一种D-转氨酶突变体及在制备L-草铵膦中的应用

    公开(公告)号:CN115786298A

    公开(公告)日:2023-03-14

    申请号:CN202211610622.7

    申请日:2022-12-14

    Abstract: 本发明公开了一种D‑转氨酶突变体及在制备L‑草铵膦中的应用,所述D‑转氨酶突变体是将SEQ ID NO.1所示氨基酸序列第265位色氨酸突变为丝氨酸。本发明D‑转氨酶突变体具有高对映选择性(ee>99.9%),仅仅催化D‑草铵膦转化为4‑(羟基(甲基)磷酰基)‑2‑氧代丁酸,L‑草铵膦得以保留,降低了反应难度。采用一锅法,以市售的D,L‑草铵膦为底物,将无除草活力的D‑草铵膦合成L‑草铵膦,具有更高的原子利用效率,符合绿色化学的要求。操作简单,在温和的反应条件下进行,适合大规模生产,具有工业化应用的潜力,L‑草铵膦产物的产率高达100%,对映体过量(ee)大于99.9%。

    一种热稳定性转氨酶突变体及其工程菌与应用

    公开(公告)号:CN117210431A

    公开(公告)日:2023-12-12

    申请号:CN202311178823.9

    申请日:2023-09-13

    Abstract: 本发明属于生物工程技术领域,具体涉及一种热稳定性转氨酶突变体及其工程菌与应用。所述转氨酶突变体由SEQ ID NO.1所示氨基酸序列的第23位的组氨酸取代为丙氨酸,第43位的酪氨酸取代为天冬氨酸,第128位的精氨酸取代为丝氨酸,第214位的苯丙氨酸取代为半胱氨酸得到。经测定,本发明提供的ω‑转氨酶突变体的酶活达45U/mg以上。所述ω‑转氨酶突变体能够生物催化2‑羰基‑4‑[羟基(甲基)膦酰基]‑丁酸不对称合成L‑草铵膦,200mM底物反应3h,底物转化率高达88%以上,产物ee>99.9%,相比于原始酶,转化率提高了1.8倍。此外,本发明采用三酶级联法,进一步提高了转化率,可催化300mM底物PPO转化为L‑草铵膦,300mM底物反应10h,底物转化率为100%,产物ee>99.9%,体现了极佳的L‑草铵膦生产潜力。

    一种D-转氨酶突变体及在制备L-草铵膦中的应用

    公开(公告)号:CN115786298B

    公开(公告)日:2025-05-06

    申请号:CN202211610622.7

    申请日:2022-12-14

    Abstract: 本发明公开了一种D‑转氨酶突变体及在制备L‑草铵膦中的应用,所述D‑转氨酶突变体是将SEQ ID NO.1所示氨基酸序列第265位色氨酸突变为丝氨酸。本发明D‑转氨酶突变体具有高对映选择性(ee>99.9%),仅仅催化D‑草铵膦转化为4‑(羟基(甲基)磷酰基)‑2‑氧代丁酸,L‑草铵膦得以保留,降低了反应难度。采用一锅法,以市售的D,L‑草铵膦为底物,将无除草活力的D‑草铵膦合成L‑草铵膦,具有更高的原子利用效率,符合绿色化学的要求。操作简单,在温和的反应条件下进行,适合大规模生产,具有工业化应用的潜力,L‑草铵膦产物的产率高达100%,对映体过量(ee)大于99.9%。

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