Production method of polyunsaturated fatty acids in the transgenic organisms

    公开(公告)号:JP2007500504A

    公开(公告)日:2007-01-18

    申请号:JP2006521450

    申请日:2004-07-16

    摘要: 本発明は、Δ5-エロンガーゼ活性を有するポリペプチドをコードする核酸を導入した生物において多不飽和脂肪酸を製造する方法に関する。 該核酸配列は、場合によっては脂肪酸の生合成または脂質代謝のためのポリペプチドをコードする他の核酸配列と共に、該生物において有利に発現されうる。 Δ6-デサチュラーゼ、Δ5-デサチュラーゼ、Δ4-デサチュラーゼおよび/またはΔ6-エロンガーゼ活性をコードする核酸配列が特に有利であり、有利には該デサチュラーゼおよびエロンガーゼはThalassiosira、EuglenaまたはOstreococcusに由来する。 本発明は更に、長鎖多不飽和脂肪酸の含量が上昇した油および/またはトリアシルグリセリドの製造方法に関する。 本発明の特定の実施形態は、不飽和ω3-脂肪酸の製造方法、および不飽和脂肪酸(特に、3個を超える二重結合を有するω3-脂肪酸)の含量が上昇したトリグリセリドの製造方法である。 また、好ましくはω3-デサチュラーゼ、例えばPythiaceae科の真菌、例えばPhytophthora属、例えばPhytophthora infestans属・種からのω3-デサチュラーゼ、または藻類、例えばPrasinophyceae科、例えばOstreococcus属、特にOstreococcus tauri属・種、もしくはケイ藻類、例えばThalassiosira属、特にThalassiosira pseudonana属・種からのω3-デサチュラーゼと組み合わされた、前記方法において使用するエロンガーゼおよびデサチュラーゼの発現の結果として、ω3-脂肪酸、油または脂質(ω3-二重結合を有するもの)の含量が上昇したトランスジェニック生物、好ましくは、トランスジェニック植物またはトランスジェニック微生物の製造も開示する。 本発明はまた、該核酸配列、核酸構築物、該核酸配列および/または核酸構築物を含有するベクターおよび生物、ならびに該核酸配列、核酸構築物および/またはベクターを含むトランスジェニック生物に関する。 本発明のもう1つの態様は、前記方法により製造された油、脂質および/または脂肪酸、ならびにそれらの使用、さらには、不飽和脂肪酸、および不飽和脂肪酸の含量が上昇したトリグリセリド、ならびにそれらの使用に関する。

    摘要翻译: 生产多不饱和脂肪酸(I)包括将编码δ9延伸酶或δ6去饱和酶,δ8去饱和酶或δ6延伸酶,δ5去饱和酶,δ5延伸酶和δ4去饱和酶活性的核酸序列引入生物体中以产生转基因生物 其总脂质包括至少1重量%(I)。 生产式(I)的多不饱和脂肪酸包括将编码δ9延伸酶或δ6去饱和酶,δ8去饱和酶或δ6延伸酶,δ5去饱和酶,δ5延伸酶和δ4去饱和酶活性的核酸序列引入生物体中以产生 其总脂质包含至少1重量%的式(I)的转基因生物。 溶血磷脂酰乙醇胺,溶血磷脂酰甘油,溶血磷脂酰丝氨酸,溶血磷脂酰肌醇,鞘磷脂或OCH 2CH(OR 3>)CH 2 OR 2>; R 1> OH,辅酶A(硫酯),溶血磷脂酰胆碱,溶血磷脂酰乙醇胺。 R 2> H,溶血磷脂酰胆碱,溶血磷脂酰乙醇胺,溶血磷脂酰甘油,溶血磷脂酰丝氨酸,溶血磷脂酰肌醇,(未饱和的)2-24C烷基羰基或CO(CH 2)n(CH = CHCH 2)m(CH 2)pCH 3; R 3> H,(未)饱和的2-24C烷基羰基或CO(CH 2)n(CH = CHCH 2)m(CH 2)pCH 3; n:2-9; m:2-6; p:0或3.还包括:(1)上述生产的油,脂或脂肪酸的独立权利要求。 (2)包含如上生产并衍生自转基因植物的多不饱和脂肪酸的油,脂或脂肪酸组合物; (3)编码具有说明书中给出的6个氨基酸序列之一的δ5延伸酶多肽的分离的核酸序列; (4)分离的核酸序列,其编码δ6延伸酶多肽并具有说明书中给出的4个核苷酸序列之一; (5)编码ω3去饱和酶多肽的分离的核酸序列,并且具有说明书中给出的2个核苷酸序列之一; (6)分离的核酸序列,其编码δ6去饱和酶多肽并具有说明书中给出的2个核苷酸序列之一; (7)编码Δ5去饱和酶多肽的分离的核酸序列,并具有说明书中给出的4个核苷酸序列之一; (8)分离的核酸序列,其编码Δ4去饱和酶多肽并具有说明书中给出的2个核苷酸序列之一; (9)分离的核酸序列,其编码δ12去饱和酶多肽并具有说明书中给出的2个核苷酸序列之一; (10)由上述分离的核酸序列编码的氨基酸序列; (11)包含如上所述的分离的核酸的一个或多个调控信号的遗传构建体; (12)载体,其含有如上所述的核酸或构建体; (13)含有如上所述的核酸,构建体或载体的转基因非人生物体。