一株产角蛋白酶的金色链霉菌及其应用方法

    公开(公告)号:CN103642739B

    公开(公告)日:2015-09-30

    申请号:CN201310701537.6

    申请日:2013-12-19

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开一株角蛋白产生菌株及其培养条件和粗酶性质,属于微生物技术领域。经鉴定,该菌株为金色链霉菌(Streptomyces aureofaciens),命名为K13,现保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号为CGMCC No.8047。经初步优化,该菌株的培养基为:羊毛0.5-1%,葡萄糖4-8%,蛋白胨3-5%,硝酸钠0.3%,磷酸氢二钾0.04%,氯化钠0.05%,摇床培养条件为:初始pH值为10.0,接种量10%,培养温度30℃,转速220r/min,装液量30ml/250ml,发酵周期64h,产角蛋白酶活力达到44.2U/ml。该角蛋白酶为中温碱性角蛋白酶,最适作用温度为50-60℃,最适pH为8.5,且该酶在碱性(pH7.0-10.0)环境中酶活力稳定。

    一株反硝化细菌及其培养条件

    公开(公告)号:CN103555637B

    公开(公告)日:2015-08-05

    申请号:CN201310568985.3

    申请日:2013-11-15

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开一株反硝化细菌及其培养条件,属于环境微生物领域。经鉴定,该反硝化细菌为黄色海假单胞菌Pseudomonas xanthomarina,命名为DN1,现保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号为CGMCC No. 7650。经初步优化,该菌株的培养基为:丁二酸钠6-8 g/L、酵母粉6-10 g/L、硝酸钠0.67 g/L、磷酸二氢钾1.36 g/L、硫酸铵0.24 g/L、硫酸镁0.2 g/L,摇床培养条件为:pH 5.0,30℃,200 rpm。上述条件下所得菌体,在NO3-浓度为10 mmol/L的水体中,作用72h,脱氮率达到90%以上。

    一种钝齿棒杆菌溶氧诱导型启动子

    公开(公告)号:CN103320438B

    公开(公告)日:2015-06-24

    申请号:CN201310196281.8

    申请日:2013-05-24

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 一种钝齿棒杆菌溶氧诱导型启动子的筛选方法,属于蛋白质组学和基因工程领域。本发明首先通过2-DE技术结合质谱鉴定技术筛选钝齿棒杆菌不同溶氧条件下差异表达蛋白点,结合棒杆菌基因组信息将差异蛋白单位拷贝数高的2种蛋白作为研究对象。根据其编码基因克隆启动子序列命名为P-tkt和P-fum。分别替换穿梭载体pDXW-8上的tac启动子,并在其下游插入报告基因cat,分别转化大肠杆菌JM109和钝齿棒杆菌SYPA5-5,通过测定各重组菌在不同溶氧条件下CAT的活性,证明筛选到受高溶氧诱导的启动子P-tkt,首次获得来自钝齿棒杆菌高溶氧诱导型启动子,为钝齿棒杆菌在不同溶氧条件下表达外源基因提供了有效的工具。

    一种快速检测樟芝无性孢子存活率的方法

    公开(公告)号:CN103954547A

    公开(公告)日:2014-07-30

    申请号:CN201410189887.3

    申请日:2014-05-07

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种快速检测樟芝无性孢子存活率的方法,属于生物工程领域。该方法可用于检测樟芝孢子低温保藏样品、樟芝接种物(孢子悬浮液)及樟芝孢子悬浮液诱变物中樟芝孢子的活性(存活率)或致死率。该方法可用流式细胞仪(BD)或细胞活力分析仪(NC3000,Chemometec)进行检测。与传统的平板涂布法检测存活率法相比,该方法更为快捷、高效;与传统的孢子萌发率检测法相比,该方法更为准确、快捷。

    一种樟芝无性孢子低温保藏保护剂及其使用方法

    公开(公告)号:CN103667062A

    公开(公告)日:2014-03-26

    申请号:CN201310677756.5

    申请日:2013-12-13

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种樟芝无性孢子低温保藏保护剂及其使用方法,可用于樟芝菌种保藏及接种物保藏等。该保护剂组成为(w/w):甘油10%~30%,海藻糖5%~5%,蔗糖2%~10%,乳糖2%~10%,溶剂为生理盐水或水;保藏温度为-80oC~4oC。本发明所提供保护剂可使樟芝无性孢子在低温条件下(-80oC~4oC)长时间保藏(1年以上)并保持较高萌发率及生长代谢活性。保藏的樟芝无性孢子可作为樟芝菌种进行活化、转接及育种等,取代传统的斜面及甘油管,为实验室樟芝菌种保藏提供了一种新的保藏方法,且该方法保藏时间长、效果好;此外,保藏的樟芝无性孢子还可作为接种物进行樟芝液态发酵及固态发酵培养,为樟芝发酵生产节约了种子制备的时间及成本,提高了生产效率。

    一种利用超临界CO2萃取技术提取云芝发酵产物中挥发油的方法

    公开(公告)号:CN103509650A

    公开(公告)日:2014-01-15

    申请号:CN201310451821.2

    申请日:2013-09-28

    Abstract: 本发明公开了一种利用超临界CO2萃取技术提取云芝发酵产物中挥发油的方法。本发明的方法包括如下步骤:(1)将1-20L云芝液体发酵产物,或1-2kg云芝固体发酵产物放入萃取釜中进行超临界CO2萃取;萃取釜的萃取压力为10-35MPa,萃取温度为30-65℃;CO2流体流量为30-100kg/h;萃取时间为0.5-24h;萃取后进入分离釜进行分离:分离釜I内压力为5-25MPa,温度为30-50℃;分离釜II内压力为7-15MPa,温度为20-50℃;(2)将分离后的云芝挥发油提取液,经过3000-15000转/min的高速离心进行分离,得到云芝挥发油;(3)将分离后的云芝挥发油收集并称重。本发明所用的超临界CO2萃取技术成熟,操作简单,生产成本低,制备的云芝挥发油产品稳定性高、香味纯正。

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