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公开(公告)号:CN111705027B
公开(公告)日:2021-11-16
申请号:CN202010508135.4
申请日:2020-06-05
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种利用微生物发酵生产乙偶姻的方法,属于生物工程技术领域。本发明构建的基因工程菌株B.subtilis 6‑7ΔacuBΔacoBΔrex于5L发酵罐中培养96h得到67.5g·L‑1的乙偶姻,乙偶姻的生产效率提高至0.7g·L‑1·h‑1,乙偶姻摩尔得率为0.92,相对于原始菌株B.subtilis 6‑7,乙偶姻摩尔得率提高了37%。此外,基因工程菌株B.subtilis 6‑7ΔacuBΔacoBΔrex不含抗性基因,得到的产物可直接用于食品加工中,安全高效。
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公开(公告)号:CN111607578B
公开(公告)日:2021-11-12
申请号:CN202010460312.6
申请日:2020-05-27
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种氧甲基转移酶突变体及其在生产灵菌红素中的应用,属于生物技术领域。本发明提供了可高产灵菌红素的粘质沙雷氏菌工程菌JNB5‑1/S53CPigF和JNB5‑1/G176C/M245C/S53CPigF,粘质沙雷氏菌工程菌S53CPigF和JNB5‑1/G176C/M245C/S53CPigF分别表达S53CPigF和G176C/M245C/S53CPigF,将粘质沙雷氏菌工程菌JNB5‑1/S53CPigF和JNB5‑1/G176C/M245C/S53CPigF分别接种至发酵培养基中发酵96h,即可使发酵液中灵菌红素的产量分别高达7.24g/L和7.02g/L。
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公开(公告)号:CN110499301B
公开(公告)日:2021-10-29
申请号:CN201910807954.6
申请日:2019-08-29
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种催化效率提高的内消旋‑二氨基庚二酸脱氢酶突变体,属于基因工程技术领域。本发明通过对SEQ ID NO.2的内消旋—二氨基庚二酸脱氢酶进行单点/双位点突变,并在大肠杆菌中成功表达并纯化出突变体酶D94A、W123K、D94A/W123K、W148K,通过酶活测定,发现所述三种内消旋—二氨基庚二酸脱氢酶突变体具有相对于野生型较高的催化活性,如突变体酶DAPDH‑D94A、DAPDH‑W123K、DAPDH‑D94A/W123K催化苯丙酮酸的效率分别提高了3.5、1.5、1.3倍,成功提高了关键酶的酶活。
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公开(公告)号:CN113122527A
公开(公告)日:2021-07-16
申请号:CN202110447738.2
申请日:2021-04-25
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提供了一种酶活提高及最适pH改变的天冬氨酸酶突变体,属于基因工程技术领域;所述天冬氨酸酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明的天冬氨酸酶突变体是在来源于Bacillus sp.YM55‑1天冬氨酸酶的基础上,将第12位亮氨酸突变为天冬氨酸,将第166位酪氨酸突变为谷氨酸,将第169位谷氨酰胺突变为谷氨酸,将第314位精氨酸突变为甲硫氨酸,从而提升了该酶的pH适应性,同时增强了该酶合成β‑氨基丁酸的能力,有利于工业化生产β‑氨基丁酸。
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公开(公告)号:CN112812983A
公开(公告)日:2021-05-18
申请号:CN202110176165.4
申请日:2021-02-06
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种生产菜油甾醇的酿酒酵母工程菌及构建方法,属于基因工程和生物工程领域。本发明通过将7‑脱氢胆固醇还原酶的表达盒元件导入到酵母细胞体内,利用CRISPR/Cas9基因操作系统整合至酵母基因组中,还敲除了C‑22甾醇去饱和酶,解除麦角固醇分支途径的竞争,实现了从葡萄糖到菜油甾醇的酵母合成。本发明的方法工艺简单,绿色环保,可用于发酵生产菜油甾醇。采用本发明提供酿酒酵母工程菌株BY4742‑Δerg5‑TEF1p‑dhcr7‑ADH1t制备得到的菜油甾醇的产量,在摇瓶阶段可达253.35mg/L,发酵罐水平产量可达916.88mg/L,比菌株在摇瓶阶段菜油甾醇的产量提升了2.6倍。
