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公开(公告)号：CN1077140C
公开(公告)日：2002-01-02
申请号：CN94117583.9
申请日：1994-10-26
Applicant: 株式会社日立制作所
IPC: C12P19/30
CPC classification number: G01N27/44743 , C12Q1/6837 , C12Q1/6874 , G01N27/447 , C12Q2535/101 , C12Q2525/179 , C12Q2565/537 , C12Q2525/191
Abstract: 本发明的DNA片段的分级分离方法包括：第一步，制备各自固定了DNA探针的探针柱或一套探针柱，DNA探针由第一序列和第二序列组成，第一序列具有特定的已知序列和一部分酶识别序列，第二序列由邻近3’末端的第一序列的1至6个碱基的结合体组成；第二步，将DNA低聚物连到由限制酶酶切形成的DNA片段末端，DNA低聚物由一部分酶识别序列和与已知序列互补的序列组成；第三步，将探针柱或一套探针柱放到含有核苷酸片段的溶液中，核苷酸片段连有第二步产生的DNA低聚物，至少进行DNA探针的杂交和互补链延伸，由此DNA片段被分级分离。
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公开(公告)号：CN1081719A
公开(公告)日：1994-02-09
申请号：CN93108572.1
申请日：1993-07-10
Applicant: 株式会社日立制作所
CPC classification number: C12Q1/682 , C12Q1/6823 , C12Q2537/157 , C12Q2521/319 , C12Q2537/155
Abstract: 荧光标记性DAN探针11与样品7杂合生成双链杂合物8；借助于特异分解双链杂合物8的酶重复进行杂合的DNA探针的逐次分解和分离，达到高速分解单独杂合在样品DNA上的DNA探针；在缩短的DNA探针以这种方式扩增性产生之后，将缩短的DNA探针20和未反应的DNA探针21区分开并检测，以高灵敏地检测出样品DNA7。缩短的DNA探针可以大量产生，在不需升降反应温度的条件下，数分钟后其数量可超过样品DNA量的数位数，这样样品DNA就可得到迅速的检测。
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公开(公告)号：CN1162743A
公开(公告)日：1997-10-22
申请号：CN96121784.7
申请日：1996-11-29
Applicant: 株式会社日立制作所
IPC: G01N27/447 , C12Q1/00
CPC classification number: C12Q1/6855 , C12Q1/683
Abstract: 一种分析或测定核苷酸的方法，该方法包括：(1)用限制性酶消化DNA的步骤；(2)用DNA探针辨别得自以上步骤(1)的DNA片段在其3′末端附近的序列的差异并通过互补链合成延伸DNA探针而将DNA片段分级分离成几组的步骤；和(3)测量属于所述组的DNA片段长度或通过所述互补链延伸反应延伸的DNA探针长度的步骤；其中对于该DNA片段3′末端附近的每个碱基序列所测得的长度被用作指纹。
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公开(公告)号：CN1537954A
公开(公告)日：2004-10-20
申请号：CN200410039338.4
申请日：2004-01-19
Applicant: 株式会社日立制作所
IPC: C12Q1/68
CPC classification number: C12Q1/6818 , C12Q1/6865 , C12Q2525/143 , C12Q2521/307
Abstract: 本发明提供一种用于检测核酸的新试剂盒，其无关于靶核酸序列而可以被普遍使用，以及一种使用该试剂盒用于检测核酸的简单方法。该方法包括：使用含有与靶基因或核酸特异性杂交的碱基序列的引物，和含有与第一碱基序列相同或互补碱基序列的TaqMan探针或分子信标(MolecularBeacon)，对待分析基因进行实时检测，其中待分析基因的制备是通过将第一碱基序列和含有T7启动子序列(其对靶基因或核酸的碱基序列是非特异性的)的第二碱基序列导入靶基因或核酸，使得第二碱基序列结合位置比第一碱基序列更靠近5’端。本发明还提供一种用于检测核酸的通用探针。本发明中两种通用探针的使用实现了在单一反应容器中同时进行几种靶基因的实时检测。
