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公开(公告)号：CN114525268A
公开(公告)日：2022-05-24
申请号：CN202210086048.3
申请日：2022-01-25
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种pH耐受性提高的谷氨酸脱羧酶突变体及其在γ‑氨基丁酸合成中的应用，该突变体通过将氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示的谷氨酸脱羧酶突变得到。该突变体在pH 6.5时的酶活提高至原始(SEQ ID NO.3所示)的178％，在5L罐中12h分批补料1000g底物最终产量高达688.13g/L，比原始谷氨酸脱羧酶生产性能提高约52％，最终摩尔转化率可达98.2％。本发明不仅拓宽了GAD在最适pH下的酶活，还拓宽其在偏中性pH下的酶活，增强了该酶合成γ‑氨基丁酸的能力，使其更适应于工业生产。
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公开(公告)号：CN111206011B
公开(公告)日：2022-02-15
申请号：CN202010147933.9
申请日：2020-03-05
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种重组谷氨酸棒杆菌及其在生产L‑谷氨酸中的应用，属于生物技术领域。本发明提供了一种可高产L‑谷氨酸的重组谷氨酸棒杆菌C.glutamicum DL01/pDXW‑10‑ppc，将此重组谷氨酸棒杆菌C.glutamicum DL01/pDXW‑10‑ppc接种至5‑L发酵罐中发酵48h，即可使发酵液中L‑谷氨酸的产量高达136.09±5.53g/L、糖酸转化率高达58.9％，分别较野生型谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)G01提高了45.5％和13.7％。
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公开(公告)号：CN110607319B
公开(公告)日：2021-11-23
申请号：CN201911040157.6
申请日：2019-10-29
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种适用于枯草芽孢杆菌分泌表达蛋白的表达载体及应用，属于基因工程和生物技术领域。该分泌载体是将编码信号肽SPphoD的基因(核苷酸序列如SEQ ID NO.1)和编码分子伴侣PrsA的基因(核苷酸序列如SEQ ID NO.3)分别连接到pMA5‑P43上构建分泌质粒pMA5‑SPP。以pMA5‑SPP为载体，在枯草芽孢杆菌中表达L‑天冬酰胺酶，其胞外分泌量占总表达量的38％，胞外分泌量是常见信号肽SPpel介导下分泌量的2.95倍。
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公开(公告)号：CN111705027B
公开(公告)日：2021-11-16
申请号：CN202010508135.4
申请日：2020-06-05
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种利用微生物发酵生产乙偶姻的方法，属于生物工程技术领域。本发明构建的基因工程菌株B.subtilis 6‑7ΔacuBΔacoBΔrex于5L发酵罐中培养96h得到67.5g·L‑1的乙偶姻，乙偶姻的生产效率提高至0.7g·L‑1·h‑1，乙偶姻摩尔得率为0.92，相对于原始菌株B.subtilis 6‑7，乙偶姻摩尔得率提高了37％。此外，基因工程菌株B.subtilis 6‑7ΔacuBΔacoBΔrex不含抗性基因，得到的产物可直接用于食品加工中，安全高效。
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公开(公告)号：CN111607578B
公开(公告)日：2021-11-12
申请号：CN202010460312.6
申请日：2020-05-27
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种氧甲基转移酶突变体及其在生产灵菌红素中的应用，属于生物技术领域。本发明提供了可高产灵菌红素的粘质沙雷氏菌工程菌JNB5‑1/S53CPigF和JNB5‑1/G176C/M245C/S53CPigF，粘质沙雷氏菌工程菌S53CPigF和JNB5‑1/G176C/M245C/S53CPigF分别表达S53CPigF和G176C/M245C/S53CPigF，将粘质沙雷氏菌工程菌JNB5‑1/S53CPigF和JNB5‑1/G176C/M245C/S53CPigF分别接种至发酵培养基中发酵96h，即可使发酵液中灵菌红素的产量分别高达7.24g/L和7.02g/L。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110499301B
