公开(公告)号：CN115806908B

公开(公告)日：2025-02-11

申请号：CN202211304558.X

申请日：2022-10-24

Applicant: 贵州中鉴酒业集团有限公司 ,  江南大学

Inventor： 许正宏 ,  陆震鸣 ,  梁源 ,  时伟 ,  张晓娟 ,  柴丽娟 ,  史劲松 ,  陈福祥 ,  陈福伟

IPC: C12N1/20 ,  C12P17/12 ,  C12G3/02 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明属于发酵工程技术领域，具体公开了一株茅台慢生芽孢杆菌(Lentibacillus maotaii)JN110522，保存于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日期为2022年6月29日，保藏编号为CGMCC No.25214。该菌株可同时代谢产生高含量的2,3,5,6‑四甲基吡嗪和2,3,5‑三甲基吡嗪，2,3,5,6‑四甲基吡嗪产量可达到26.2±0.8mg/L，2,3,5‑三甲基吡嗪的含量可达4.1±0.4mg/L。本发明还公开了本菌株应用于在高温大曲发酵过程的压曲阶段可大幅度提高高温大曲中2,3,5,6‑四甲基吡嗪的和2,3,5‑三甲基吡嗪的含量，使高温大曲的酱香风味更佳突出，可用于制备高性能的大曲。利用该菌发酵得到的强化曲其吡嗪类化合物总产量、2,3,5,6‑四甲基吡嗪产量和2,3,5‑三甲基吡嗪产量和普通茅台慢生芽孢杆菌强化大曲相比，各吡嗪类化合物产量提升了1倍，应用价值很高。

公开(公告)号：CN119265168A

公开(公告)日：2025-01-07

申请号：CN202411566649.X

申请日：2024-11-05

Applicant: 江南大学

Inventor： 冯丹婷 ,  龚劲松 ,  陈欣然 ,  余民君 ,  徐文秀 ,  于博洋 ,  汪子凯 ,  黄晨成 ,  苏畅 ,  李恒 ,  史劲松 ,  许正宏

IPC: C12N9/78 ,  C12N15/55 ,  C12N15/70 ,  C12N15/75 ,  C12N15/81 ,  C12N15/77 ,  C12N1/21 ,  C12N1/19 ,  C12P17/12 ,  C12R1/19 ,  C12R1/125 ,  C12R1/84 ,  C12R1/15

Abstract: 本发明涉及一种新型腈水解酶及其在烟酸生物合成中的应用。本发明公开的新型腈水解酶的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，其氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。本发明的新型腈水解酶能够高效催化3‑氰基吡啶生成烟酸，尤其是启动子优化后的腈水解酶酶活提高，底物转化率达到100％，产物烟酸的累积浓度可达123.11g/L，对于绿色高效地制备烟酸及其衍生物具有重要的工业应用价值。

公开(公告)号：CN119020338A

公开(公告)日：2024-11-26

申请号：CN202411206449.3

申请日：2024-08-30

Applicant: 江南大学 ,  山东焦点福瑞达生物股份有限公司

Inventor： 李恒 ,  张林静 ,  史劲松 ,  龚劲松 ,  许正宏 ,  郑德强 ,  刘磊 ,  康传利 ,  廉少杰 ,  刘蔷

IPC: C12N9/88 ,  C12N15/60 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P19/12 ,  C12P19/00 ,  C12P19/04 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种透明质酸裂解酶及其在降解透明质酸中的应用。具体地，本发明提供了一种来源于肠杆菌(Enterobacter asburiae)的透明质酸裂解酶，克隆了其编码基因并在大肠杆菌体系实现了重组表达，酶活高达36715U/mL。酶学性质表征实验表明该酶能够在pH 6.5‑9.0范围内发挥透明质酸降解作用，且对透明质酸有着较高的底物特异性，在短时间内即可将较高分子量的透明质酸降解为低分子量透明质酸或寡聚透明质酸，降解效率高，最终的降解产物为不饱和透明质酸二糖。本发明提供的透明质酸裂解酶可以高效的生产不饱和透明质酸二糖，为后续为进一步研究透明质酸寡糖的活性评价奠定了基础。