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公开(公告)号：CN1105782C
公开(公告)日：2003-04-16
申请号：CN96121784.7
申请日：1996-11-29
Applicant: 株式会社日立制作所
IPC: C12Q1/68
CPC classification number: C12Q1/6855 , C12Q1/683
Abstract: 一种分析或测定核苷酸的方法，该方法包括：(1)用限制性酶消化DNA的步骤；(2)用DNA探针辨别得自以上步骤(1)的DNA片段在其3′末端附近的序列的差异并通过互补链合成延伸DNA探针而将DNA片段分级分离成几组的步骤；和(3)测量属于所述组的DNA片段长度或通过所述互补链延伸反应延伸的DNA探针长度的步骤；其中对于该DNA片段3′末端附近的每个碱基序列所测得的长度被用作指纹。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN1127887A
公开(公告)日：1996-07-31
申请号：CN95116257.8
申请日：1995-09-06
Applicant: 株式会社日立制作所
CPC classification number: C12Q1/6837 , C12Q1/6869 , C12Q2565/537 , C12Q2565/514 , C12Q2525/191 , C12Q2535/125
Abstract: 将长DNA消化成小的片段，在没有亚克隆情况下使用16种引物的小文库进行测序。可联合使用凝胶电泳分离和与DNA聚合酶反应结合在一起的杂交技术分离各片段，其并没有使用亚克隆方法，因此对方法的全自动化是有宜的。本发明公开的DNA分离、分级分离和分析方法使用包括固定所说DNA探针之固相的容器的DNA分离和分级分离系统，以及包括为所说的容器内装添所需物质的工具、温度控制工具、样品转移工具及分级分离已分离之靶DNA片段的工具的机器人系统。
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公开(公告)号：CN1091522A
公开(公告)日：1994-08-31
申请号：CN93120806.8
申请日：1993-12-08
Applicant: 株式会社日立制作所
Abstract: 本发明介绍了一种DNA检测法，它包括对与靶DNA或RNA杂交的DNA探针或RNA探针的末端进行化学修饰的第一方法，用核酸外切酶消化未修饰的DNA探针或RNA探针的第二方法以及检测第一方法中被化学修饰的DNA或RNA探针的第三方法。按照本发明，只有处于杂交中的DNA探针才能以高灵敏度进行检测。
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公开(公告)号：CN1131157A
公开(公告)日：1996-09-18
申请号：CN95121132.3
申请日：1995-12-21
Applicant: 株式会社日立制作所
CPC classification number: C12Q1/6855
Abstract: 描述了一种DNA制备方法，所述方法包括通过消化双键DNA产生多个有不同长度DNA片段的第一步；在第一步的消化处通过连接把已知碱基序列的寡核苷酸引入到所述DNA片段上的第二步；以3′末端有选择性序列的引物对所述第二步中获得的DNA片段进行互补链延伸反应并增加DNA片段拷贝数目的第三步。
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公开(公告)号：CN1091831A
公开(公告)日：1994-09-07
申请号：CN93120194.2
申请日：1993-12-09
Applicant: 株式会社日立制作所
Abstract: 利用核酸探针检测核酸的方法，包括样品与荧光标记的RNA探针混合，RNA探针在其末端用荧光标记来标记并具有单链靶DNA的互补序列，因此样品与靶DNA杂交，之后加入核糖核酸酶H与杂合体反应，核糖核酸酶H特异性地降解DNA-RNA杂合体中的双链RNA，所以形成RNA探针片段并释放下来。而RNA探针再与恢复单链形成的靶DNA杂交，然后以同样的方式用核糖核酸酶H降解。反应过程自动重复，通过重复释放大量的RNA探针片段，终止反应后，反应液经电泳来确定降解的RNA片段。用这种方法，DNA或RNA可以被高灵敏度地检测出来。
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