公开(公告)日：2021-10-29
申请号：CN201910807954.6
申请日：2019-08-29
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种催化效率提高的内消旋‑二氨基庚二酸脱氢酶突变体，属于基因工程技术领域。本发明通过对SEQ ID NO.2的内消旋—二氨基庚二酸脱氢酶进行单点/双位点突变，并在大肠杆菌中成功表达并纯化出突变体酶D94A、W123K、D94A/W123K、W148K，通过酶活测定，发现所述三种内消旋—二氨基庚二酸脱氢酶突变体具有相对于野生型较高的催化活性，如突变体酶DAPDH‑D94A、DAPDH‑W123K、DAPDH‑D94A/W123K催化苯丙酮酸的效率分别提高了3.5、1.5、1.3倍，成功提高了关键酶的酶活。
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公开(公告)号：CN113122527A
公开(公告)日：2021-07-16
申请号：CN202110447738.2
申请日：2021-04-25
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提供了一种酶活提高及最适pH改变的天冬氨酸酶突变体，属于基因工程技术领域；所述天冬氨酸酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明的天冬氨酸酶突变体是在来源于Bacillus sp.YM55‑1天冬氨酸酶的基础上，将第12位亮氨酸突变为天冬氨酸，将第166位酪氨酸突变为谷氨酸，将第169位谷氨酰胺突变为谷氨酸，将第314位精氨酸突变为甲硫氨酸，从而提升了该酶的pH适应性，同时增强了该酶合成β‑氨基丁酸的能力，有利于工业化生产β‑氨基丁酸。
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公开(公告)号：CN112812983A
公开(公告)日：2021-05-18
申请号：CN202110176165.4
申请日：2021-02-06
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种生产菜油甾醇的酿酒酵母工程菌及构建方法，属于基因工程和生物工程领域。本发明通过将7‑脱氢胆固醇还原酶的表达盒元件导入到酵母细胞体内，利用CRISPR/Cas9基因操作系统整合至酵母基因组中，还敲除了C‑22甾醇去饱和酶，解除麦角固醇分支途径的竞争，实现了从葡萄糖到菜油甾醇的酵母合成。本发明的方法工艺简单，绿色环保，可用于发酵生产菜油甾醇。采用本发明提供酿酒酵母工程菌株BY4742‑Δerg5‑TEF1p‑dhcr7‑ADH1t制备得到的菜油甾醇的产量，在摇瓶阶段可达253.35mg/L，发酵罐水平产量可达916.88mg/L，比菌株在摇瓶阶段菜油甾醇的产量提升了2.6倍。
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公开(公告)号：CN108587997B
公开(公告)日：2021-03-02
申请号：CN201810447027.3
申请日：2018-05-11
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种利用重组谷氨酸棒杆菌全细胞转化生产9‑OH‑AD的方法，属于生物工程和生物技术领域。本发明通过大肠杆菌和谷氨酸棒杆菌之间的穿梭质粒pXMJ19，将来源于Mycobacterium sp.Strain VKM Ac‑1817D的3‑甾酮9α‑羟基化酶的氧化亚基KshA，还原亚基KshB成功在C.glutamicum ATCC13032中共表达。以此工程菌全细胞菌体作为生物催化剂，转化生产9α‑羟基雄甾‑4‑烯‑3,17‑二酮，底物雄甾‑4‑烯‑3,17‑二酮的摩尔转化率达到99.5％。本发明方法生产9α‑羟基雄甾‑4‑烯‑3,17‑二酮具有效率高，专一性强,能耗低等优点。
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公开(公告)号：CN105238824B
公开(公告)日：2021-02-19
申请号：CN201510816512.X
申请日：2015-11-23
Applicant: 江南大学
Abstract: 一种信号肽及其在利用淀粉产L‑谷氨酸重组菌中的应用，属于基因工程和酶工程领域。本发明通过分子克隆技术和基因工程技术将去除N端信号肽的α‑淀粉酶的融合前期筛选出一条高效分泌α‑淀粉酶的信号肽SEQ ID N0.1，构建表达载体，在高产L‑谷氨酸的菌种中表达。首次报道，以该信号肽介导分泌α‑淀粉酶的重组天津短杆菌SW07‑1/pMSPamy能利用廉价淀粉发酵生产L‑谷氨酸，最优碳源添加条件下5L发酵罐上产量为67g/L。
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