一种具有较高棒状杆菌复制能力的表达质粒及其构建方法

    公开(公告)号:CN111019966B

    公开(公告)日:2023-01-24

    申请号:CN201911367696.0

    申请日:2019-12-26

    IPC分类号: C12N15/77 C12N15/67

    摘要: 本发明属于生物技术领域,具体为一种具有较髙棒状杆菌复制能力的表达质粒,所述表达质粒的第1786位点的核苷酸为A或G,其余位点与质粒pXMJ19相同;所述表达质粒的核苷酸序列如SEQ ID NO:13或SEQ ID NO:14所示。通过在pXMJ19载体的棒状杆菌复制子调节部位,将第1786位点的核苷酸C进行人工突变,成功获得2株比pXMJ19质粒拷贝能力高6~8.5倍的棒状杆菌/大肠杆菌双用载体pXMJ19C1786A和pXMJ19C1786G质粒,pXMJ19C1786A拷贝数约为115,pXMJ19C1786G质粒的拷贝数约为170。

    鸡传染性支气管炎标记疫苗毒株及其制备方法、疫苗

    公开(公告)号:CN114807061A

    公开(公告)日:2022-07-29

    申请号:CN202111582307.3

    申请日:2021-12-22

    发明人: 陈瑞爱 熊挺

    摘要: 本发明公开了一种鸡传染性支气管炎标记疫苗毒株的构建方法,其包括:(1)获取IBV‑Beaudette病毒基因组全长cDNA重组质粒;(2)构建A21963G沉默突变和G22170C沉默突变的IBV‑Beaudette病毒全长cDNA重组质粒;(3)转染细胞,拯救获得的病毒即为鸡传染性支气管炎标记疫苗毒株。相应的,本发明还公开了一种鸡传染性支气管炎标记疫苗毒株及疫苗。实施本发明,可得到具有Vero细胞适应性的A21963G和G22170C双位点沉默点突变的基因标记毒株,为IBV基因标记疫苗的研制提供参考。