-
公开(公告)号：CN114574490A
公开(公告)日：2022-06-03
申请号：CN202210238177.X
申请日：2022-03-11
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种巴斯德毕赤酵母组成型启动子及其改造方法和应用，所述组成型启动子为P0887‑GAP、P0887‑AOX1和P0887‑GS中的一种；所述启动子P0887‑GAP的核苷酸序列如SEQ ID NO.31所示；所述启动子P0887‑AOX1的核苷酸序列如SEQ ID NO.32所示；所述启动子P0887‑GS的核苷酸序列如SEQ ID NO.33所示。本发明通过替换启动子P0887的5’非翻译区序列，改造后启动子的转录活性基本不变，荧光强度提高至原始启动子的37倍。
-
公开(公告)号：CN109097362B
公开(公告)日：2022-05-20
申请号：CN201810990251.7
申请日：2018-08-28
Applicant: 江南大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/77
Abstract: 本发明公开了操纵子、其载体及其应用，其中，所述操纵子序列至少包括，3’端位于谷氨酸棒杆菌SEQ ID NO：6基因编码序列ATG上游201～257bp中任一碱基、5’端位于谷氨酸棒杆菌SEQ ID NO：6基因编码序列ATG上游308bp～345bp中任一碱基。本发明操纵子被诱导剂诱导后，蛋白表达活性显著高于传统Ptac的诱导表达活性，是一种超高效操纵子。本发明操纵子能够用于原核生物内源或外源蛋白的高效表达。
-
公开(公告)号：CN114457104A
公开(公告)日：2022-05-10
申请号：CN202210068136.0
申请日：2022-01-20
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种猪伪狂犬病病毒糖蛋白gD的表达载体及其制备方法和应用，在启动子下游含有PRV‑gD基因的表达质粒；其中，所述启动子为组成型启动子H36,所述组成型启动子H36的基因序列如SEQ ID NO.4所示，所述PRV‑gD基因序列如SEQ ID NO.2所示。本发明表达的PRV‑gD具有免疫活性，为猪伪狂犬病亚单位疫苗的研究和建立高效免疫学检测技术提供技术指导和材料。
-
-
公开(公告)号：CN110591917A
公开(公告)日：2019-12-20
申请号：CN201910893204.5
申请日：2019-09-20
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提供了一种质粒丢失菌株的高通量筛选方法，其不仅操作简便，而且筛选效率高。一种质粒丢失菌株的高通量筛选方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）将含有质粒的菌株进行传代培养；（2）将传代后的菌悬液在固体平板培养基上划线，培养至长出单菌落；（3）将含筛选压力培养基和不含筛选压力培养基分别分装至多孔板中；（4）挑取单菌落并接种至含有含筛选压力培养基的多孔板的培养孔中，同时挑取同一单菌落并接种至含有不含筛选压力培养基的多孔板的相对应位置的培养孔；（5）培养结束后，在含筛选压力培养基中无法生长而在不含筛选压力培养基中可以生长的菌株即为质粒丢失菌株；筛选压力为抗生素压力、营养缺陷型压力或温度压力。
-
Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN106566820A
公开(公告)日：2017-04-19
申请号：CN201610836135.0
申请日：2016-09-20
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N9/2417 , C12N15/77 , C12N2800/101 , C12Y302/01001
Abstract: 本发明提供了α‑淀粉酶的制备方法，其能解决现有技术中通过枯草芽孢杆菌制备α‑淀粉酶后期纯化步骤繁琐、得到纯品不易的技术问题。其包括以下步骤：（2）在α‑淀粉酶基因上游添加e3 SD序列、下游添加组氨酸标签，获得改造后的α‑淀粉酶基因；（3）将改造后的α‑淀粉酶基因连接到载体pxmj19‑aph213上，获得重组表达载体pxmj19‑aph213‑amy；（4）将重组表达载体pxmj19‑aph213‑amy转入谷氨酸棒杆菌，获得重组菌；（5）培养重组菌，分泌表达α‑淀粉酶；（6）α‑淀粉酶的纯化，包括：将含有α‑淀粉酶的上清进行亲和层析，介质为镍柱。
-
公开(公告)号：CN116732108B
公开(公告)日：2024-12-10
申请号：CN202310197297.4
申请日：2023-03-03
Applicant: 江南大学
IPC: C12N15/90 , C12N9/22 , C12N15/113 , C12N15/81
Abstract: 本发明公开了一种提高基因敲除效率的方法及其应用。本发明提供的敲除技术是基于CRISPR‑Cas9质粒，进一步采用“回补策略”来进行目标基因的敲除。本发明所述的“回补策略”即是将目标敲除基因突变后表达于外源质粒，将基因组上的目标基因敲除后再将回补质粒消除，从而达到目标基因的缺失。“回补策略”的使用使得目标基因的敲除效率从0提高到了8％。
-
公开(公告)号：CN116606752B
公开(公告)日：2024-08-13
申请号：CN202310570768.1
申请日：2023-05-19
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种毕赤酵母甲酸盐营养缺陷型菌株及其制备方法和应用，其包括：毕赤酵母中包含一个缺失fh和/或gd的质粒。本发明提供的菌株能够在甲酸代谢中，基于K.phaffii.GS115内源甲酸同化途径的关键蛋白进行改进，针对K.phaffii.GS115菌株的甲酸代谢进行了改进。本发明提供的菌株能够实现甲酸盐营养缺陷型菌株的制备，表明了相应极影在甲酸同化途径中的重要作用。
-
公开(公告)号：CN116240229B
公开(公告)日：2024-06-18
申请号：CN202310178204.3
申请日：2023-02-28
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高产β‑榄香烯和germacreneA的重组菌的构建方法。首先，通过germacreneA合成酶的筛选和甲羟戊酸代谢途径的过表达实现β‑榄香烯和germacreneA的从头合成；然后，通过删除中心碳途径中的竞争途径确保了类异戊二烯途径中乙酰辅酶A、丙酮酸和甘油醛‑3‑磷酸的可用性；接着采用番茄红素颜色作为高通量筛选方法，通过易于出错的PCR诱变获得了优化的NSY305N。最后，在摇瓶中，通过关键途径酶、外排工程和翻译工程的最终构建的菌株β‑EL‑4产生了1161.09mg/L的β‑榄香烯和852.36mg/L的germacreneA，是目前报道的摇瓶水平的最高产量，在4‑L补料分批发酵中，β‑榄香烯和germacreneA的产量分别达到3.52g/L和2.13g/L。
-
公开(公告)号：CN118048291A
公开(公告)日：2024-05-17
申请号：CN202410359562.9
申请日：2024-03-27
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种提高毕赤酵母甲醇利用率的培养基及其制备方法，包括，YNB培养基、甲醇、组氨酸和无菌水；其中，以g/L计，所述YNB培养基为13.4，所述甲醇为31.64，所述组氨酸为0.04～0.16，溶剂为无菌水。本发明基于“K.phaffi.GS115A菌株的甲醇代谢能力较弱，需要优化培养基以增强其甲醇利用能力”这一问题，对毕赤酵母的MMH培养基进行改良，本发明提高了K.phaffi.GS115A菌株的甲醇利用效率，进一步推动甲醇营养细胞工厂的建设，对于实验科研有着重要的意义。
-
-
-
-
-
-
-
-
-
Search Results
84
records
(took 0.021 seconds)
