公开(公告)号：US5221736A

公开(公告)日：1993-06-22

申请号：US454372

申请日：1989-12-21

申请人： Thomas R. Coolidge ,  William Lewis ,  Sheldon M. Schuster ,  Dwane Wylie ,  Fred W. Wagner ,  Jay Stout ,  Gino van Heeke

发明人： Thomas R. Coolidge ,  William Lewis ,  Sheldon M. Schuster ,  Dwane Wylie ,  Fred W. Wagner ,  Jay Stout ,  Gino van Heeke

IPC分类号： A61K39/395 ,  A61K48/00 ,  C07H21/04 ,  C07K1/00 ,  C07K1/02 ,  C07K1/04 ,  C07K1/06 ,  C07K1/113 ,  C07K1/22 ,  C07K14/42 ,  C07K14/575 ,  C07K14/655 ,  C07K16/00 ,  C12N15/20

CPC分类号： C07K1/006 ,  C07K1/04 ,  C07K1/22 ,  Y10S435/803 ,  Y10S435/81 ,  Y10S436/824

摘要： The invention is directed to a method of purifying sequentially synthesized peptides and oligonucleotides by affinity techniques. Selected products are capped with and N-terminus capping agent for peptides or a 5'-terminus capping agents for oligonucleotides, and then bound with affinity agents that are selective for the corresponding capping agents.

摘要翻译： 本发明涉及通过亲和技术纯化顺序合成的肽和寡核苷酸的方法。 所选择的产物与肽封端的N-末端封端剂或寡核苷酸的5'-末端封端剂，然后与对相应的封端剂有选择性的亲和试剂结合。

公开(公告)号：US5464759A

公开(公告)日：1995-11-07

申请号：US18100

申请日：1993-02-17

申请人： Thomas R. Coolidge ,  William Lewis ,  Sheldon M. Schuster ,  Jay Stout ,  Gino van Heeke ,  Dwane Wylie ,  Fred W. Wagner

发明人： Thomas R. Coolidge ,  William Lewis ,  Sheldon M. Schuster ,  Jay Stout ,  Gino van Heeke ,  Dwane Wylie ,  Fred W. Wagner

IPC分类号： A61K39/395 ,  A61K48/00 ,  C07H21/04 ,  C07K1/00 ,  C07K1/02 ,  C07K1/04 ,  C07K1/06 ,  C07K1/113 ,  C07K1/22 ,  C07K14/42 ,  C07K14/575 ,  C07K14/655 ,  C07K16/00 ,  C12N15/20 ,  C12P19/34 ,  C12Q1/68

CPC分类号： C07K1/006 ,  C07K1/04 ,  C07K1/22 ,  Y10S435/803 ,  Y10S435/81 ,  Y10S436/824

摘要： The invention is directed to a method of purifying sequentially synthesized peptides and oligonucleotides by affinity techniques. Selected products are capped with and N-terminus capping agent for peptides or a 5'-terminus capping agents for oligonucleotides, and then bound with affinity agents that are selective for the corresponding capping agents.

摘要翻译： 本发明涉及通过亲和技术纯化顺序合成的肽和寡核苷酸的方法。 所选择的产物与肽封端的N-末端封端剂或寡核苷酸的5'-末端封端剂，然后与对相应的封端剂有选择性的亲和试剂结合。

公开(公告)号：US5595887A

公开(公告)日：1997-01-21

申请号：US552810

申请日：1990-07-16

申请人： Thomas R. Coolidge ,  Fred Wagner ,  Gino van Heeke ,  Sheldon M. Schuster ,  Jay Stout ,  Dwane E. Wylie

发明人： Thomas R. Coolidge ,  Fred Wagner ,  Gino van Heeke ,  Sheldon M. Schuster ,  Jay Stout ,  Dwane E. Wylie