公开(公告)号：CN118995710A

公开(公告)日：2024-11-22

申请号：CN202411181746.7

申请日：2024-08-27

Applicant: 江南大学

Inventor： 张晓娟 ,  张晓梅 ,  任家卫 ,  徐国强 ,  李会 ,  许正宏 ,  史劲松

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/67 ,  C12N15/70 ,  C12N15/54 ,  C12N15/65 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明涉及一种高性能终止子及其在提高基因表达中的应用，属于生物技术领域。本发明以强终止子T7为模板，对发卡基部和U‑tract下游位置的几个碱基进行随机化构建了大型终止子突变文库，基于FlowSeq技术对文库进行分选并测序，解析了有利于提高上游基因表达水平的高性能终止子特征。在表达Nrk酶和Sam2酶的两种不同表达体系中应用高性能终止子，对上游基因mRNA水平和发酵产物产量进行检测，发现替换高性能终止子后两种表达体系的上游基因mRNA水平提高了30％～60％，相应发酵产物的产量提高了40％～70％。因此，本发明提供的方案，对于原核体系中上游基因表达水平的提高具有重要的意义。

公开(公告)号：CN118931874A

公开(公告)日：2024-11-12

申请号：CN202411100911.1

申请日：2024-08-12

Applicant: 江南大学

Inventor： 史劲松 ,  张鹏 ,  龚劲松 ,  孔晓丽 ,  苏畅 ,  李恒 ,  许正宏

IPC: C12N9/16 ,  C12N15/75 ,  C12N15/63 ,  C12N15/55 ,  C12N1/21 ,  C12P7/6481 ,  C12R1/125

Abstract: 本发明涉及一种高效表达磷脂酶D的方法及应用，属于基因工程技术领域。本发明通过表达元件共优化策略，实现了磷脂酶D的高效分泌表达，胞外酶活达到4055.9U/mL，相较于未改造菌株，酶活提高了43.6倍。本发明还根据此表达体系，通过整合位点筛选和多拷贝整合策略，首次实现了磷脂酶D的整合表达，整合菌株胞外酶活达到392.9U/mL。本发明的磷脂酶D具有良好的催化活性，能在水相条件下以大豆卵磷脂为底物高效合成磷脂酸。重组菌株酶活稳定性好、发酵周期短、催化效率高，为大规模工业化生产奠定了基础，表明该菌株在磷脂类衍生物的生物合成领域具有潜在应用价值。同时，整合菌株避免了发酵过程中抗生素的添加，拓宽了菌株的应用范围。

公开(公告)号：CN118773041A

公开(公告)日：2024-10-15

申请号：CN202410699499.3

申请日：2024-05-31

Applicant: 江南大学 ,  上海韬睿生物科技有限公司

Inventor： 刘涛 ,  王真真 ,  王康 ,  马旭东 ,  陆剑文 ,  彭思明 ,  谢楠 ,  钱建瑛 ,  史劲松 ,  龚劲松 ,  苏畅 ,  徐凌锋 ,  许正宏

IPC: C12N1/20 ,  C12N9/52 ,  C12N5/0775 ,  A23J3/30 ,  A23J3/04 ,  A23L29/00 ,  A61K8/99 ,  A61K8/65 ,  A61Q19/00 ,  A61Q5/12 ,  A61K35/742 ,  A61K38/39 ,  A61P35/00 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明公开了一株产胶原蛋白酶的球形赖氨酸芽孢杆菌及其在组织分离中的应用，属于生物技术领域。本发明针对现有技术的不足，提供了一株能够产胶原蛋白酶、降解胶原蛋白的菌株及其在细胞分离中的应用。该菌株属于Lysinibacillus菌属，能够分泌胶原蛋白酶，可用于脂肪组织分离和干细胞的获取。本发明提供的球形赖氨酸芽孢杆菌JN‑51，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC NO.29954，所述球形赖氨酸芽孢杆菌JN‑51及其发酵液可在生物医药领域、食品加工领域、制革工业、药物传递、环境保护领域、化妆品领域、医疗治疗领域中水解蛋白的应用。