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公开(公告)号:CN105238824B
公开(公告)日:2021-02-19
申请号:CN201510816512.X
申请日:2015-11-23
Applicant: 江南大学
Abstract: 一种信号肽及其在利用淀粉产L‑谷氨酸重组菌中的应用,属于基因工程和酶工程领域。本发明通过分子克隆技术和基因工程技术将去除N端信号肽的α‑淀粉酶的融合前期筛选出一条高效分泌α‑淀粉酶的信号肽SEQ ID N0.1,构建表达载体,在高产L‑谷氨酸的菌种中表达。首次报道,以该信号肽介导分泌α‑淀粉酶的重组天津短杆菌SW07‑1/pMSPamy能利用廉价淀粉发酵生产L‑谷氨酸,最优碳源添加条件下5L发酵罐上产量为67g/L。
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公开(公告)号:CN109628476B
公开(公告)日:2021-01-29
申请号:CN201910120166.X
申请日:2019-02-18
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种利用全细胞转化生产4‑羟基异亮氨酸的方法,属于基因工程技术领域。本发明提供了一段可用于编码L‑异亮氨酸羟化酶的基因(核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示),将此基因在枯草芽孢杆菌中进行表达,可使枯草芽孢杆菌能够高效合成比酶活高且4‑羟基异亮氨酸转化率高的L‑异亮氨酸羟化酶;将本发明的枯草芽孢杆菌工程菌培养12~24h,即可使粗酶液中的L‑异亮氨酸羟化酶的酶活高达171.67U/mL;利用本发明的的枯草芽孢杆菌工程菌生产得到的L‑异亮氨酸羟化酶比酶活和4‑羟基异亮氨酸转化率均较高,其中,比酶活可达437.6U/mg,4‑羟基异亮氨酸转化率可达99.87%。
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公开(公告)号:CN112111468A
公开(公告)日:2020-12-22
申请号:CN202011006299.3
申请日:2020-09-23
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种γ‑谷氨酰胺转肽酶突变体及其应用,属于基因工程领域;本发明在天然γ‑谷氨酰胺转肽酶的基础上,通过定点突变生物技术改造γ‑谷氨酰胺转肽酶分子结构,本发明所提供的突变体T401P、T422S,其转肽酶活较原始菌株分别提高了32.3%、41.8%;比酶活分别提高了近4.5倍、5.1倍,本发明表明401位点及422位点残基对于GGT催化苦味氨基酸具有重要影响,可用于改善含苦味氨基酸产品的口感与品质,这对于γ‑谷氨酰胺转肽酶在医药和食品行业的应用具有重要意义。
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公开(公告)号:CN111778225A
公开(公告)日:2020-10-16
申请号:CN202010729811.0
申请日:2020-07-27
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种天冬氨酸激酶突变体及其在生产L-苏氨酸中的应用,属于生物技术领域。本发明提供了一种可高产L-苏氨酸的重组谷氨酸棒杆菌C.glutamicum ATCC 13032/pET21a(+)-lysCr-asdA,此重组谷氨酸棒杆菌表达编码天冬氨酸激酶突变体G359D的基因以及编码天冬氨酸半醛脱氢酶的基因;将此重组谷氨酸棒杆菌接种至发酵罐中发酵60h,即可使发酵液中L-苏氨酸的产量达62.8g/L、糖酸转化率达到38%,较出发菌株谷氨酸棒杆菌ATCC 13032分别提高了29.5%和33.9%。
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公开(公告)号:CN107881159B
公开(公告)日:2020-10-09
申请号:CN201711352455.X
申请日:2017-12-15
Applicant: 江南大学
IPC: C12N9/06 , C12N15/53 , C12N15/70 , C12N1/21 , C12P7/40 , C12P13/04 , C12P35/02 , C12Q1/26 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种提高D‑氨基酸氧化酶可溶性异源表达的方法,属于基因工程技术领域。本发明的突变体是在SEQ ID N0.2所示的氨基酸的基础上,在甲硫氨酸后面添加三个额外的组氨酸和一个甘氨酸。本发明得到的突变体获得的体积酶活比野生型提高3.4倍。同时突变体经5L发酵罐发酵最终获得体积酶活为86.8U/mL,体积产率为4.52kU·L‑1·h‑1,为圆冬红酵母在大肠杆菌中表达获得的最高酶活,加强了该酶的工业应用潜力。
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