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    Compositions and methods for helper-free production of recombinant adeno-associated viruses
    15.
    发明授权
    Compositions and methods for helper-free production of recombinant adeno-associated viruses 有权
    无辅助生产重组腺相关病毒的组合物和方法

    公开(公告)号：US06953690B1

    公开(公告)日：2005-10-11

    申请号：US09665852

    申请日：2000-09-20

    申请人： Guangping Gao ,  James M. Wilson

    发明人： Guangping Gao ,  James M. Wilson

    IPC分类号： A01N63/00 ,  A61K48/00 ,  C07H21/04 ,  C12N5/00 ,  C12N5/10 ,  C12N7/02 ,  C12N15/00 ,  C12N15/86 ,  C12N15/864

    CPC分类号： C12N7/00 ,  A61K48/0091 ,  C07H21/04 ,  C12N15/86 ,  C12N2510/02 ,  C12N2750/14143 ,  C12N2750/14151 ,  C12N2750/14152 ,  C12N2830/002 ,  C12N2830/003 ,  C12N2830/006 ,  C12N2830/008 ,  C12N2830/60

    摘要： A method for producing recombinant adeno-associated virus in the absence of contaminating helper virus or wild-type virus involves culturing a mammalian host cell containing a transgene flanked by adeno-associated virus (AAV) inverse terminal repeats and under the control of regulatory sequences directing expression thereof, an AAV rep sequence and an AAV cap sequence under the control of regulatory sequences directing expression thereof, and the minimum adenovirus DNA required to express an E1a gene product, an E1b gene product and an E2a gene product, and isolating therefrom a recombinant AAV which expresses the transgene in the absence of contaminating helper virus or wildtype AAV. This method obviates a subsequent purification step to purify rAAV from contaminating virus. Also provided are various embodiments of the host cell.

    摘要翻译： 在不存在污染性辅助病毒或野生型病毒的情况下，用于产生重组腺相关病毒的方法包括培养含有侧翼为腺相关病毒（AAV）反末端重复的转基因的哺乳动物宿主细胞，并在调控序列指导 其表达，AAV rep序列和AAV cap序列，以及引导其表达的调节序列的控制，以及表达E1a基因产物所需的最小腺病毒DNA，E1b基因产物和E2a基因产物，并从其中分离重组 在没有污染性辅助病毒或野生型AAV的情况下表达转基因的AAV。 该方法避免了随后的纯化步骤以从污染病毒中纯化rAAV。 还提供了宿主细胞的各种实施方案。