公开(公告)号：CN118599804A

公开(公告)日：2024-09-06

申请号：CN202410410268.6

申请日：2024-04-07

Applicant: 赛诺根生物科学有限公司 ,  江南大学

Inventor： 龚劲松 ,  毛歆安 ,  乔治·马歇尔 ,  史劲松 ,  许正宏 ,  苏畅 ,  李恒 ,  徐国强

IPC: C12N9/12 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12N15/54 ,  C12P19/30 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种烟酰胺核糖激酶突变体在大肠杆菌中的高效异源表达及其应用。本发明提供了一种能够在大肠杆菌中异源表达的烟酰胺核糖激酶及其突变体，所述突变体的烟酰胺核糖激酶活性较亲本有了明显提升。在所述烟酰胺核糖激酶及其突变体的基础上，本发明还提供了一种高效异源表达所述烟酰胺核糖激酶的方法，即在构建重组质粒时，通过在质粒中引入核糖体结合位点、插入特定的启动子序列等，使表达所得烟酰胺核糖激酶的酶活力较对照更高。此外，本发明还提供了培养表达所述烟酰胺核糖激酶的重组菌的方法，使表达所得烟酰胺核糖激酶的酶活最高为208.3U/mL。本发明有利于β‑烟酰胺单核苷酸的高效生物合成，适合工业化生产和应用。

公开(公告)号：CN114369561B

公开(公告)日：2024-07-02

申请号：CN202210026910.1

申请日：2022-01-11

Applicant: 江南大学

Inventor： 徐国强 ,  王籍阅 ,  刘燕 ,  张晓娟 ,  张晓梅 ,  史劲松 ,  许正宏

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/77 ,  C12P13/02 ,  C12R1/15

Abstract: 本发明公开了一种调控CapBCA单体表达水平的菌株及在聚谷氨酸生产中的应用，本发明将天然生产菌地衣芽孢杆菌的γ‑聚谷氨酸合成酶的基因簇capBCA克隆至一株高产谷氨酸的谷氨酸棒杆菌F343中进行外源表达，在此基础上，利用不同数量的lacO调控合成酶基因簇各基因的表达水平，获得的重组菌株所生产的γ‑PGA产量为3.63～5.84g/L，产率为0.15～0.27g/L/OD600。还发现单独提高CapB和CapC的表达强度，及适度表达CapA均有利于γ‑PGA的合成，而且CapC对于γ‑PGA的合成发挥着至关重要的作用，其表达水平对γ‑PGA产量的影响贡献度可达68.24％。结果有助于深入了解γ‑PGA合成酶单体的功能，以及对γ‑PGA合成的影响规律。

公开(公告)号：CN117209573B

公开(公告)日：2024-06-28

申请号：CN202311145074.X

申请日：2023-09-06

Applicant: 江苏集萃未来食品技术研究所有限公司 ,  江南大学

Inventor： 张晓梅 ,  黄雅敏 ,  高宇洁 ,  李会 ,  史劲松 ,  许正宏

IPC: C07K14/34 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12Q1/6897 ,  G01N33/68 ,  G01N21/64 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种转录因子NCgl0581突变体及其在L‑丝氨酸检测中的应用，属于生物检测技术领域。本发明通过分子对接，获得转录因子NCgl0581与L‑丝氨酸的关键结合位点，进一步进行模型分析及虚拟筛选，获得L‑丝氨酸生物传感器突变体NCgl0581E136P。经实验验证，基于突变体NCgl0581E136P构建的生物传感器可响应25mM丝氨酸，比突变前的响应浓度降低1倍。本发明通过突变降低了生物传感器的检测下限，为低浓度L‑丝氨酸的检测奠定基础，具有很好的应用价值和前景。

公开(公告)号：CN116004593B

公开(公告)日：2024-04-12

申请号：CN202211559294.2

申请日：2022-12-06

Applicant: 江苏集萃未来食品技术研究所有限公司 ,  江南大学

Inventor： 龚劲松 ,  陆震鸣 ,  汪子凯 ,  许正宏 ,  史劲松 ,  苏畅 ,  冯丹婷

IPC: C12N9/78 ,  C12N15/55 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P7/40 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种半理性设计酶定向进化方法及其在腈水解酶分子改造中的应用，本发明应用ALF‑扫描对腈水解酶的活性口袋进行了几何重塑，以改变底物偏好性并提高催化效率。通过利用该方法结合定点饱和突变，成功获得了4个具有强芳香腈底物偏好性和高催化活性的突变体，分别为W170G，V198L，M197F和F202M。为了探究这4个突变的协同关系，又围绕这4个突变体构建了6个双组合突变体以及4个三组合突变体。通过组合突变，获得了协同增强突变体V198L/W170G，该突变体对芳香腈具有显著的底物偏好性，并且具有更好的催化效率。与野生型相比，其对4种芳香腈底物的比酶活分别提高了11.10、12.10、26.25和2.55倍。