114807199A
公开(公告)日:2022-07-29
申请号:CN202210163462.X
申请日:2022-02-22
申请人: 三诺生物传感股份有限公司
摘要: 本发明涉及基因工程技术领域,尤其涉及重组胱硫醚β‑裂解酶的制备方法及其应用。本发明通过分子克隆技术扩增大肠杆菌胱硫醚β‑裂解酶的目的基因,并将其与质粒pET‑28a(+)连接,并转化至表达宿主E.coli BL21(DE3)中,并成功获得表达菌株Eoli BL21(DE3)(PET28a‑CBL),经过IPTG诱导,可使CBL重组蛋白表达,经过His‑tag进行镍亲和层析获得纯度高活性好的CBL重组蛋白,并将其应用于HCY循环酶法试剂盒的开发。实验表明,本发明提供的制备方法可溶性表达量达到350mg/L,试剂盒的准确率、精密度皆良好。
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公开(公告)号:CN114787195A
公开(公告)日:2022-07-22
申请号:CN201980102778.4
申请日:2019-12-27
申请人: 深圳市天道医药有限公司
摘要: 一种肝素酶III的制备方法,包括以下步骤:将肝素黄杆菌破碎离心后所得上清液进行硫酸铵沉淀,沉淀物溶解后透析;上样SP柱,以20‑30mM Tris‑HCl缓冲液平衡,相同缓冲液中0‑0.5M NaCl线性洗脱,收集肝素酶活性组分,透析;上样SP柱,以含0.05‑0.2M NaCl的50mMTris‑HCl缓冲液洗脱,收集肝素酶活性组分,透析;上样SP柱,含0.3%肝素的50mM Tris‑HCl缓冲液等度洗脱,收集肝素酶活性组分,透析;上样SP柱,以含0.055M NaCl的50mM Tris‑HCl溶液等度洗脱,收集肝素酶活性组分,浓缩得到肝素酶III。
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