IPC分类号： C07K14/575 ,  C07K1/22 ,  C07K7/14 ,  C07K14/00 ,  C07K14/245 ,  C07K14/47 ,  C07K14/585 ,  C07K14/595 ,  C07K19/00 ,  C12N1/21 ,  C12N9/14 ,  C12N9/88 ,  C12N15/09 ,  C12N15/62 ,  C12P21/00 ,  C12R1/19 ,  C12P21/04 ,  C12P21/06

CPC分类号： C12N9/14 ,  C07K14/245 ,  C07K14/47 ,  C07K14/585 ,  C07K14/595 ,  C07K7/14 ,  C12N15/62 ,  C12N9/88 ,  C07K2319/00 ,  C07K2319/50 ,  C07K2319/75

摘要： Methods are presented for producing and purifying a variable fusion polypeptide which can be purified by affinity chromatography with the binding protein partner. The variable fusion polypeptide construct has tandem coupled segments containing one or more copies of a desired peptide linked to carbonic anhydrase as the purification binding protein. In the methods, the fusion protein is expressed in a recombinant host using a recombinant vector containing a gene encoding the fusion polypeptide. Then the expressed fusion polypeptide is purified by immobilized reversible inhibitor affinity chromatography. Finally, the purified fusion polypeptide is cleaved from the desired peptides by chemical or enzymatic means and the desired peptides purified with affinity chromatography.

摘要翻译： 提供了用于产生和纯化可通过用结合蛋白配偶体进行亲和层析纯化的可变融合多肽的方法。 可变融合多肽构建体具有串联耦合区段，其含有与碳酸酐酶连接的期望肽的一个或多个拷贝作为纯化结合蛋白。 在该方法中，使用含有编码融合多肽的基因的重组载体，在重组宿主中表达融合蛋白。 然后通过固定的可逆抑制剂亲和层析纯化表达的融合多肽。 最后，通过化学或酶法将纯化的融合多肽从期望的肽切割，并用亲和层析纯化所需的肽。

公开(公告)号：US6127150A

公开(公告)日：2000-10-03

申请号：US927128

申请日：1997-09-05

申请人： Thomas R. Coolidge ,  Fred Wagner ,  Gino van Heeke ,  Sheldon M. Schuster ,  Jay Stout ,  Dwane E. Wylie

发明人： Thomas R. Coolidge ,  Fred Wagner ,  Gino van Heeke ,  Sheldon M. Schuster ,  Jay Stout ,  Dwane E. Wylie

IPC分类号： C07K14/575 ,  C07K1/22 ,  C07K7/14 ,  C07K14/00 ,  C07K14/245 ,  C07K14/47 ,  C07K14/585 ,  C07K14/595 ,  C07K19/00 ,  C12N1/21 ,  C12N9/14 ,  C12N9/88 ,  C12N15/09 ,  C12N15/62 ,  C12P21/00 ,  C12R1/19 ,  C12P21/06 ,  A61K38/24 ,  C07K1/00 ,  C12P21/04

CPC分类号： C12N9/14 ,  C07K14/245 ,  C07K14/47 ,  C07K14/585 ,  C07K14/595 ,  C07K7/14 ,  C12N15/62 ,  C12N9/88 ,  C07K2319/00 ,  C07K2319/50 ,  C07K2319/75

摘要： The present invention is directed to a protein purification construct having three tandem, coupled segments composed of a binding protein, an interconnecting linker and a variable fused polypeptide which incorporates the one or more copies of a product peptide. The binding protein is a mammalian or human carbonic anhydrase, or a modified version of the carbonic anhydrase. The protein purification construct may be employed in methods for expression of the product peptide in microbial and higher organism and for ligand immobilized affinity purification of the product peptide.

摘要翻译： 本发明涉及具有由结合蛋白，互连接头和可变融合多肽组成的三个串联耦合区段的蛋白质纯化构建体，其结合产物肽的一个或多个拷贝。 结合蛋白是哺乳动物或人类碳酸酐酶，或碳酸酐酶的修饰形式。 蛋白质纯化构建体可以用于在微生物和更高级生物体中表达产物肽的方法和用于产物肽的固定化亲和纯化的配体。